170668. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibakteriális hatású 7-[D- alfa-amino- alfa-(p-hidroxifenil)-acetamido]- 3-(1,2,3-triazol- 5- iltiometil)- 3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát előállítására

13 170668 14 h) Veszteség a bioaktivitásban magas hőmérsékleten való tárolásnál: 100 °C, 24 óra= «6%; 48 óra = = < 12%, 56 °C, 1 hónap = < 10%. Kristályos metanolszolvát előállítása kristályos propilénglikolszolvátból 50 g fenti módon előállított 7-[D-a-amido-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-propilénglikolszolvátot 250 ml 95%-os (tf/tf) metanol-víz-elegyben szuszpendálunk 22—25 °C-on. A szuszpenzióhoz tömény sósavat adunk gyors keverés közben, így a pH-t 1,3—1,5-re állítjuk, ekkor oldatot kapunk vagy a szuszpenzió majdnem egészen oldattá alakul. Ezután a pH-t trietilaminnal 1,7-re állítjuk, majd 7,5 g aktivált szenet adunk az elegyhez és 0,5 óra hosszat állni hagyjuk szuszpenzió képződése végett. Az aktívszenet szűréssel elkülönítjük és 75 ml metanollal mossuk. A mosófolyadékot a szűrlethez adjuk. (A sósav adagolástól számítva eddig 5 óra szükséges). Az egyesített mosófolyadék és szűrlet elegyét gyors ütemben keverjük és 5 perc leforgása alatt trietilamint adunk hozzá és így a pH-t 4,5-re állítjuk. A kristályosodás 1—3 perc alatt megkezdődik. Az elegyet 1 óra hosszat állni hagyjuk a kristályosodás lejátszódása végett, ezután a kristályokat szűréssel elkülönítjük, 100 ml metanollal mossuk és 56 °C-on 24 óra hoszszat vákuumban szárítjuk. Biokitermelés 75—90%, biopróba = 850—900 mcg/mg; NMR—IR = 1 mól metanoljelenlétét erősiti meg; víz%, K. F. =2—4,0. A következő példák a találmány bemutatására szolgálnak, de annak oltalmi köre nem korlátozódik csupán a példákban bemutatott módszerekre. Ezek csupán az előnyös kiviteli módok. 1. példa 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3--triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát előállítása 3,0 g 7-[D-«-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3--(l,2,3-triazol-5-iltiometü)-3-cefem-4-karbonsav-metanolszolvátot 20 ml vízben 18 óra hosszat szobahőmérsékleten és 3,9 pH-n szuszpendálunk. A képződött kristályokat szűréssel elkülönítjük és 5 ml vízzel mossuk, ezt követően 45 °C-on 24 óra hosszat levegőn szárítjuk és így a cím szerinti kristályos terméket kapjuk. Víz %, K. F. = 5,54 (elméleti szeszkvihidrátra = 5,51). Olvadáspont = 188—194 °C (bomlás). IR és NMR elemzés a megadott szerkezetet bizonyítja és azt mutatja, hogy a termék nem tartalmaz metanolt. 2. példa 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát 15 g 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3--(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-metanolszolvátot 60 ml vízben szuszpendálunk. A pH-t 4 n nátriumhidroxiddal 6,5-re állítjuk és az elegyet 200 mesh lyukbőségű szitán átengedjük. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 óra hosszat állni hagyjuk és eközben a pH-t 6,5 értéken tartjuk. Eközben végbemegy a kristályosodás, a kristályokat szűréssel elkülönítjük, 20 ml vízzel mossuk és 37 °C-on levegőn szárítjuk 24 óra hosszat. Ily módon 11,5 g kristályos terméket kapunk. Bio-próba =924 mcg/mg (átlag). Víz %, K. F. =5,26. NMR és IR elemzés a megadott szerkezetet igazolja és azt mutatja, hogy metanol, sem propilénglikol nincs a molekulában. 3. példa Kristályos 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát előállítása és más kristályos hidrátok készítése 10,0 g (200 mesh nagyságú) 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)-acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-metanolszolvátot, amely lényegében mentes propilénglikoltól, 30—40 ml ionmentesített vízben szobahőmérsékleten (20—25 °C) szuszpendálunk, így 3—4 pH-jú vizes szuszpenziót kapunk. Ezután lassú ütemben erőteljes keverés közben 40%-os nátriumhidroxidot adunk a szuszpenzióhoz mindaddig, ameddig a pH 6,3—6,7 nem lesz. Az elegyet 6,3—6,7 pH-n 2 óra hosszat kristályosodni hagyjuk. A kristályokat szűréssel elkülönítjük, vízzel mossuk és levegőn 24 óra hosszat szobahőmérsékleten szárítjuk. Ily módon 75— 80 súly% hozammal 950—1000 mcg/mg kristályos 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-dihidrátot kapunk. IR és NMR elemzések a megadott szerkezetet igazolják és azt mutatják, hogy a termék nem tartalmaz metanolt, sem nyomokban propilénglikolt. Víz%, K. F. =6,56. A kristályos dihidrátot 37 °C-on 24 óra hosszat levegőn szárítjuk és így 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-kristályos szeszkvihidrátot kapunk. Víz%, K. F. =5,26. A dihidrátból egy mintát 45 °C-on 24 óra hosszat szárítunk levegőn és így a kristályos szeszkvihidrátot kapjuk. Víz%K. F.= 5,5. A dihidrát egy mintáját levegőn szárítjuk 56 °C-on 24 óra hosszat, így kristályos 7-[D-a-amino-oc-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-iltiometil)-3--cefem-4-karbonsav-monohidrátot kapunk. Víz%, K. F. =4,38 (elméleti víz% monohidrátra = 3,75). A dihidrátból egy másik mintát vákuumban foszforpentoxid felett szárítunk 24 óra hosszat, ily módon kristályos 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(1,2,3-triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav hemihidrátot kapunk. Víz%, K. F. =2,63 (elméleti víz% hemihidrátra = 1,91). A dihidrát egy további mintáját vákuumban 56 °C-on 24 óra hosszat szárítjuk és így kristályos hemihidrátot kapunk. Víz%, K. F. = 1,6—2,0. 4. példa 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-(l,2,3--triazol-5-iltiometil)-3-cefem-4-karbonsav-szeszkvihidrát (porlasztott) intramuszkuláris szuszpenzióhoz 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7