171790. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teikomicint tartalmazó antibiotikum-elegy és egyes faktorainak előállítására
171790 13 14 8. vízzel telített etilacetát 0,00; 9. n-propanol: n-butanol : 10 NH4 OH (2:3:4)elegy 0,43; b) Rf -értéke szilikagél vékonyrétegen, eluáló rendszerként n-propanol : etilacetát : koncentrált NH4 OH (2:2:2) elegyet alkalmazva: Rf 0,1; míg a teikomicin A, fizikai állandói a következők: olvadáspontja 220 °C (bomlással); elemanalízise (három meghatározás átlagából): C = 52,9%; H = 7,6%; N = 5,26%; O = 32,5%; hamu = 3,26%; 220 és 360 nm között nincs ultraibolya abszorpciója; 4. infravörös abszorpciós spektrumában (nujolban) a legfontosabb abszorpciós sávok a következő frekvenciáknál (cm- x ) vannak: 3350 (széles), 2930—2850 (nujol), 2750—2000, 1720 (váll), 1670 (széles), 1620 (váll), 1560 (széles), 1460 és 1370 (nujol), 1340 (váll), 1260, 1240, 1155 (váll), 1120 (váll), 1040 (széles), 970 (széles), 950 (váll), 900 (széles), 865, 805,720; oldható: vízben, vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban, híg vizes alkálifémhidroxidoldatokban, dimetilformamidban, dimetilszulfoxidban, részlegesen oldható metanolban és etanolban; oldhatatlan híg ásványi savakban és nem-poláros szerves oldószerekben; a következő jellemző reakciókat mutatja: Fehling pozitív Tollens pozitív KMn04 pozitív Griess negatív Antron pozitív Schiff negatív Molish pozitív; molekulasúlya kromatográfiásan, Sephadex G 75-ön meghatározva 20 000 (pH =7,38 foszfát pufferben) illetve 30 000 (pH = 4,4 citrát pufferben); kromatográfiásan a következő Rf -értékeket mutatja: a) 1. számú Whatman papíron: eluáló rendszer 1. 1/15 m pH =6,0 foszfát pufferrel telített butanol 2. 2% p-toluolszulfonsavat tartalmazó vízzel telített butanol 3. 2% ammóniumhidroxidot tartalmazó vízzel telített butanol 4. butanollal telített 1/15 m pH =6,0 foszfát puffer Rf 0,0; 0,05; 0,0; 0,20; 10 15 20 25 30 35 40 45 50 5. 20%-os vizes NH4 C1 oldat 6. butanol : metanol : víz (40 0,75% metilnarancs elegye 7. butanol: metanol : víz (40 : 8. vízzel telített etilacetát 10 10 0,0; : 20) és 0,42; 20) elegy 0,46; 0,0; n-propanol: n-butanol: (2: 3: 4) elegy 10 n NH4 OH b) Rf -értéke szilikagél vékonyrétegen, eluáló rendszerként n-propanol: etilacetát: koncentrált NH4 OH (2:1:2) elegyet alkalmazva: 0,55; Rf 0,48; azzal jellemezve, hogy az Actinoplanes teichomyceticus nov. sp. ATCC 31 121 törzset aerob körülmények között asszimilálható szén- és nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó vizes táptalajban tenyésztjük, a kapott antibiotikum elegyet izoláljuk és kívánt esetben az egyes faktorokra választjuk szét, és kívánt esetben az egyes faktorokat tisztítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tenyésztést 25 és 35 °C közötti hőmérsékleten végezzük. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tenyésztést 72 és 120 óra közötti ideig végezzük. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a tenyésztés során keletkezett antibiotikum-elegyet halogénezett 1—4 szénatomos szénhidrogénekkel vagy 4—6 szénatomos alkanolokkal végzett extrakcióval nyerjük ki. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az extrahálást butanollal végezzük. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja a teikomicin A^ A2 és A 3 faktorok elegyének előállítására azzal jellemezve, hogy a butanolos extraktumot eredeti térfogatának 1 I 10 —V20 részére koncentráljuk, majd lehűtjük. 7. Az 1. és 6. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, teikomicin A,, A2 A 3 faktorok előállítására, azzal jellemezve, hogy a teikomicin Aj, A2 és A 3 elegyét oszlopkromatográfiával választjuk szét. 8. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a teikomicin A2 -t vizes oldatban, pH = 4 értéknél polisztirol-szulfonát gyantán végzett kezeléssel tisztítjuk. 9. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a teikomicin Ar et oldószerben szilíciumdioxid-ocelite oszlopra felvíve és eluensként n-butanol-ecetsav-víz elegyet használva kromatográfiásan tisztítjuk. 3 lap rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 78.6127.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató