171306. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2 -dezoxi-uridinek előállitására tiszta alfa és béta izomerek formájában.
13 171306 14 ///. táblázat A származékok hatásának vizsgálata Lmo ascites tumoron Az L1210 ascites tumort 105 sejtszámmal oltottuk át i. p. DBA/2 nőstény egerekre. Kísérleti csoportonként 10—10 állat szerepelt. Túlélési idő napokban transzplantáció utáni napon 200 mg/kg i. p. transzplantáció utáni első naptól naponta (1—10. nap) 10X20 mg/kg i. p. transzplantáció utáni 2. naptól kétnaponta (2—10. nap) 5x40 mg/kg Kontroll 10,0 10,0 10,0 5-etil-2'-dezoxi-uridin 10,5 5-izopropil-2'-dezoxi-uridin 10,0 5-butil-2'-dezoxi-uridin 11,0 5-hexil-2'-dezoxi-uridin 9,0 10,0 11,0 5-heptiI-2'-dezoxi-uridin 10,5 11,0 11,0 5-oktil-2'-dezoxi-uridin 11,0 11,0 12,0 5-decil-2'-dezoxi-uridin 11,0 5-fluoruracil 9,5 A vizsgált vegyületek 400 mg/kg dózisban toxikus hatást nem mutattak, feltűnőnek tartható azonban az, 25 hogy a hexil- és heptil-dezoxi-uridin kezelés után a kísérleti állatok elaludtak. Ezen hatóanyagok igen kifejezetten befolyásolták a radioaktív timidin, de különösen a radioaktív dezoxi-uridin beépülését a DNS-be, amely arra utal, hogy a DNS-szintézist a pirimidin 30 metilációjának a lépésénél gátolják. Akut toxicitási vizsgálatokban azt találtuk, hogy az i. p. adagolás formájában a hexil-dezoxi-uridin LD50 értéke egészséges hím, 30 g-os CELP egereken 470 mg/kg. In vitro szövettenyészetben szaporodó fibroblast tenyészetek vizs- 35 gálatakor az etil-dezoxi-uridin mutatott citotoxikus hatást. 40 Virosztatikus hatás vizsgálata Az 5-R-2'-dezoxi-uridinek ß-anomerjei közül az R szubsztituensként etil-, propil-, i-propil-, n-butil- és n-pentil-csoportot tartalmazó származékok hatását 45 vizsgáltuk meg Herpes simplex vírussal szemben. 1. A vírus tízes léptékű hígításaival fertőzött sejttenyészetek tápfolyadéka 10—10 y/ml anyagot tartalmazott. A kontroll vírus infektív titeréhez képest az 50 etil-származék 2,25 log, az n-propil—n-pentil származékok pedig 1,25 log gátlást eredményeztek. 2. A sejttenyészeteket Herpes simplex vírus 100 TCID50 mennyiségével fertőztük, és 2 óra adszorpciós 55 idő után adott tápfolyadék tartalmazta az anyagok 10—10 y/ml mennyiségét. A sejttenyészetek vírushozamát 24 óra múlva határoztuk meg. A vizsgált vegyülettel nem kezelt kontroll vírustenyészet hozamához képest az összes vegyület 2 log csökkenést okozott. 60 Összegezve tehát a kétféle módon végzett vizsgálatok azt mutatták, hogy az összes vizsgált anyag kifejezett virosztatikus hatással rendelkezik a Herpes simplex vírussal szembén. 65 15. példa Tablettázott készítmény előállítása A következő összetételű tablettázott készítményt állítjuk elő: 5-oktil-2'-ß-dezoxi-uridin 500 mg laktóz 400 mg burgonyakeményítő 80 mg magnéziumsztearát 20 mg 1000 mg A hatóanyag és a laktóz száraz keverékét vizes burgonyakeményítő-csirizzel összegyúrjuk, a kapott maszszát granuláljuk, a granulátumokat szárítjuk, majd szitáljuk. Az így kapott granulátumokat a magnéziumsztearáttal homogenizáljuk, majd a homogén anyagkeveréket 1000 mg végsúlyú tablettákká préseljük. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás 2'-dezoxi-uridinek előállítására (la) általános képletű a-, illetve (Iß) általános képletű ß-izomerek formájában — a képletekben R hidrogénatomot, halogénatomot vagy 1—20 szénatomos alkil-csoportot jelent — (II) általános képletű védett uracil-származékok — ahol R jelentése a fenti és X tri-(rövidszénláncú)-alkil-szilil-csoportot jelent — és (III) általános képletű védett ribofuranozil-halogenidek — ahol Hal halogénatomot jelent, X' jelentése pedig szubsztituált benzoilcsoport, ahol a szubsztítuens halogénatom, rövidszénláncú alkil-csoport vagy nitro-csoport lehet és célszerűen a p-helyzethez kapcsolódhat — két- vagy háromvegyértékű fémsó katalizátor jelenlétében, közömbös szerves oldószerben végrehajtott reakciója, a közbenső termékként képződött (IV) általános képletű vegyületek — ahol R, X és X' jelentése a fenti és a hullámos vonal a- vagy ß-konfiguraciot jelöl — védőcsoportjainak hidrolitikus lehasítása és az izomerek elkülönítése útján —, azzal jellemezve, hogy a (II) és (III) általános képletű vegyületek reakcióját molekulaszita jelenlétében 7
