172446. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-[L-(-)-gamma-amino-alfa-hidroxi-butiril]-kanamicin A előállítására
27 172446 28 A fenti eredményekből látható, hogy a reakcióban I képletű vegyület képződik akkor is, ha N-hidroxi-5-norbornén-2,3-dikarboximid egyáltalán nincs jelen. A táblázatból azonban az is kitűnik, hogy az I képletű vegyület legjobb hozamát akkor kapjuk, ha az N-hidroxi-5-norbornén-2,3-dikarboximid az acilezési reakcióban alkalmazott 4-benziloxikarbonilamino-2-hidroxi-vajsav mólnyi mennyiségére 10-50 mól%-ban van jelen. A pontos mechanizmus, amellyel a blokkolt kanamicin A acilezése végbemegy, nem ismeretes. Azt azonban megállapítottuk, hogy N-hidroxi-5-norbornén-2,3- -dikarboximid jelenlétében jobbak a hozamok az előzőleg elérteknél. 21. példa 1 -N-[L-(—)-7-amino-a-hidroxi-butiril-kanamicin A (1) A 18. példa szerint előállított 18,6 g (20,0mmól) 6’-Cbz-l,3,3”-triszalicilal-kanamicin A-t 45 C°-on 55 ml dimetilformamidban feloldunk. Az oldathoz 7,3 ml vizet és 102 ml acetont adunk, majd kb. 25 C°-ra lehűtjük, és 9,9 mmól L-(-)-7- -b e nzilo xikarbonilamino-a-hidroxi-vajsav-N-hidroxi-szukcinimid-észtert 50 ml acetonban oldva egyszerre hozzáadunk. A reakcióelegyet kb. 25 C°-on 40 órán át keverjük. Ezután 150 ml vizet és néhány kristály 6’-Cbz-l,3,3”-triszalicilal-kanamicin A-t adunk a reakciókeverékhez, és 25 C°-on 1 órán át, majd 0—5 C°-on 3 órán át keverjük. A feleslegben levő és nem reagált szalicilaldehid-Schiff bázist kristályosodás után kiszűrjük. A szűrőlepényt 60 ml 50%-os vizes acetonnal mossuk, majd megszárítjuk. 9,4 g Schiff bázist kapunk vissza, op. (nyers): 170-185 C°. A fenti szűrletet 40 ml metilénkloriddal kezeljük, és a pH-értékét 6,2-ről 2,0-re beállítva további kiindulási anyagot távolítunk el. A fázisokat szétválasztjuk, és a vizes fázist 2 x 40 ml metilénkloriddal extraháljuk. A vizes fázis pH-értékét 3,7-re beállítjuk, és a kevés acetont és metilénkloridot vákuumban eltávolítjuk. Ezután a vizes oldatot 3,0 g 5%-os Pd/C katalizátor jelenlétében 3 atm hidrogénnyomáson 24C°-on 15 órán át hidrogénezzük. A reakciókeveréket diatomaföldön szűrve a katalizátort eltávolítjuk. A szürlet térfogatát 100 ml-re kiegészítjük. Ebből az oldatból 1 ml-t kiveszünk lemez- és csészevizsgálat céljára. A lemezpróba 1936 pg/ml és a csészepróba 2325 pg/ml I képletű vegyületet mutat, ami 33,4% végtermék-hozamnak felel meg. A visszamaradó 99 ml oldatot 30 ml térfogatra koncentráljuk, és például a 14. példában leírtak szerint oszlopon kromatografáljuk. Az I képletű vegyületet tartalmazó frakciókat (500 ml) kb. 20 ml-re koncentráljuk, és a koncentrátumhoz 45 ml metanolt, majd cseppenként kb. 25 ml izopropanolt adunk a kristályosodás megindítására. A kristályos anyagot kiszűrjük, metanol-izopropanol 50:50 keverékével mossuk és szárítjuk. 2,31 g I képletű vegyületet (BB-K8) kapunk. A szilárd termék lemezpróbája 836pg/ml anyagot jelez, ami 83,6% tisztaságnak felel meg, és a 9,9 mól kiindulási anyagra a tiszta I képletű vegyület hozama 33,3%. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az I képletű l-[L-(—)-7-amino-a-hidroxi-butiril]-kanamicin A előállítására, azzal jellemezve, hogy (1) a II képletű vegyületet egy aldehiddel, így benzaldehiddel, szalicilaldehiddel, p-nitrobenzaldehiddel, p-metoxi-benzaldehiddel vagy pivalinaldehiddel kezeljük, 1 mól II képletű vegyületre legalább 3 mól aldehidet alkalmazva, és (2) az így kapott III általános képletű vegyületet — a képletben Z jelentése az a), b), c), d) vagy e) képletű csoport — in situ vagy elkülönítés után a IV képletű vegyülettel, vagy V és VI képletű vegyületekkel kezeljük, 1 mól III általános képletű vegyületre legalább 0,5 mól IV vagy V képletű vegyületet alkalmazva, és az így kapott terméket in situ hidrogénezzük. (Elsőbbsége: 1973. november 14.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy (1) a II képletű vegyületet egy aldehiddel, így benzaldehiddel, p-nitro-benzaldehiddel, szalicilaldehiddel, p-metoxi-benzaldehiddel vagy pivaldehiddel kezeljük, 1 mól II képletű vegyületre legalább 3 mól aldehidet alkalmazva, vízzel elegyedő, protikus vagy aprotikus szerves oldószerben, vagy ezek keverékeiben, vagy ezek vizes keverékeiben, 5 C° és a visszafolyatás hőfoka közötti hőmérsékleten, 30 perc - 5 óra időtartamig, és (2) az így kapott III általános képletű vegyületet - a képletben Z jelentése az a), b), c), d) vagy e) képletű csoport — a IV képletű vegyülettel vagy V és VI képletű vegyülettel kezeljük, 1 mól III általános képletű vegyületre legalább 0,5 mól IV vagy V képletű vegyületet alkalmazva, -10 és 35 C° közötti hőmérséklet-tartományban, legalább 1 órán át vagy (1) lépés szerinti oldószerrendszerben, majd a szerves oldószert eltávolítjuk, és a maradékot in situ hidrogénezzük, hidrogénnel, fémkatalizátor, így palládium, platina, Raney-nikkel, ródium, ruténium vagy nikkel jelenlétében, vízben vagy víz és vízzel elegyedő oldószer rendszerében, 3—5 pH-értéken. (Elsőbbsége: 1974. május 23.) 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy (1) a II képletű vegyületet egy aldehiddel, így benzaldehiddel, szalicilaldehíddel, p-nitro-benzaldehiddel vagy p-metoxi-benzaldehiddel kezeljük, 1 mól II képletű vegyületre legalább 3 mól aldehidet alkalmazva, vízzel elegyedő, protikus vagy aprotikus szerves oldószerben, vagy ezek keverékeiben, vagy ezek vizes keverékeiben, 5C° és 35 C° közötti hőmérséklettartományban, 30 perc - 5 óra időtartamig, és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
