171609. lajstromszámú szabadalom • Készülék influenza neuramidináz meghatározására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1975. XJI. 30. (LA-880) Közzététel napja: 1977. IX. 28. Megjelent: 1978. IX. 30. 171609 Nemzetközi osztályozás: G01N 31/16, 33/16 .fi Feltalálók: dr. Takátsy Gyula orvos 50%, dr. Barb Katalin orvos 20%, Murányi István oki. gépészmérnök 20%, Burda Ferencné oki. villamosmérnök 10%, Budapest Tulajdonos: Labor Műszeripari Művek, Esztergom Készülék influenza neuraminidase meghatározására 1 Az influenza elleni küzdelem egyik legfontosabb laboratóriumi feladata, hogy a vírus felületi fehérjéinek állandó változásait minél pontosabban és gyorsabban nyomon kövessük, mert csak ennek ismeretében lehet hatékony oltóanyagot készíteni, 5 valamint a lakosság influenza védettségéről tájékoztatást nyerni. Az influenza-vírus két felületi fehérjéje, illetve antigénjei közül az egyik az ún. haemaggliitinin laboratóriumi vizsgálatára mikro-módszer áll rendel- 10 kezesre. A másik fontos felületi antigén az ún. neuraminidáz enzim vizsgálatát mindeddig csak igen nehézkes és bonyolult epruvetta-módszer segítségével lehetett elvégezni. 15 A módszer lényege, hogy a vírus felületi antigénje, mint enzim alkalmas mucoprotein substratból N-acethyl neuraminsavat (NANA) képes felszabadítani, amelyet megfelelő reagensek hozzáadásával kolorimetriásan meg lehet határozni. Az enzim aktivitásából 20 egyrészt a vírus felületi antigénjének sajátságaira, másrészt az enzimek specifikus ellenanyaggal történő gátlása révén a vírusok közötti rokonsági viszonyokra, illetve az ellenanyagok specifidtására lehet következtetni. 25 A jelenlegi epruvettás módszer nehézkessége és bonyolultsága abból származik, hogy a színreakció csupán meghatározott hőmérsékleten (90-95 C°-on) alakul ki, illetve csak ezen a hőfokon stabil. Mivel ilyen körülmények között kolorimetriás mérésre 30 alkalmatlan, a keverékből a színanyagot butanollal kell kirázni és centrifugálni, de ebben az esetben is a mérését gyorsan kell elvégezni, mert a színreakció közben megváltozhat. Az epruvetták egyenkénti kezelése és a színerősségnek spektrofotométerrel való lemérése olyan körülményessé teszi a reakciót, hogy tömegvizsgálatokat végezni e módszerrel szinte lehetetlen. Ilyen vizsgálatokra azonban nemcsak a vírusok összehasonlítása kapcsán, hanem főleg a lakosság védettségének megállapításakor nagy szükség lenne. A találmány célja a felsorolt hiányosságok kiküszöbölése és olyan készülék létesítése, amellyel nagy mennyiségű vizsgálat minden nehézség nélkül folyamatosan végezhető rövid idő alatt 'és kis anyagigény mellett. A találmány azon a felismerésen alapszik, hogy a fenti célnak eleget tehetünk, ha mikromódszer elvet alkalmazva a reakciót epruvetták helyett speciálisan erre a célra kialakított titrálólap furataiban végezzük, a reakcióelegy felfűtése pedig speciális fűtőbetéttel történik. A találmány tárgya tehát készülék influenza neuraminidáze meghatározására. A találmány lényege, hogy' a reakcióelegyet befogadó lépcsős vagy sima furatokkal ellátott titrálólapja a titrálólap furataiba meríthető hevítőelemekkel ellátott fűtőfeltéte és a fűtőfeltétet a titlálólaphoz'képest vezető pozicionáló elemei vannak. A hevítőelemeknek célszerűen hő-171609