171790. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teikomicint tartalmazó antibiotikum-elegy és egyes faktorainak előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1976. III. 4. (LE—791) Elsőbbsége: Nagy-britannia 1975. III. 5. (09 057/75) Közzététel napja: 1977. X. 28. Megjelent: 1978. XI. 30. 171790 Nemzetközi osztályozás-. C 12 D 9/14 Feltalálók: Coronelli Carolina vegyész, Beretta Grazia biológus, Bardone Maria Rosa vegyész, Parenti Francesco biológus, Milánó, Olaszország Tulajdonos: Gruppo Lepetit S. p. A., Milánó, Olaszország Eljárás teikomicint tartalmazó antibiotikum-elegy és egyes faktorainak előállítására i A találmány tárgya eljárás a teikomicint tartalmazó antibiotikum keverék és egyes faktorainak előállítására. Az antibiotikum keverék új antibiotikus anyagokat tartalmaz, amelyek mint egyedi komponensek szétválaszthatok és izolálhatok. 5 Ezeket az anyagokat a továbbiakban a következőképpen nevezzük: 8327 A faktor, 8327 B faktor és 8327 C faktor antibiotikum. A 8327 A faktor antibiotikumot, amely három hasonló anyag keveréke, nevezzük teikomicinnek is, a három 10 frakciót pedig teikomicin Aj-nek, teikomicin A2 -nek és teikomicin A3 -nak. Az antibiotikum keveréket és az egyedi faktorokat az Actinoplanes nemzetségbe tartozó Actinoplanes teichomyceticus nov. sp. törzs fermentálásával állítjuk elő, 15 melyet saját törzsgyűjteményünkben az A/8327 számmal azonosítottunk. A törzset az A. T. C. C-nél deponáltuk 31 121 számon. Az új antibiotikum keverék előállításakor az Actinoplanes teichomyceticus nov. sp. ATCC 31 121 törzset 20 aerob körülmények között vizes táptalajon tenyésztjük, amely asszimilálható szén- és nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmaz. Általában az antibiotikum-termelő törzset egy rázólombikban előtenyésztjük, míg nagyobb mértékű micéliumnövekedés következik be, majd ezt a 25 kultúrát használjuk a fermentációs táptalajt tartalmazó fermentoredények beoltására. A tenyésztést 25—35 °C hőmérsékleten aerob körülmények közt folytatjuk, amíg megfelelő mennyiségű antibiotikum termelődik. Ez idő alatt a keletkezett 30 antibiotikus anyag koncentrációját agar diffúziós-módszerrel mérjük. Ezután a tenyészlét leszűrve a micéliumtömeget elválasztjuk. Az antibiotikum keveréket a szűrt fermentációs tenyészléből közönséges módszerrel nyerjük ki, például olyan szerves oldószerrel való extrahálással, amelyben az antibiotikus keverék oldható, és amely nem elegyedik a vizes közeggel. Az extrahálás előtt a fermentlé pH-ját körülbelül 3,5 értékre állítjuk be. Megfelelő szerves oldószerek a halogénezett 1—4 szénatomos szénhidrogének és 4—6 szénatomos alkanolok. Az oldószert ezután nagysebességű centrifugálással elválasztjuk a szűrt fermentációs tenyészlétől, eredeti térfogatának kb. 1/10—1/20 részére koncentráljuk, hűtjük és állni hagyjuk, amíg csapadék válik ki belőle, amelyet szűréssel nyerünk ki. Ez a csapadék tartalmazza a 8327 A faktor antibiotikumot (teikomicin), vagyis a teikomicin Al5 A 2 és A 3 keverékét. A 8327 B és C faktorok lényegében a szerves oldószerben maradnak, és nagymennyiségű inert nempoláros oldószer, így petroléter hozzáadásával kicsaphatok. A teikomicin Aj, A2 és A 3 faktorokat oszlopkromatográfiával választjuk el egymástól, míg a B és C faktorokat ellenáramú megoszlatással különítjük el egymástól. A micéliumtömeg vizes acetonnal végzett extrahálásával további terméket nyerhetünk ki. Az aceton ledesztillálása után a vizes fázist ugyanolyan kezelésnek vetjük alá, mint a szűrt fermentációs tenyészlevet. 171790 1
