172446. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-[L-(-)-gamma-amino-alfa-hidroxi-butiril]-kanamicin A előállítására

5

172446

6

0,5-1 mól V képletű vegyületet és ugyanennyi diciklohexilkarbodiimidet, és 0,005-0,25 mól VI képletű vegyületet alkalmazva -10 C° és 35 C°, előnyösen 5 C° és 25 C° közötti hőmérséklettartományban, legalább 10 órán át az a) lépés szerinti 5 oldószerrendszerben reagáltatjuk, majd a szerves oldószert eltávolítjuk, és a maradékot a már ismertetett módon in situ hidrogénezzük.

A fenti módosított eljárás egy előnyös kiviteli módja szerint 1 mól III általános képletű vegyü- 10 letre 0,5-0,85 mól V képletű vegyületeket és ugyanennyi diciklohexilkarbodiimidet és 0,05-0,425 mól VI képletű vegyületet alkalmazunk, és a reakciót -f(5-25) C° hőmérséklettartományban 1-3 órán át, az a) lépés szerinti oldószer- 15 rendszerben végezzük, vagy egy alternatív módon,

1 mól III általános képletű vegyületre 0,5—0,85 mól V képletű vegyületet és ugyanennyi diciklohexilkarbodiimidet és 0,05-0,425 mól VI képletű vegyületet alkalmazunk, és a reakciót 15 20 és 30 C° közötti hőmérséklettartományban, 15-25 órán át végezzük. A legelőnyösebb reakciókörülmények: 1 mól III általános képletű vegyületre 0,6—0,75 mól V képletű vegyület és ugyanennyi diciklohexilkarbodiimid és 0,06-0,375 mól 25 VI képletű vegyület, 20 és 30 C° közötti hőmérséklet és 15—25 óra reakcióidő.

A találmány tárgyát képezi továbbá egy új, javított eljárás a II képletű kiindulási vegyület előállítására. 30

A találmány szerint úgy járunk el, hogy a kanamicin A szabad bázist N-benziloxikarboniloxi-5-norbornén-2,3-dikarboximiddel kezeljük, 1 mól kanamicin A-ra 0,5—1,5 mól N-benziloxikarboniloxi-5-norbornén-2,3-dikarboximidet alkalmazva, vagy kiváltképpen a vegyületeket 1 : 1 mólarányban reagáltatva, majd a kapott terméket tisztítjuk úgy, hogy szerves oldószerrel, például n-butanollal extraháljuk, és a vizes fázist kromatografáljuk.

A fenti reakciót előnyösen víz és vízzel elegyedő szerves oldószer rendszerében, így például tetrahidrofurán-víz keverékében, még előnyösebben 40-60% tetrahidrofurán-koncentrációban végezzük, 0C° és 25 C° közötti hőmérséklettartományban, előnyösen 5 C° és 10C° közötti hőmérsékleten, legfeljebb 6 órán át, előnyösen 4 órán át.

Az I képletű vegyület, az l-N-[L-(—)-7-amino-a-hidroxi-butirilj-kanamicin A (jelölése BB-K8) a kanamicin A bázisnál előnyösebb antibakteriális hatással rendelkezik. Az alábbi két táblázat szemlélteti a kanamicin A és az I képletű vegyület (BB— K8) minimális gátló koncentrációit (a táblázatokban MIC = minimal inhibitory concentration) számos Gram-pozitív és Gram-negatív baktérium ellen, amelyeket a Steer-féle agar-hígításos módszerrel (1. táblázat) és a kétszeres-hígításos módszerrel (2. táblázat) készítünk elő. Az 1. táblázat szerinti kísérleteknél Müller-Hinton agar táptalajt és a 2. táblázat szerinti kísérleteknél marhaszív-főzet táptalajt használunk.

(MIC mg/ml)

Mikroorganizmus

Kanamicin A (6-8198)

I képletű veg> (BB-K8)

Alk. faecalis A-9423

16

8

Alk. faecalis A—20648

>125

>125

Ént. cloacae A—0656

4

4

Ént. species A—20364

>125

2

Ent. hafniae 1 A—20674

1

1

E. coli A—0636

2

1

E. coli A—20664

16

4

E. coli A -20665

>125

1

E. coli A—20507

32

2

E. coli A-205 20

>125

4

E. coli A—20365

> 125

1

E. coli A-20684

2

2

E. coli A-20682

>125

2

E. coli A-20683

>125

8

E. coli A—20681

>125

2

E. coli A—15119

4

4

K. pneumoniae A-0967

4

4

K. species A—20328

>125

2

K. species A—20330

■ 32

32

K. species A—20634

>125

4

K. pneumoniae A—20680

>125

4

K. pneumoniae A—0077

1

1

Pr. mirabilis A-9900

2

2

Pr. morganii A-15153

2

2

Pr. vulgaris A-9555

2

1

Pr. rettgeri A-9636

0,25

0,25

Pr. mirabilis A—20645

4

4

3