171339. lajstromszámú szabadalom • Eljárás B12-vitamin tartalmú fermentlevek feltárására és sejtmentesítésére
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1974. IV. 08. Módosítási elsőbbsége: 1976. II. 13. (1780) Közzététel napja: 1977. VII. 28. Megjelent: 1978. VI. 30. (Rí—535) 171339 Nemzetközi osztályozás: C 07 H 23/00 C 12 D 5/06 Feltalálók: Dr. Szotyory László oki. vegyész, Dr. Újhidy Aurél oki. vegyészmérnök, Veszprém, Dr. Polinszky Károly oki. vegyészmérnök, Budapest, Dr. Kiss Zoltánné oki. vegyészmérnök, Kovács Sándor oki. vegyészmérnök, Veszprém, Dr. Gebhardt István oki. vegyészmérnök, Stefkó Béla oki. vegyész, Székely Dénes oki. vegyészmérnök, Keresztes Ferenc oki. vegyészmérnök, Szemler László oki. vegyészmérnök, Budapest Tulajdonos: 18% Richter Gedeon Vegyészeti Gyár 17% Rt., Budapest 7% 4% 4% 9% 9% 15% 9% Eljárás B12 -vitamin tartalmú fermentlevek feltárására és sejtmentesítésére 1 2 A találmány tárgya eljárás B12 -vitamint és a fermentáció során képződött egyéb korrinvázas vegyületeket tartalmazó, adott esetben dúsított fermentlevek feltárására és sejtmentesítésére. Dúsított fermentleveken a fermentléből természetes állapotában előnyösen szepa- 5 rálássál vagy centrifugálással 5—20-szorosára töményített, 5—15 súly% szárazanyagtartalmú fermentlevet értünk. A B12 -vitamin az emberi és állati anyagcserében nélkülözhetetlen, hiánya halálos kimenetelű lehet, mert 10 anaemia perniciosát okoz. Az emberi és állati szervezet a többi vitaminhoz hasonlóan, a B12-vitamint sem tudja előállítani, ezért a táplálékkal vesszük magunkhoz. A B12 -vitamin a magasabbrendű növényekben sem fordul elő, kizárólag egyes mikroorganizmusok képesek 15 szintetizálni és ezek útján kerül a szervezetünkbe. Az anaemia perniciosa nemcsak abban az esetben lép fel, ha táplálékunk nem tartalmaz elegendő B12-vitamint, hanem akkor is, ha a bélfal glikoproteinek hiányában nem képes azt abszorbeálni, azaz a véráramba 20 juttatni. A B12 -vitamin alkalmazása a humán- és állatgyógyászatban, továbbá az állattakarmányozásban egyaránt fokozódik. A kereslet növekedésével magyarázható, hogy újabb és újabb eljárások válnak ismertté, amelyek egyrészt a fermentációval előállítható B12 - 25 vitamin mennyiségének növelésére, másrészt a fermentléből mind jobb hozammal történő kinyerésére irányulnak. A Bí2 -vitamint 1948-ban fedezték fel a májban [Science 107, 396—398 (1948)], a Streptomyces griseus 30 mikroorganizmus törzsből történő kinyerését és izolálását a 2 563 744 lajstromszámú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás ismerteti (1949. VIII. 4)> Szerkezetét hosszú idő után 1966-ban sikerült megállapítani. Totálszintézisét R. B. Woodward az Internationale Union für reine und angewandte Chemie delhi kongresszusán 1972. IL 12-én ismertette első ízben. A B12-vitamint azonban mind gyógyászati, mind állattakarmányozási célokra hosszú időn keresztül a jövőben is bizonyos mikroorganizmusokból fogják ki^ nyerni, mert szintetikus előállítása — rendkívül nagy elméleti jelentősége ellenére — lényegesen drágább lenne (A. Eschenmoser értékelése). A BI2 -vitamin a sejtekben szabad állapotban nem fordul elő, hanem csak olyan korrinvázas vegyületek alakjában található, amelyekben a korrinváz központi kobalt atomjához nem cianidcsoport, hanem dezoxi-adenozilcsoport kapcsolódik és ezen keresztül kötődik az egész komplex a sejtfehérjékhez. A sejtekből a B12 vitamin, illetőleg a korrinvázas vegyületek a sejtek felr tárásával nyerhetők ki, azaz a sejtfal felszakítása után a belső szerkezetet még szét kell roncsolni, a fehérjéket denaturálni, majd a korrinváz — dezoxi-adenozilcsor port, valamint a dezoxi-adenozilcsoport fehérje kö^ti kötéseket meg kell bontani. (Ullmann: Enzyklopedie der Chemischen Technologie 18; kötet, 214. oldal, 1967). A B12 -vitamin előállítása igen nagy fejlődésen ment át. Kezdetben májból állítottak elő B12 -yitamin tartalmú készítményeket, később felismerték, hogy bizonyos 171339 1
