172209. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az antraciklin-glikozidjellegű aklacinomicin a és b tumorellenes antibiotikum előállítására
3 172209 4 Cinerubin B 221 Danubomicin 242 Daunomicin 243 Pirromicin 542 Rodomicin A, B 561 Rubidomicin 574 Az Antibiotics című tankönyv Mechanism of Action című 1. kötetének [szerkesztette David Gottlieb és Paul D. Shaw, Springer Verlag, New York, Inc., N. Y. (1967)] 190—210. oldalán találjuk A. DiMarco Daunomicin és a rokonszerkezetű antibiotikumok című összefoglaló cikkét. Az International Center of Information of Antibiotics (Antibiotikumokról szóló Információk Nemzetközi Központjainak a WHO-val (Egészségügyi Világszervezet) közösen kiadott’ Information Bulletin No. 10. című kiadványa (1972. december, Belgium) összefoglaló cikket tartalmaz az antUtciklinekről és származékaikról. A Streptomyces galilaeus egyik leírását I.: Arch, für Mikrobiol., 31, 356 (1958) és International Journal for Systematic Bacteriology, 22, 298 (1972). A szabadalmi leírásban K. Eckardt és munkatársainak a galirubinokra vonatkozó leírásaira utalunk; I. Chemical Abstracts 64, 3896g és 67, 90573z. A Streptomyces galilaeus species különböző antibiotikumok termelésére képes. így a Chem. Bér. 100 (8) 2561—68 (1967) cikke olyan törzset ismertet, mely a-pirromicinont, ß-pirromicinont, y-pirromicinont, akíavinont, 7-dezoxiaklavinont és biszanhidro-aklavinont termel. A Naturwissenschaften 52 (19) 539—40 (1965) cikke szerint olyan Streptomyces törzset találtak, mely fő termékként galirubinon D-t és B-t termel. Az Antibiotiki 1968,13(11) 963—67. oldalán olyan Streptomyces galilaeus törzzsel végzett fermentációt ismertet, melynek fő termékei a 7-dezoxi-aklavinon és az aklavin. A fenti specieshez tartozó egy törzs aklavinon I-t és aklavinont termel, a Z. Chem. 1974, 14 (2), 57. oldalán megjelent cikk szerint. A találmány tárgya eljárás tumor-ellenes hatású aklacinomicin, aklacinomicin A és B, valamint nem-toxikus savaddíciós sóik és dezoxiribonukleinsav-komplexeik előállítására. A találmány szerint ezen anyagok előállítására úgy járunk el, hogy az aklacinomicint termelő Streptomyces galilaeus ATCC 31133 törzset szén- és nitrogénforrásokat tartalmazó táptalajban, süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük. A fermentlében jelenlevő ily módon termelt aklacinomicint a vízoldhatatlan antibiotikumok extrakciójára és tisztítására hagyományosan alkalmazott módszerekkel elkülönítjük és elválasztjuk az aklacinomicin A-t és/vagy B-t. Kívánt esetben az így izolált aklacinomicin A-t és/vagy B-t valamely nem-toxikus savval vagy dezoxiribonukleinsavval reagáltatva savaddíciós sójává, illetve komplexévé alakítjuk. így a találmány tárgya eljárás a II képletű aklacinomicin A nevű, tumorellenes hatású antibiotikum előállítására, amely a) hatásosan gátolja egereken az Ehrlich-karcinóma, a Sarcoma 180, a 6C3HED lymphoma és az L1210 és P388 leukémia ascites és szolid formáinak növekedését, patkányokon a hepatómát és Heia sejttenyészeten a vaccinia-vírust ; b) hatékonyan gátolja a különböző Gram-pozitív festődésü baktériumok és élesztőgombák növekedését; c) sárga színű, mikrokristályos por alakjában izolálható; d) szerves oldószerekben, mint például metanolban, kloroformban, etanolban, etil-acetátban, acetonban és benzolban oldható, vízben kismértékben oldható, viszont éterben, hexánban és petroléterben nem oldható; e) olvadáspontja 129—135 C°, optikailag aktív, fajlagos forgatóképessége [a]^ = +29° (c = 1,0, CHC!3); f) az ultraibolya és a látható fény tartományába eső abszorpciós maximumai: metanolban 229,5 nm, 258 nm, 290 nm és 434 nm; 0,1 normál sósav-metanolban: 229.5 nm, 258 nm, 290 nm, 434 nm; 0,1 normál nátrium-hidroxid-metanolban : 239,5 nm, 288 nm, 314 nm és 523 nm hullámhossznál; g) infravörös abszorpciós spektruma jellemző maximumai: 3300 cm"1, 3080 cm 1, 2940 cm-1, 2860 cm-1, 1740 cm"1, 1640 cm-1, 1620 cm-1, 1540 cm"1, 1460 cm"1, 1450 cm"1, 1415 cm"1, 1385 cm"1, 1295 cm"1, 1250 cm"1, 1220 cm"1, 1195 cm"1, 1165 cm"1, 1125 cm"1, 1105 cm"1, 1090 cm"1, 1010 cm"1, 960 cm"1, 930 cm"1, 890 cm"1, 840 cm"1, 815 cm"1, 760 cm"1, 730 cm"1, 580 cm"1 és 450 cm"1 hullámszámnál; h) savas hidrolízise során rodózamin, 2-dezoxi-fukóz, cinerulóz A, 1-dezoxi-pirromicin és aklavinon keletkezik; i) egy C42Hj4N015 összegképletű, gyengén bázikus antraciklin-glikozid ; valamint a III képletű aklacinomicin B nevű, tumorellenes hatású antibiotikum előállítására, amely a) hatékonyan gátolja egereken az L1210 és P388 leukémia és HeLa sejttenyészeten a vaccinia-vírus növekedését ; b) hatékonyan gátolja különböző Gram-pozitív festődésű baktériumok és élesztőgombák növekedését; c) sárga színű, mikrokristályos por alakjában izolálható; d) metanolban, etil-acetátban, kloroformban, etanolban, acetonban és benzolban oldható, vízben kismértékben oldható, viszont éterben, ciklohexánban, hexánban és petroléterben nem oldható; e) olvadáspontja 135—145 C°, optikailag aktív, fajlagos forgatóképessége [a]“ = + 3° (c = 1,0, CHC13); f) az ultraibolya és a látható fény tartományába eső abszorpciós maximumai: metanolban 229,5 nm, 257,5 nm, 290 nm és 433 nm, 0,1 normál sósav-metanolban: 229.5 nm, 257,5 nm, 290 nm és 433 nm, 0,1 normál nátrium-hidroxid-metanolban; 238 nm, 286—289 nm, 315 nm és 525 nm hullámhossznál; g) infravörös abszorpciós spektruma jellemző maximumai: 3300 cm"1, 3070 cm“1, 2940 cm"1, 2850 cm"1, 2750 cm"1, 1740 cm"1, 1640 cm"1, 1620 cm"1, 1540 cm"1, 1465 cm”1, 1445 cm"1, 1410 cm"1, 1380 cm"1, 1290 cm"1, 1245 cm"1, 1215 cm"1, 1160 cm"1, 1120 cm"1, 1095 cm"1, 1050 cm"1, 1010 cm"1, 960 cm"1, 920 cm-1, 880 cm"1, 840 cm"1, 820 cm"1, 805 cm"1, 750 cm"1, 725 cm, 700 cm"1, 600 cm"1, 580 cm"1 és 450 cm"1 hullámszámnál; h) savas hidrolízise vagy metanolban végzett részleges hidrolízise során aklavinon, rodózamin, 2-dezoxi-fukóz, 1-dezoxi-pirromicin és ugyanaz a metilezett diszacharid keletkezik, mint a cinerubin B-ből; i) egy C42H52N015 összegképletű, gyengén bázikus antraciklin-glikozid. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
