170464. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-helyettesített 7béta-(D-5-amino-5- karboxivaleramido)- 7-metoxi-cef-3- em-4- karbonsav-származékok előállítására
5 170464 6 1. példa 7/?-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3--(azidometil)-7-metoxi-cef-3-em-4--karbonsav 2,0 g 7j3-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-(acetoximetil)-7-metoxi-cef-3-em4-karbonsavat és 1,0 g nátriumazidot 10 ml vízben oldunk és az oldatot éjjelen át melegítjük 50 C° hőmérsékleten. Ezután az elegyet liofilizáljuk, termékként nyers 7j3-(D-5--amino-5-karboxivaleramido)-3-(azidometil)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat kapunk. Ha a fent leírthoz hasonló módon dolgozva, a fenti példában kiindulóanyagként említett 7j3-(D-5-- ami no -5-karboxivaleramido)-3-(acetoximetil)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav helyett magát a 842A antibiotikumot reagáltatjuk nátriumaziddal és egyébként a fent leírt módon járunk el, akkor ugyanehhez a termékhez jutunk. Ezt az eljárást a példának az alábbi változata szemlélteti közelebbről. 100 mg 7j3-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-- karbamoiloximetil-7-metoxi-cef -3-em-4-karbonsavat 5 ml 0,5 mólos foszfát-pufferoldatban (amelyet 3,5 g nitriumdihidrogénfoszfát és 3,4 g dinátriumfoszfát 100 ml vízben való oldása és az oldat sósavval 5 pH-értékre történő állítása útján készítettünk) 20 mg nátrium-azid hozzáadásával 8 percig melegítjük 95 C° hőmérsékleten. A reakcióelegyet ezután preparatív vékonyréteg-kromatográfiával dolgozzuk fel és ily módon 20 mg 7j3-(D-5-amino-5--karbo xiva le ram ido)-3-(azidometil)-7-metoxi-cef-3--em-4-karbonsavat kapunk, a terméket infravörös és mágneses magrezonancia színképe alapján azonosítottuk. 5 Ezt a terméket 0 C° hőmérsékleten 1,0 ml trifluorecetsavval elegyítjük, az elegyet 5 percig állni hagyjuk, majd nagy térfogatú éterbe öntjük és az oldószert elpárologtatjuk. Ily módon 15 mg 7/3-(D- 5 - amino-5-karboxi-valeramido)-3-(azidometil)-7-met-10 oxi-cef-3-em-4-karbonsavat kapunk fehér por alakjában. A fenti módon kapott termék számos különféle baktériumtörzzsel szemben mutat biológiai aktivi-15 tást. A terméket az alábbi adatok jellemzik: Vékonyréteg-kromatográfia: 75%-os vizes acetonitrilben, cellulóz-lemezen Rf-érték 0,7, a 842A antibiotikum dinátrium-sójának Rf-értéke ugyanilyen körülmények között 0,3. 20 Ibolyántúli színkép: Áraax 263 millimikron, molekuláris kioltási együttható kb. 3400 (elméleti érték: 8000). Infravörös színkép: nujolban abszorpció 1780 cm-1 értéknél (béta-laktám-gyűrű jelenlétét mutatja). 25 A termék pozitív ninhidiin-próbát mutat, ami egy alfa-amino-adipoil-oldallánc jelenlétét mutatja. Biológiai értékmérés: a termék különféle mikroorganizmusokkal szemben az alábbi táblázatban megadott átmérőjű gátlási zónákat mutat a szokásos 30 korong-módszerrel vizsgálva, 100 mg/ml koncentrációban: Mikroorganizmus A 842A 7j3-(D-5-amino-5-karboxidinátrium-sója valeramido)-3-(azidometil)(100 mcg/ml) 7-metoxi-cef-3-em4-karbonsav (100mcg/ml) Escherichia coli W-MB-60 18 21 Pseudomonas stützen MB-1231 22 20 Vibrio percolans MB-1272 18 16 (5 mcg/ml) 2. példa 7j3-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3--(aminometii)-7-metoxi-cef-3-em4-karbonsav Az 1. példában leírt módon kapott nyers 70-(D-5- amino-5-karboxivaleramido)-3-(azidometil)-7-rnetoxi-cef-3-em4-karbonsav mintáját vizes metanolos oldatban, ecetsav hozzáadásával, platinaoxid-katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. A hidrogénfelvétel-befejeztével a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet betöményítjük. A maradékot polisztirol-trimetilbenzilammónium anioncserélő gyantán (43% H20) frakcionáljuk, a kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk. Termékként Iß- (D-5-amino-5-karboxivalerarnido)-3-(aminometil)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat kapunk. 50 55 60 65 A fent leírt katalitikus hidrogénezési eljárás helyett a fenti példában kiindulóanyagként említett 7ß-(D-5-amino-5-karboxivaleramido)-3-(azidometii)-7--metoxi-cef-3-em4-karbonsavat molekuláris hidrogénezés útján is redukálhatjuk. Ezt az eljárást a példa alábbi változata szemlélteti közelebbről: 7 j3 -(D - 5 -a m ino-5-karboxivaleramido>3-(azidometil)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsavat 90% ecetsav és 10% víz elegyében oldunk. Az oldatot 0 C° és 5 C° közötti hőmérsékletre hűtjük, és 30 mg cinkport adunk hozzá. Az elegyet 10 percig reagálni hagyjuk, majd leszűrjük és a szűrletből az oldódó cinkvegyületet kénhidrogénnel eltávolítjuk. A ka-F',f - elegyet azután bőséges vízzel hígítjuk, majd liofilizáljuk. Ily módon lényegileg tiszta 7j3-(D-5-, -amino-5-karboxivaleramido)-3-(aminometil)-7-metoxi-cef-3-em4-karbonsavat kapunk. Ezt a terméket 3
