170560. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil béta-laktám-tipusú antibiotikum-érzékenységi tesztkorongok előállítására
7 170560 8 Amikor a j3-laktám-típusú antibiotikum-diszperzió egyenletes rétege a papírra kerül, az oldóhatás nélküli vivőanyag gyorsan beszívódik a papírba és a papíron visszamarad a kristályüledék. Az eljárásban alapvetően fontos, hogy a papírra adagolt vivőanyag összmennyisége kevesebb legyen a papír abszorpciós kapacitásának 100%-ánál, mert csak így képződik a papíron kielégítően egyenletes 0-iaktám-típusú antibiotikum-kristálybevonat. A papírt úgy is érintkezésbe hozhatjuk a 0-laktám-típusú antibiotikum-diszperzióval, hogy az utóbbit a papírra permetezzük. Ez úgy történhet, hogy a papírt egyenletes, szabályozott ütemben mozgatjuk a permetező szívóka — előnyösen legyező-típusú szívóka - mellett, át a diszperzió nyomás alatt kifúvódik. A fúvókán át kibocsátott térfogatot összhangba hozzuk a papír haladási sebességével. Előnyösen a papírt a szívóka alatt helyezzük el és az utóbbit úgy méretezzük, hogy a permetezés a papír teljes szélességében történjék. Ugy is eljárhatunk, hogy a papírt tartjuk nyugalmi helyzetben és a permetező fúvókát mozgatjuk meghatározott állandó sebességgel a papír felett. Ez az eljárásváltozat nagyon hatásos, ha egyedi papírlapok kezelésével állítunk elő 0-laktám-típusú antibiotikum-érzékenységi teszt-korongokat. Miután a papírt érintkezésbe hoztuk a kristályos j3-laktám-típusú antibiotikum-diszperzióval és az oldóhatás nélküli vivőanyag abszorbeálódott, a papírt megszárítjuk a vivőanyag elpárologtatása céljából. A szárítás bármilyen ismert módszerrel elvégezhető. Például ha a papír összefüggő tekercs, a ,,nedves" papírt lassan szárítóalagúton vezetjük át, ahol a vivőanyagot elpárologtatjuk és oldószer-visszanyerő rendszerbe szívatjuk át, vagy mint hulladékot kezeljük. Egyedi „nedves" lapokat végtelenített szállítószalagon vihetjük át a szárítóalagúton, vagy a lapokat kályhába vagy fűtött szárítófülkébe helyezzük, gondoskodunk a vivőanyag-gőzök eltávolításáról és a gőzöket alkalmas visszanyerő vagy elvezető rendszerbe továbbítjuk. A vivőanyag párolgásának meggyorsítása céljából vákuumot alkalmazhatunk. A szárítási hőmérsékletnek azonosnak kell lennie a vivőanyag forráspontjával a szárításnál alkalmazott nyomáson a hőmérséklet legfeljebb néhány fokkal lehet magasabb a forráspontnál és semmi esetre sem lehet magasabb 100C°-nál. A szárítandó papírt csak a vivőanyag tökéletes elpárolgásáig tartjuk a szárítási hőmérsékleten, nehogy az antibiotikum elbomolják. Bármilyen vivőanyag-elpárologtatási módszert alkalmazunk, mindig tekintetbe kell venni, hogy a vivő anyag-gőzök gyúlékonyak és/vagy mérgezőek lehetnek. Megfelelő lépéseket kell tenni, hogy a személyzetet és a tárgyakat az ilyen veszéllyel szemben megvédjük. Az erre alkalmas eszközök jól ismertek a szakember előtt. Végül a |3-laktám-típusú antibiotikummal bevont száraz papírból teszt-korongokat készítünk. Ezt a műveletet általában többfejes lyukasztószerszámmal hajtjuk végre, az egyes korongokat szokványos papírnyíró présen vágjuk ki. Bár a találmány szempontjából a korongok alakja és mérete nem korlátozó tényező, de a korongok használatára vonatkozó előírások specifikusak. A megállapított szabványok 6,35 mm át-5 mérőjű korongokra vonatkoznak. Ez sok üzem számára lehetővé teszi a megbízható módon kölcsönösen használható korongok előállítását, melyek mindig összehasonlítható eredményeket adnak. Ezenfelül míg a különböző antibiotikumok tény-10 leges koncentrációja a teszt-korongokon változó, minden antibiotikum mindig ugyanabban a koncentrációban van jelen, a szabványokat az FDA állapította meg. A teszt-korongokkal végzett mikrobiológiai próbákban a gátlási zóna antibiotikumon-15 ként különbözik. A találmány további megvilágítására szolgálnak a következő próbák. 20 1. példa Cefalotin-érzékenységi teszt-korongokat készítünk a következőképpen: 25 1. Cefalotin-nátrium kristályokat kalapácsmalomban megőrlünk és olyan részecskeméretet állítunk elő, hogy valamennyi részecske átmenjen a 100 mesh lyukbőségű szitán. 30 2. Az így kapott cefalotin-nátrium kristályokat izopropanolban szuszpendáljuk 2 mg/ml koncentrációban (0,2%). 3. A diszperzióból körülbelül 60 ptl-t visszünk fel Eaton-Dikeman 676 alfa-cellulóz papírlapok 35 minden cm2 -ére. 4. A kapott „nedves" papírt rozsdamentes acélhuzalból készült szitára helyezzük és levegő átáramoltatása közben 60 C°-os kályhában 760 Hgmm 40 nyomáson 4 percig szárítjuk. 5. A 6,46 mm átmérőjű egyedi teszt-korongok cefalotin-tartalmának egyenletességét spektrofotometriás elemzéssel állapítjuk meg. 10 lemeznek 45 5%-nál kisebb az átlagtól való eltérése. A leírtak szerint előállított teszt-korongok hatásosságát Klebsiella pneumoniae-val végzett antibiotikum-érzékenységi próbában vizsgáljuk meg. A 50 korongokat a bevont és a bevonatlan oldalukkal lefelé fordítva helyezzük az agárra. Azonos inhibiciós zónák keletkeznek, függetlenül attól, hogy a korong melyik oldala érintkezik az agárral. 55 Más korongokat 37 C°-on tárolunk nedvszívó anyag jelenléte nélkül. Korábbi -eljárással készített, iparilag előállított korongokat azonos körülmények között tartunk. A szabályos időközökben megismételt próbák eredményeit az I. táblázat mutatja. 60 A használt vizsgálati módszer hibája ± 10%. Világosan látható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított cefalotin-nátrium teszt-korongok jelentősen stabilabbak hővel és tárolással szemben, mint 65 a korábbi eljárással készült teszt-korongok. 4
