172209. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az antraciklin-glikozidjellegű aklacinomicin a és b tumorellenes antibiotikum előállítására
15 172209 16 A kálium-bromidban felvett infravörös spektrumban (2. ábra) a jellemző abszorpciós sávok a következő, cm-1 egységekben megadott hullámszám-értékeknél jelennek meg: 3300, 3080, 2940, 2860, 2760, 1740, 1640, 1620, 1540, 1460, 1450, 1415, 1385, 1295, 1250, 1220, 5 1195, 1165, 1125, 1105, 1090, 1010, 960, 930, 890, 840, 815, 760, 730, 580 és 450. A proton-NMR-spektrumot egy Varian XL—100—15 spektrofotométeren, Fouriertranszformációval, 100 MHz térerősség mellett vettük fel, és a 3. ábrán mutatjuk be. 10 Az aklacinomicin A nevű antibiotikum metanolban, etanolban, kloroformban, etil-acetátban, acetonban, benzolban, dimetil-szulfoxidban (DMSO) és metil-celloszolvban oldódik, vízben kevéssé oldódik, viszont dietil-éterben, hexánban, ciklohexánban és petroléterben 15 nem oldódik. Hidrokloridja vízben, etanolban, metanolban, kloroformban, észterben oldódik. A vizes oldat sárga színű, és tömény kénsavban vörösesbarna színűvé válik. Ez az oldat alkoholos magnézium-acetát hozzáadására bíborban játszó vörös színt vesz fel, lúgosításra 20 pedig vöröses bíborszínű lesz. Gyengén bázikus kémhatású, lipofil sárga por vagy mikrokristályos por. Az elemi analízis a következő eredményeket adja: C42H52N015 összegképletre: 25 számított: C 61,87%, H 6,29%, O 29,80%, N 1,89%, mért: C 62,21%, H 6,46%, O 29,60%, N 1,73%. Molekulasúly: 811. Olvadáspontja: 135—145 C°, jobbraforgatása [aj^ (1 mólos kloroformos oldatban) +3°. Az ultraibolya 30 és a látható fény tartományában felvett abszorpciós spektruma (4. ábra) a következő hullámhossz-értékeknél mutat maximumokat: Az aklacinomicin A és B vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értékei szilikagél lemezen, különböző oldószerrendszerekben a következő : Rf-érték Aklacinomicin A B Kloroform-metanol 20: 1 5: 1 Aceton Aceton-hexán 1: 1 Benzol-metanol 1: 1 0,36 0,88 0,43 0,15 0,86 0,71 0,90 0,72 0,49 0,93 Híg sósavval, vagy 5%-nyi sósavat tartalmazó metanollal szobahőmérsékleten 1—2 órán át végzett parciális hidrolízis vagy metanolízis során az aklacinomicin A-ból és B-ből metilezett diszacharidok és 1-dezoxi-pirromicin keletkezik. Az aklacinomicin B-ből nyert metilezett diszacharid fizikai-kémiai jellemzői, úgymint infravörös, ultraibolya, látható és NMR-spektruma, olvadáspontja és jobbraforgatásának mértéke teljesen megegyezett a cinerubin B-ből részleges savas hidrolízis útján nyert metilezett diszacharid megfelelő értékeivel [Helvetica Chimica Acta, 55, 467—480 (1972)] és az 1-dezoxi-pirromicint a rodomicin [Chem. Bér. 38, 1762 (1955); Naturwiss. 48, 716 (1961)], a cinerubin [Chem. Bér. 92, 1868 (1959)] és a pirromicin [Chem. Bér. 92, 1904 (1959)] adatai segítségével ugyancsak azonosítottuk, mégpedig az NMR-spektruma, aglíkonjának tömegspektruma, valamint annak alapján, hogy a savas hidrolizátum rodózamint tartalmaz. metanolban : 229,5 nm, Ej% cm 452 35 0,3 normál kénsavval 85 C°-on 3 órán át végzett hid257,5 nm, E|% cm 261 rolízisük során az aklacinomicin A és B egy semleges 290 nm, Ej% cm 120 aglikonná és két vagy három redukáló cukorrá bomlik. 433 nm, Ej% cm 120 Az ágiikon narancssárga kristályos anyag, olvadáspont0,1 normál 229,5 nm, E\% cm 465 ja 171—174 C°, szenet, hidrogént és oxigént tartalmaz. sósav-metanolban 257,5 nm, E}% cm 261 40 Az elemi analízis, az infravörös, ultraibolya és NMR-290 nm, E}% cm 125 spektrum, a tömegspektrum és egyéb jellemzők arra 433 nm, E}% cm 134 vallanak, hogy az aklacinomicin A és B aglikonja 0,1 normál 238 nm, E}% cm 440 aklavinon [Tetrahedron Letters, 8, 28 (1960); Naturwiss. nátrium-hidroxi-286—289 nm, E}% cm 142 47, 135 (1960); Naturwiss. 42, 154 (1955); Naturwiss,-metanolban 315 nm, E,1% cm 97 45 50, 92 (1963)]. Ezenkívül, az aklacinomicin A és B, 525 nm, E|% cm 135 valamint a cinerubin A és B savas hidrolízise során ke-Az infravörös spektrumban a jellemző abszorpciós sávok a következő, cm~‘ egységekben kifejezett hullámszám értékeknél jelennek meg (KBr): 3300, 3070, 2940, 2850, 2750, 1740, 1640, 1620, 1540, 1465, 1445, 1410, 1380, 1290, 1245, 1215, 1160, 1120, 1095, 1050, 1010, 960, 920, 880, 840, 820, 750, 725, 700, 600, 580 és 450. Az aklacinomicin B NMR-spektrumát a 6. ábrán mutatjuk be. Az antibiotikum metanolban, etanolban, kloroformban, etil-acetátban, acetonban és savas vízben oldható, vízben kismértékben oldódik, hexánban, ciklohexánban és éterekben nem oldódik. Hidrokloridja metanolban, etanolban és kloroformban jól, acetonban és etilacetátban gyengén oldódik. Vizes oldata sárga színű, tömény kénsavban mély vöröses bíborszínűvé válik. Ez az oldat alkoholos magnézium-acetátban bíborba játszó vörös színt vesz fel, lúgosításkor vöröses bíborszínű lesz. letkezett cukrok összehasonlító vékonyrétegkromatográfiás vizsgálata szerint az aklacinomicin A a cinerubin A-ban is meglevő rodózamint, 2-dezoxi-fukózt és cine- 50 rulóz A-t, az aklacinomicin B pedig a cinerubin B-ben is meglevő rodózamint és 2-dezoxi-fukózt tartalmaz. A fenti eredmények alapján a szabadalmi leírásban szereplő aklacinomicin A és B szerkezetét az I általános képlettel írhatjuk le. 55 Az aklacinomicin A és B (fizikai-kémiai jellemzőik és a fentiekben megadott szerkezetük, valamint az irodalomban leírt ismert antibiotikumokkal való összehasonlítás alapján) az antraciklin-glikozidok csoportjába tartozik, és a cinerubin A-hoz és B-hez, a rutilantin- 60 hoz, az aklavinhoz, a rekvinomicinhez és a galirubinokhoz hasonlít. A cinerubin és a rutilantin abban különbözik az itt leírt antibiotikumoktól, hogy aglikonjuk más, mégpedig e-pirromicinon [Tetrahedron Letters, 16, 17 (1959)]. Az 65 aglikonként akta vint tartalmazó antibiotikumok, a 8
