171789. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3,6,8-szubsztituált -s-triazolo [4,3-b] piridazinok előállítására
5 171789 6 Sok esetben nagyon jól oldódnak vízben. A vegyületeket könnyen oldhatjuk vizes savoldatokban is, amely a 6-helyzetben levő bázisos szubsztituens jelenlétének köszönhető, és könnyen átalakíthatjuk őket különböző gyógyászatilag elfogadható sóikká szokásos módszerekkel. Az (I) általános képletnek megfelelő 3,6,8-szubsztituált-s-triazolo[4,3-b]piridazin vegyületek hörgőtágító aktivitását a Konzett-Rössler módszer szerint előkészített tengeri malacokon vizsgáltuk. Lásd Konzett and Rössler; Arch. f. exp. Path. u. Pharmacol., 195, 71—74 (1940); Rosenthale and Dervinis, Arch. Int. Pharmacodyn, 172, 91—94 (1968). A vizsgálati vegyületeket érzéstelenített tengeri malacoknak történő adagolásával értékeltük ki, amelyet egy károsító vegyület (hisztamin, szerotonin vagy acetil-kolin) adagolását két perccel megelőzően adunk, majd három, relatíve azonos ( ± 10%) hörgőösszeszorulást okozó károsító dózisban adagoljuk a károsító vegyületet. A jellegzetes 3,6,8-szubsztituált-s-triazolo[4,3-b]piridazinokat vizsgálati vegyületként 10 mg/kg adagokban intravénásán alkalmaztuk; ha a szabad bázis gyengén oldódott, ekvivalens sósavat adtunk hozzá. A bronchodilatációs aktivitást, amely a vizsgált vegyület károsító hatást megakadályozó képességét jelzi, és a gátlás százalékában fejezzük ki, úgy számítottuk ki, hogy a vizsgálati gyógyszer adagolása utáni károsító hatást elosztottuk a vizsgálati vegyületet megelőző három károsító anyag hatásának átlagával, ezt 100-zal megszoroztuk és a kapott értéket kivontuk a 100%-ból. Az aminofillint (azaz két molekula teofillin és egy molekula etilén-diamin addíciós vegyülete), amely ismert hörgőtágító hatású, szintén alkalmaztuk összehasonlító standardként. Ily módon az eredményeket egy másik módon, az aminofillin aktivitásának százalékában is kifejezhetjük. A kísérletek során a szokásos módszer az, hogy először meghatározzuk a károsító hatás százalékos gátlását 10 mg/kg aminofillin; majd 10 mg/kg vizsgálati vegyület; végül ismét egy másik aminofillin dózis (10 mg/kg) adagolásakor. így a vizsgálati vegyülettel kapott eredményeket a standard megelőzte, majd követte. Az „aminofillin %-ot" a vegyület által okozott gátlás százalékában fejeztük ki, mint az előzőleg és utólag adagolt aminofillin által okozott gátlás százalékos átlagának százaléka. A kapott eredményeket a következő táblázatban mutatjuk be: 1. táblázat 10 15 20 25 30 35 Az LD50 értékeket hím Harlan ICR egereken kaptuk és H. J. Horn módszerével számítottuk, Biometrics, 12, 311 (1956). A megfelelő LD50 értékek aminofillinre 261 mg/kg i. p. és 464 mg/kg p. o. adagolás esetén. A következő 2. táblázat a bronchodilatációs aktivitási eredményeket mutatja macskákon. A kísérleteket a tengeri malacoknál leírt eljárással lényegében analóg módon végeztük, károsító szerként szerotonint használva. 2. táblázat A példa vegyülete Adag mg/kg Gátlás Aminofillin 1. 9. (13.) 10. 60 80 66 115 199 124b b Ennek a vegyületnek LD 50 értékei 562 mg/kg i. p. adagolásnál. A vegyületeket orálisan és parenterálisan adagolhatjuk. Ezeket vegyíthetjük gyógyszerészeti dózisok formáivá, például tablettákká, kapszulákká, kúpokká vagy oldatokká a szokásos adalékok hozzáadásával, mint például keményítőkkel, gumikkal, cukrokkal, zsírsavakkal, vagy oldva, illetve diszpergálva őket parenterálisan elfogadott folyadékokká alakíthatjuk, például pirogénmentes desztillált vízzel, propilénglikollal vagy ezek elegyével. Általában megfelelő eredményeket kapunk, ha a vegyületeket állatoknak napi 0,5—50 mg/kg testsúly mennyiségben, előnyösen osztott dózisokban adagoljuk. A következő példákban bemutatják a találmányt: 1. példa 40 8-metil-6-piperidino-s-triazolo[4,3-b]piridazin 100 ml vizes 99%-os hangyasavban levő 20 g 3--hidrazino-4-metil-6-piperidino-piridazin elegyét a forrási hőmérsékleten melegítjük 3 órán keresztül vissza-45 folyató hűtőt használva, majd szárazra pároljuk. A maradékot, amely 8-metil-6-piperidino-s-triazolo[4,3-b]piridazin-formiátot tartalmaz, fölös mennyiségű vizes nátrium-karbonát oldattal felvesszük és kloroformmal extraháljuk. A kloroform lepárlása után a cím szerinti 50 vegyületet etil-acetátból kristályosítjuk. Kitermelés 4,4 g. Olvadáspont 118—120 °C. A példa Károsító Gátlás % aminofillin % LD„ mg/kg vegyu- 1 szer léte Gátlás % aminofillin % i. p. p.o. 1. hisztamin 87 234 316 464 2. hisztamin 83 133 316 562 5. hisztamin 97 106 — 562 6. acetilkolin 79a 162 — 562 7. acetilkolin 66 124 383 562 8. acetilkolin 76 143 562 562 9.(13.) acetilkolin 65a 131 562 562 1 a dózist 3 mg/kg-ra csökkentettük 2. példa 8-metil-6-morfolino-s-triazolo[4,3-b]piridazin 200 ml vizes 99%-os hangyasavban levő 20 g 3-hidrazino-4-metil-6-morfolino-piridazin elegyét visszafolyató hűtő alkalmazásával forraljuk, majd szárazra pároljuk. Az olajos maradékot, amely 8-metil-6-morfolino-s-triazolo[4,3-b]piridazin-formátot tartalmaz nátrium-karbonát vizes oldatával kezeljük, és kloroformmal extraháljuk. A szerves oldatot vízmentes nátrium-szulfáttal 65 szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A kapott szerves 55 60 3
