171157. lajstromszámú szabadalom • Eljrásá pirimido[4,5-b]kinolin-4-(3H)-on-2-karbonsav-származékok előállítására
9 171157 10 izotóniás állapot beállítására először megfelelő mennyiségű sót vagy glükózt adunk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket adagolhatjuk a bronchokonstrikciótól származó asztma kezelésére, a kezelést inhalálással vagy más olyan módon foganatosítjuk, amely lehetővé teszi a hatásos vegyületek közvetlen érintkezését a kezelendő szövetek összehúzódott területeivel. Az inhalációs úton való kezelésre használható, a találmány szerinti eljárással előállított készítmények a következők lehetnek: 1. a hatásos összetevő a fentiekben megadott folyékony halmazállapotú anyagokkal készített oldata vagy szuszpenziója, amelyet a ködképzővel adagolunk, 2. a hatásos összetevő folyékony halmazállapotú vivőanyaggal, például diklór-difluormetánnal vagy klór-trifluormetánnal készült szuszpenziója vagy oldata, amelyet nyomás alatt egy tartályból adagolunk, 3. por-inhalációs használatra a hatásos összetevő és egy szilárd halmazállapotú hígítóanyag, például laktóz keveréke. Az ismert módon, ködképzővel kivitelezett, inhalálásra használható készítmények 0,1% és 1% közötti mennyiségű hatásos összetevőt tartalmaznak, a tartályból, túlnyomás alatt kiáramló készítmények hatóanyagtartalma 0,5% és 2% között változik. A por-inhalálásra használt készítményekben a hatóanyag és a hígító aránya 1 :0,5 és 1 : 1,5 között változhat. Szükséges, hogy a hatóanyag olyan mennyiségben legyen jelen a készítményben, hogy az előnyösen legyen használható. Magától értetődően többféle készítmény adagolható egy időben. Bár bizonyos esetekben használhatunk olyan készítményeket, amelyek 0,005%-nál kevesebb hatóanyagot tartalmaznak, előnyösen olyan készítményeket használunk, amelyek legalább 0,005% hatóanyagot tartalmaznak, különben a vivőanyag mennyisége túlságosan nagy lesz. A hatásos összetevő koncentrációjának növekedésével nő a készítmény aktivitása. A készítmény tartalmazhat 10, 50, 75. 95%, vagy még ennél is több hatóanyagot. 10 IS A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek vizsgálata a PCA-reakcióval (lásd előbb és alább) jelzi, hogy a vegyületek aktivitása ezen vizsgálat során kitűnően egyezik az allergiás eredetű asztma kezelésére való használhatóságuk mértékével. A vegyületeknek a PCA-reakciókkal való interferálását hímnemű Charles River Wistar, 170-210 g súlyú patkányokon határozzuk meg. A reaginin antiserá-t Mota szerint [Immunology, 7, 681 (1964)], tyúktojás-albumint és B. pertussis-t használva állítjuk elő. A tyúktojás-albuminra hiperimmun antiserá-t Orange és munkatársai szerint [J. Exptl. Med., 127, 767 (1968)] állítjuk elő. Az antigén válasz előtt 48 órával a reaginin antiserá-t intradermálisan (i.d.) beinjekciózzuk egy normális patkány kiborotvált hátbőre alá. A válasz előtt 5 órával a fentihez hasonlóan injektáljuk a hiperimmun antiserá-t. Öt órával később, egy har-20 madik helyen intradermálisan beinjektäunk 60 meg hisztamin-dihidrogénkloridot, amivel akadályozzuk az antihisztamin és nem-specifikus típusú gátlások bekövetkezését. Ezután intravénásán adagoljuk a találmány szerinti eljárással előállított és vizsgált 25 vegyületeket vagy a sót, és ezután közvetlenül 2,5 mg Evans-kéket és 5 mg tojás-albumint adagolunk, amelyeket előzőleg fiziológiás sóoldatban oldottunk. Orális adagolás esetén az Evans-kéket és a tojás-albumint a hatóanyag adagolása után 5 perc-30 cel juttatjuk a szervezetbe. Harminc perccel később kloroformmal kábítjuk az állatokat, a hátrész bőrét eltávolítjuk, és hátoldalát megvizsgáljuk. Mindegyik injekcióhelyen megjelenő folt nagyságát mm-ben oldjuk meg, és 0,1, 0,5, 1, 2, 3 vagy 4 jelekkel jelöljük az elszíneződés mértékét. Egy adott injekcióhelyre vonatkozó adatokat 8-8 állattal kivitelezett kísérlettel határoztunk meg átlagszámítással, és összehasonlítottuk a sóoldattal kezelt állatokon meghatározott adatokkal. A különbséget a használt vegyület gátló hatásából adódó százalékos gátlással adjuk meg. A fentiekben megadott vizsgálat során a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek közül az egy-egy csoportbál kiemelt vegyületeket vizsgáljuk, a hatást a védett állatok százalékaiban adjuk meg. Összehasonlítás céljából egy általánosan használt allergiaellenes vegyület, a dinátrium-kromoglikát hatását is meghatároztuk. 35 45 2. táblázat Az 1 általános képletű pirimido[4,5-b]kinolin-4(3H)-on-2-karbonsav-származékok antiallergiás hatása -COR° R1 Az I általános képletben 2 P3 R" Intravénás R2 RJ R5 mg/kg % Orális* mglkg 10 100 100 80 3 99 60 1003 1 1004 30 723 0,3 826 10 753 0,1 45 6 3 692 0,03 306 1 122 -COOC2 H 5 H H H H H 5
