172153. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hepatitisz virus eltávolítására
11 172153 12 Az esetleg visszamaradó tiol-csoportokat olyan módon blokkoltuk, hogy a gélt 45 percig 60 mg jódacetamiddal kezeltük. Végül a gélt pufferrel mostuk. Au-antigén vizsgálat Kiindulási anyagként olyan Au-antigénre pozitív plazmát használtunk, amelynek a titere immundiffúzió alapján 1: 32 volt. Az adszorpciót a 3. példában leírt módon szakaszosan hajtottuk végre. A centrifugálás utáni folyadék tisztáját Au-antigénre negatívnak találtuk az immundiffúzió, az immunelektro-ozmoforézis és a Hepanosticon tesztek alapján. 12. példa Au-antigén eltávolítása plazmából SepharoseR-(hexametiléndiamin-naf t il-1 -ecetsavj-konjugátummal történő adszorpcióval A gélszármazék előállítása A SepharoseR-hexametiléndiamin konjugátumot az 1. példában ismertetett módon állítottuk elő. A kapott, elválasztót tartalmazó gélből 25 ml menynyiséget vittünk üvegszűrőre, dioxán és víz 3 : 2 arányú elegyével mostuk és szívatással megszárítottuk. A száraz gélt ezután 1,1 g naftil-l-ecetsav 30 ml dioxán—víz eleggyel (3: 2) frissen készített oldatához adtuk. A gélszuszpenzióhoz keverés közben hozzáadtunk 2,65 g vízben oldódó karbodiimidet '— N-ciklohexil-N'-[beta-(N-metil-morfolino-etil)]-karbodiimid-p-toluol-szulfonát — majd a pH értékét híg sósav-oldattal 4,8-re állítottuk be. Az elegyet 1 órán át reagáltattuk szobahőmérsékleten, majd ismét 2,65 g vízben oldódó karbodiimidet adtunk hozzá. Az elegyet még egy órán át kevertük, majd üvegszűrőn alaposan kimostuk dioxánnal, dioxán-víz eleggyel (3 : 2), 1 M nátriumklorid-oldattal, vízzel és pufferrel. Az összekapcsolási reakció termelése 3,0% volt a naftil-l-ecetsavra számítva protonmágneses rezonancia (HA 100) meghatározás alapján. Au-antigén vizsgálat Kiindulási anyagként olyan Au-antigénre pozitív plazmát használtunk, amelynek a titere az immundiffúzió alapján 1: 32, az immunelektro-ozmoforézis alapján pedig 1: 64 volt. Az adszorpciót szakaszosan végeztük a 3. példában ismertetett módon. A centrifugálás utáni folyadék tisztája negatív volt Au-antigénre az immundiffúzió, az immunelektro-ozmoforézis és a Hepanosticon tesztek alapján. 13. példa Au-antigén eltávolítása plazmából SepharoseR-(hexametiléndiamin-koleszterin-hidrogénszukcinát)-konjugátummal történő adszorpcióval A gélszármazék előállítása A SepharoseR-hexametiléndiamin-konjugátumot az 1. példában ismertetett módon állítottuk elő. A kapott, elválasztót tartalmazó gélből 20 ml menynyiséget vittünk üvegszűrőre, dioxánnal, 10% trietilamint tartalmazó dioxánnal és ismét dioxánnal mostuk, leszívatással megszárítottuk, és hozzáadtuk 0,5 g koleszterin-hidrogénszukcinát 25 ml dioxánnal frissen készített oldatához. A reakciót 1 ml dioxánban oldott 0,35 g diciklohexil-karbodiimid hozzáadásával indítottuk be. Az elegyet szobahőmérsékleten kevertettük, majd 2 óra elteltével további karbodiimidet adtunk hozzá, és további 2 órával később a gélt alaposan kimostuk dioxánnal, dioxán—víz eleggyel, vízzel, végül pedig pufferrel. Au-antigén teszt Kiindulási anyagként olyan Au-antigénre pozitív plazmát használtunk, amelynek a titere az immundiffúzió alapján 1: 64, az immunelektro-ozmoféris alapján pedig 1: 128 volt. Az adszorpciót szakaszosan hajtottuk végre a 3. példában ismertetett módon. A centrifugálás utáni folyadék tisztája negatív volt Au-antigénre az immundiffúzió, az immunelektro-ozmoforézis és a Hepanosticon tesztek alapján. 14. példa Au-antigén eltávolítása plazmából SepharoseR-(hexametiléndiamin-kólsav)-konjugátummal történő adszorpcióval A gélszármazék előállítása A SepharoseR-hexametiléndiamin-konjugátumot az 1. példában ismertetett módon állítottuk elő. A kólsavnak az elválasztót tartalmazó géllel történő összekapcsolását a 13. példa eljárásával végeztük, azzal az eltéréssel, hogy a koleszterin-hidrogénszukcinát helyett 100 ml dioxánban oldott 0,5 g kólsavat használtunk. Az összekapcsolási reakció hozama 5,8% volt a protonmágneses rezonancia (HA 100) alapján. Au-antigén vizsgálat Kiindulási anyagként olyan Au-antigénre potizív plazmát használtunk, amelynek a titere 1: 32 volt az immundiffúzió alapján. Az adszorpciót szakaszosan hajtottuk végre a 3. példában ismertetett módon. A centrifugálás utáni folyadék tisztája Au-antigénre negatívnak bizonyult az immundiffúzió, az immunelektro-ozmoforézis és a Hepanosticon tesztek alapján. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás hepatitisz vírus eltávolítására/koncentrálására biológiai anyagot tartalmazó elegyekből, azzal jellemezve, hogy a hepatitisz vírussal szennyezett anyagot olyan készítménnyel hozzuk érintkezésbe, amely vizet átengedő mátrix anyagot és — adott esetben elválasztón keresztül — legalább 7 szénatomos hidrofób csoportot tartalmaz. (Elsőbbsége: 1975. július 9.) 2. Eljárás hepatitisz vírus eltávolítására/koncentrálására biológiai anyagot tartalmazó elegyekből, azzal jellemezve, hogy a hepatitisz vírussal szennyezett anyagot 5 10 15 20' f2* 30] ?35 40 45 50 55 60 65 6
