171208. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-amino-3-metil-cef-3-ém-4-karbonsav-származékok előállítására
171208 10 5. példa Cephalosporium acremonium fermentációs folyadékot szűréssel megszabadítunk a sejtektől, savasán kezelünk (2,8-as pH-n) annak érdekében, hogy a benne lévő penicillin N-t elbontsuk, utána újból szűrjük és a maradékot mossuk. A szűrletet egyesítjük a mosófolyadékokkal és 3 liter olyan oldatot kapunk, amely 4762 y/ml cefalosporin C vegyületet tartalmaz. Ebből az oldatból 200 ml-t kiveszünk és pH-ját nátriumhidroxiddal 7,0-re állítjuk, 350 mg kobaltszulfátot és 194 mg piperazint adunk hozzá és az egészet 37 C°-ra melegítjük. Ehhez az elegyhez 1 óra leforgása alatt keverés közben cseppenként hozzáadunk 3,4 g fenilglioxált és a pH-t nátriumhidroxid és kénsav adagolásával 5,0-re állítjuk. A reakcióelegyet 30 percig tovább keverjük 37 C°-on és utána a pH-ját kénsavval 3,0-ra állítjuk be, majd 43,9 ml telített, vizes nátriumperborát-oldatot csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet további 10 percig keverjük és utána a pH-ját kénsavval 1,5-re állítjuk a reakció megállítása érdekében, majd megelemezzük. Az elemzés azt mutatja, hogy az elegy 70,1% 3-acetoximetil-7ß-(4--karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat tartal-7. példa 2,3 g 74,2%-os tisztaságú kristályos cefalosporin C nátriumsót feloldunk 300 ml 2 mólos (4,6 pH-jú) foszfát-5 -pufferben. Az oldathoz 30 perc alatt keverés közben 5°-on cseppenként hozzáadunk 300 ml 2 mólos (4,6 pH-jú) olyan foszfát-puffer-oldatot, amely 4,7 g nátriumglioxalátot tartalmaz. Az elegyet keverjük és 2 óra hoszszat reagáltatjuk, folyamatosan beviszünk 35 ml 15%-os 10 vizes hidrogénperoxid-oldatot, majd az elegyet 15 percig tovább keverjük és a pH-ját kénsavval 1,5-re csökkentjük a reakció megállítása végett. A reakcióelegyet megelemezzük, az elemzés azt mutatja, hogy az 76,4% nyers 3-acetoximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-15 -karbonsavat tartalmaz. A reakcióelegyet a 2. példában leírt módon tisztítjuk és így 1,65 g halványsárga kristályos 3-acetoximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. 20 Tisztaság: 68,7%. 8. példa A reakcióelegyet a 2. példában megadott módon kezeljük és így 790 mg sárga kristályos 3-acetoximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. Tisztaság: 72,2%. 6. példa 1,25 g 74,2%-os tisztaságú kristályos cefalosporin C nátriumsót és 791 mg nikkel(Il)szulfátot feloldunk 100 ml vízben. Az oldathoz keverés közben 5 C°-on hozzáadunk 2,16 g glioxilsavat és 204 mg imidazolt. A reakcióelegy pH-ját vizes nátriumhidroxidoldattal 5,0-re állítjuk, majd 2 óra hosszat keverjük és 53 ml telített, vizes káliumperborát-oldatot csepegtetünk hozzá. Az elegyet további 30 percig keverjük és utána a pH-t sósavval 1,5-re állítjuk a reakció megállítása érdekében. Ezt követően a reakcióelegyet megelemezzük és megállapítjuk, hogy 81,4% nyers 3-acetoximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat tartalmaz. A reakcióelegyet a 2. példában ismertetett módon kezeljük és így 822 mg halványsárga kristályos 3-acetoximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. Tisztaság: 80,3%. A fenti reakciót megismételjük azzal az eltéréssel, hogy nikkelszulfát helyett a következő fémsókat alkalmazzuk. Az alkalmazott fémsók mennyiségét és a kapott kitermeléseket a következő táblázatban adjuk meg. Fémsó Nyers kitermeFajta Mennyiség (mg) lés (mg) FeCl3 .2H 2 0 436 838 A1C13 .6H 2 0 725 838 CaCl2 .2H 2 0 422 811 FeS04 .7H 2 0 836 834 MnS04 .H 2 0 509 831 25 375 mg 74,2%-os tisztaságú kristályos cefalosporin C nátriumsót és 237 mg nikkel(II) szulfátot feloldunk 45 ml vízben. Az oldathoz keverés közben szobahőmérsékleten hozzáadunk 620 mg piroszőlősavat és 61,2 mg imidazolt. A reakcióelegy pH-ját vizes nátriumhidroxid-30 -oldattal 5,0-re állítjuk, majd 2 óra hosszat keverjük az elegyet és 15,9 ml telített, vizes káliumperborátoldatot csepegtetünk hozzá. A reakcióelegyet további 30 percig keverjük, utána a pH-ját kénsav hozzáadásával 1,5-re állítjuk a reakció megállítása végett, majd megelemez-35 zük. Az elemzés azt mutatja, hogy az elegy 77,6% nyers 3-acetoximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4--karbonsavat tartalmaz. A reakcióelegyet a 2. példában megadott módon kezeljük és így 238 mg halványsárga kristályos 3-acetoxi-40 metil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. Tisztaság: 79,6%. 45 9. példa Terjesen a 2. példában leírt módon dolgozunk azzal az eltéréssel, hogy 3 g kristályos dezacetil-cefalosporin C nátriumsót, amelynek a tisztasága 56,3%, használunk cefalosporin C nátriumsó helyett. A reakció folyamán 90% nyers 3-hidroximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsav keletkezik a reakcióelegyben. Tisztítás után 1,2 g halványsárga kristályos 3-hidroximetil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. Tisztaság: 92,5%. 50 55 60 65 10. példa Egészen a 2. példában leírt módon dolgozunk azzal az eltéréssel, hogy 5 g 83%-os tisztaságú kristályos dezacetoxi-cefalosporin C nátriumsót használunk kristályos cefalosporin C nátriumsó helyett. A reakció folyamán 95,2% nyers 3-metil-7ß-(4-karboxibutanoilamido)-3-5
