171615. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új oktapeptidszármazékok előállítására
11 171615 12 illetve szűrünk. Végül a csapadékot éterrel mossuk, így 10 mg anyaghoz jutunk. Rf 1 : 0,5. Fajlagos aktivitás: 4,4 mCi/mg Moláris aktivitás: 5,2 Ci/mmól A termék radiokromatogramja egyetlen csúcsot tartalmaz a standard CIBA Hypertensinnel egyenlő helyen. A termék biológiai aktivitása a standard preparátuméval megegyezik. 4. példa a) L-4-Klór-fenilalanin-metilészter-hidroklorid (9. vegyület) 45 ml vízmentes metanolt —25 C°-ra hűtünk, majd 8 ml tionil-kloridot csepegtetünk hozzá állandó keverés közben úgy, hogy a hőmérséklet ne menjen -25 C° fölé. Fél órán át tartó keverés után 5,3 g L-4-klór-fenilalanint adunk hozzá és a metanol térfogatát kétszeresére egészítjük ki. További fél órán át tartó keverés után másnapig szobahőmérsékleten állni hagyjuk a reakcióelegyet, majd bepároljuk és a' bepárlást még kétszer metanollal megismételjük. A kapott anyagot minimális mennyiségű metanolban feloldjuk, majd éterrel a cím szerinti vegyületet kicsapjuk. Kitermelés: 6,6 g (97%), op.: 203-206 C°. Rf 2 :0,8. MD = + 17° ± 2 (c = 1, metanol) Analízis (molekulasúly: 250,2): számított: C =48,07%, H = 5,23%, N = 5,68%, Cl =28,13%, talált: C =48,09%, H = 5,28%, N = 5,72%, Cl = 28,28%. b) Boc-Pro-Phe(Cl)-OMe (10. vegyület) 6,5 g (26 mmól) 9. vegyület 66 ml tetrahidrofurános szuszpenziójához —15C°-on 6 ml tributil-amint adagolunk. Az oldathoz ezután 6,2 g terc-butiloxikarbonil-prolin 30 ml tetrahidrofurános oldatát, majd 6g diciklohexilkarbodiimidet adunk 7 ml tetrahidrofuránban oldva. Az elegyet két órán át keverjük, majd éjszakára 0C°-on tartjuk. A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, a szűrletet 30 C° alatt bepároljuk, a maradékot közel 100 ml etil-acetáttal felvesszük és szűrjük. Az etil-acetátos fázist ezután jéghideg 5%-os citromsav-oldattal, telített nátrium-klorid-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Bepárlás után kromatográfiásan egységes olajat kapunk, amit exszikkátorban súlyállandőságig szárítunk. Kitermelés: 11 g olaj. [á&2 = -31° ± 3 (c = 1, metanol). Rf s : 0,9. c) H-Pro-Phe(Cl)-OMe-HCl (11. vegyület) 10,0 g 10. vegyületet 60 ml 1 n sósavas metanol-5 ban egy óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az oldószert 30 C° alatt vákuumban bepároljuk, majd az olajos maradékot még kétszer metanollal szárazra pároljuk. A maradékot éterrel többször eldörzsöljük, dekantáljuk, majd bepároljuk Az 10 anyagot vákuumban szárítjuk nátrium-hidroxid pasztilla és tömény kénsav feleit. Kitermelés: 6,8 g (84%) hab, amely kromatográfiásan egységes, a további szintézishez felhasználható. Rf ~:C,45. 15 d) Z-Val-His-Pro-Phe(Cl)-OMe (12. vegyület) 3.6 g (9 mmól) Z-Val-His-NHNH2 -t 27 ml 2 n 20 sósav-oldatban feloldunk, —5 C°-ra hűtjük, majd —5 C° és —10 C° között keverés közben 625 mg (9 mmól) nátrium-nitrit tömény vizes oldatát hozzácsepegtetjük. Az elegyet 10 percig —10C°-on keverjük, majd hideg telített nátrium-hidrogén-kar-25 bonát-oldattal enyhén lúgosítjuk. 3x20 ml —10C°-os etil-acetáttal az azidot extraháljuk, a szerves fázist 2x10 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd 0 C°-on magnézium-szulfát fölött szárítjuk. Eközben elkészítjük a 11. vegyület olda-30 tát. 3,0 g (9 mmól) 11. vegyületet 15 ml olyan tetrahidrofuránban oldunk, amihez —20 C°-on 3,3 ml tributil-amint adtunk. Ehhez az oldathoz adjuk az azid etil-aetátos oldatát hidegen. 2 órán át —10C°-on keverjük éjjelre 0C°-on állni hagyjuk a 35 reakcióelegyet, majd másnap bepároljuk a maradékot etil-acetáttal (20 ml) felvesszük és a szerves fázist 5%-os citromsav-oldattal, telített nátrium-klorid-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és telített nátrium-klorid-oldattal mossuk. 40 Szárítás után bepároljuk, éterrel eldörzsöljük, szűrjük, és végül vákuumban szárítjuk a mosott terméket. Kitermelés: 3,3 g (54%). Rf 3 :0,8. [<*]"= -50° ± 2 (c = 1, metanol). 45 e) H-Val-His-Prp-Phe(Cl)-OMe • 2HBr 2.7 g (4 mmól) 12. vegyületet 15 ml jégecetben oldunk és 10 ml jégecetes brómhidrogénsavat 50 adunk hozzá. A reakcióelegyet egy óra időtartamig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd a metiléazter hidrogénbromidját szárított éterrel kicsapjuk és az éteres mosást és dekantálást még ötször megismételjük. Az anyagot állandó éteres mosás 55 mellett szűrjük és végül vákuumban szárítjuk. Kitermelés: 2,8 g (100%). Rf 2 :0,4-0,5. f) Z-Asn-Arg(N02 )-Val-Tyr-Val-His -Pro-Phe(Cl)-OMe 60 (13. vegyület) 1,4 g (2 mmól) Z-Asn-Arg(N02 )-Val-Tyr-OH-t (op: 183-185 C°, [a] = -16° (c = 0,5 metanol), [a]= _4° (c = 1, • ecetsav) 10 ml dimetil-formamid-65 ban oldunk és —20C°-ra hűtünk. Az oldathoz 6
