170987. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mönomicin előállítására
5 170987 6 Példák: Streptomyces ghanaensis-t (ATTC 14 672) átoltunk 300 ml-es Erlenmeyer lombikban 30 ml következő összetételű steril tápközegbe: 4,0% glükóz 3,0% szójaliszt 0,3% száraz cefre (szeszgyári maradék, amelyet a mikrobiológiában proteinben és nitrogénben gazdag tápforrásként használnak). 0,25% nátriumklorid 0,25% kalcium-karbonát és annyi víz, hogy az össztérfogat 30 ml legyen. Beoltás után ezt az előtenyészetet 28-30 C°-on két napig rázatjuk 300 fordulat/perc frekvenciával. A fő-tenyészet táptalajának összetétele a következő: 3,0% szójaolaj 3,0% szójaliszt 3,0% kukoricakeményítő 1,0% szacharóz 0,3% ammóniumszulfát 0,4% kalcium-karbonát 2,0% élesztő és annyi víz. hogy az össztérfogat 30 ml legyen. Az alábbiakban következő táblázatban felsorolt tenzideket 10 súlyszázalékos, kétszer desztillált vizes oldatok alakjában adjuk a feimentléhez. Az oldatokat a fermentléhez történő adagolás előtt még 10 percig sterilizáljuk 123-127 C°-on. A fentiekben részletezett fermentléhez adjuk ezután 37C°-on a tenzid-oldat l,5ml-ét, majd pe-10 dig 5 ml előtenyészetet adagolunk. Az így kapott főtenyészetet 28-30 C°-on 120 órát rázatjuk 260-300 fordulat/perc frekvenciával. 15 Ezután az egész reakcióelegyet 60 ml metanollal 2 percig vibro-keverőben keverjük, majd redős szűrőn leszűrjük. A szűrlet alikvot részében turbidimetrikusan meghatározzuk a mönomicin-tartalmat egy Staphylococcus aureus standard tenyészetre 20 gyakorolt hatása útján, összehasonlításként ismert mönomicin-tartalmú oldatot alkalmazva. 25 30 35 A táblázatban összefoglalt egyéb eredményeket úgy kapjuk, hogy változtattuk a Streptomyces törzseket, a zsír-adalékot és a tenzid-adalékot, egyébként azonos reakciókörülményeket alkalmazva. A táblázatban megadott tenzideknél a következő jelöléseket használtuk, aholis M jelentése molekulasúly, ZP jelentése zavarosodási pont, HSz jelentése hidroxil-csoportok száma, HLE jelentése a hidrofil-lipofü-egyensúlyi érték: Táblázat n M ZP HSz HLE A keverék3 ' 20 1070 77 53 16,2 A keverékx 25 1290 78 44 16,8 B keverék5 "' 25 1260 77 43 17,5 Dodecilxxx 20 1000 79 56 16,5 Dodecil50 TM 30 1430 78 39 17,5 x Különböző szénláncú zsíralkoholok keveréke (részletezést 1 .a táblázatban). xx Különböző szénláncú zsíralkoholok keveréke (részletezést l.a táblázatban). xxx A tenzid zsíralkoholtartalmának 98-100%-a dodecilalkohol (laurilalkohol).
