170121. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9- dezoxi- proszta- 5,9,13-triénsav-származékok előállítására
9 170121 10 A zslrbontást gátló hatást in vitro vizsgáltuk az alábbi módszerrel: Rodbell eljárása /J.Biol.Chem. 239, 375. A94// szerint izolált zsirsejtekeFT órán át inkubáltunk kb. 9o ft-OB kontroll zsirlebomlás előidézéséhez elegendő teofillln adaggal, a tesztelt vegyületek és az összehasonlító sztandard /PCE,/ növekvő adagjainak jelenlétében. A hatáserőeséget /aktivitást/ a zslrbontást 3o sí-ban gátolni képes adagok nagyságával fejeztük ki /ED 3o */. A görcsöt előidéző hatást tengerimalac ileumon /csipőbélen/ és patkány méhen vizsgáltuk. A tengerimalac ileum tesztnél a következőképpen jártunk el: termosztáttal 35 C -ra szabályozott lo ml-es fürdőben oxigénnel és széndioxiddal /95 * 0~ + 5 # CO,/ kezeltünk Tyrode-oldatban o,5 g-os feszítés alatt álló, tengerimalac hímtől származó celpőbél-darabot. A rendszert a tesztelés megkezdése előtt 3o percig hagytuk stabilizálódni. A bél reakcióját izotóniáe, frontális Írókarral regisztráltuk, amelynek hosszúsága 4,5-szörös erősítést tett lehetővé. A logaritmusos dózie-hatás görbét külön-külön mind a tesztelt vegyületekre, mind pedig az összehasonlító vegyületre vonatkozóan számítással határoztuk meg. Számítottuk ugyanakkor a hatáserősség arányt és a viszonylagos megbízhatósági határokat is /P = o,o5/> A patkányméh teszt módszere a következő volt termosztáttal 29 C hőmérsékletre szabályozott lo ml-es fürdőben o,5 g-os feszítés alatt álló, tUszóhormonnal kezelt patkányméhet oxigénezett Dejalon-féle sóoldatban helyeztünk el. A készítményt a tesztelt vegyületek és az öezszehasonlitő vegyület alkalmazása előtt 3o percig hagytuk stabilizálódni. A méh reakcióját izotóniáe frontális Írókar segítségével mértük, amelynek hossza a reakció 4,5-szörös felerősítését tette lehetővé. A logaritmusos dózis/hatás görbét külön-külön számítottuk a tesztelt vegyületekre és az összehasonlító vegyületre vonatkozóan. Számítottuk ugyanakkor a hatáserősség arányt és a viszonylagos megbízhatósági határokat is /P * o,o5/. A bronchiális görcsoldó /asztmaellenes/ hatást tengerimalacon vizsgáltuk. A kísérleti állatokat csoportokra osztottuk, és hisztaminpermettel /hisztamin-hldrogénklorld o,2 #-os, vizes oldatából készített aeroszollal/ kezeltük, és feljegyeztük azokat az időket, amelyek elteltével az állatnál a bronchiális görcs jelentkezett. Négy órával később ugyanezeket az állatokat a tesztelt vegyületek permetjével kezeltük sóoldatban, különböző hígításokban, valamint az összehasonlító, sztandard PGE2 -oldat permetjével. Ezután megismételtük a hísztaminos /o,2 <f,/ permetkezelést, és ismét feljegyeztük azon időket, amelyek után a bronchiális görcs fellépett. Az eredményeket hatáserősség arányokban fejeztük ki. Az I általános képlettel leírható vegyületek szájon át /orálisan/, parenterálisan, intravénásán, végbélkúpok alakjában, vagy belélegeztetés utján adagolhatok. Adhatók például steril izotóniáe sőoldat intravénás infúziójával, az emlős testsúlyra vonatkoztatva percenként o,ol-lo, előnyösen o,o5-l ug/kg mennyiségben. A találmány továbbfejlesztéseként ezért a találmány tárgya kiterjed olyan gyógyszerkészítmények előállítására is, amelyek hatóanyagként a találmány szerinti eljárással előállított I általános képletü vegyületeket, vagy azok gyógyászatilag elfogadható bázisokkal alkotott észtereit tartalmazzák, a gyógyászati készítmények előállításánál szokásosan alkalmazott hordozóanyagokkal, higitószerekkel és egyéb segédanyagokkal együtt. Az ilyen gyógyászati készítményeket önmagukban ismert módon, a szakmában ismert módszerekkel állíthatjuk elő, például tabletták, kapszulák, pasztillák, végbélkúpok vagy bűzeik, oldatok, szuszpenziók, emulziók, stb. alakjában. Hordozóanyagként vagy higitőszerként használhatunk például vizet, zselatint, tejcukrot, keményítőket, magnézium-sztearátot, talkumot, növényi olajat, benzil-alkoholt, koleszterint, stb. A találmány szerinti eljárást a következő példákon mutatjuk be részletesebben. Az ezekben alkalmazott "DHSO" és "DIBA" rövidítések dimetilszulfoxidot, illetve dlizobutil-aluminium-hidridet jelentenek. 5 1. példa 6,S g 4 v:-hidroxi-5ft-benzlloximetil-ciklopent-2-en-l v-il-ecetsav benzolban készített oldatát valamilyen diazo-alkán éterben készült o,o3 mólos oldatával kezeljük. A keveréket 15 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd 1Q cákuumban szárazra pároljuk. így o,o25 mól 4,y -hidroxi-5 fi, -benzlloximetll-cÍkíopent-2-en-1 j. -il-ecei'sav-alkil-észtert kapunk. E módszerrel a következő vegyületeket állithatjuk elő: DL-4,c-b.ldroxi-5#-benziloximetil-eiklopent- ' -2-en-l x-il-ecetsav-metil-észter; /olaj/, 15 4oc-hidroxi-5 ^-behziloximetil-clklopent-2-0 -en-1-: -il-ecetsav-metil-észter; /«;/_=+32 /kloroform/, 4»i--hidroxi-5 f'í -benziloximetll-eiklopent-2--en-li -il-eceteav-etil-észter; /x /T .=+-3o° /kloroform/, 9„ BL-4'x:-hidroxi-5 (*> -benziloximetil-ciklopent-Z[J -2-en-lx-il-ecetsav-etil-éezter /olaj/. 2. példa ü,7b g 4jt.-hidroxi-5£-benziloximetll-eiklopent-2-en-l «-.-il-eeetsav-metil-észter vízmentes benzolban készített oldatához hozzáadunk benzolban oldott 19 mg p-toluolszulfonsa-25 vat és 4 ml 2,3-dlhidropiránt. A keveréket 8 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, 8o mg vízmentes káliumkarbonátot adunk hozzá, 8 percig keverjük, majd vizzel higitjuk. A szerves fázist vizzel, 2 5í-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd semlegeseégig ismét vizzel mossuk, rövid szilikagél osz-30 lopról 8:2 arányú clklohexán-dletil-éter oldószer eleggyel eluáljuk, végül az oldószert elpárologtatjuk. 3,36 g 4V.-/2-tetrahidropiraniloxi/-5 /-«-benziloximetil-ciklopent-2-en-lV-il-ecetsáv-metil-észtert kapunk AKL/T.S+23,5 Aloroform/. " nr Hasonló módon, de l,4-diox-2-én-t alkalmazva, az éterezés olaj alakjában 4a £*/dioxa-l,4--níloxí/-5 fo -benzLloxLmettl-eLklopexit-2~en-l%c-il-ecetsav-metil-észtert eredményez. /^C/T.2+23 Aloroform/. 3. példa „ 2,73 g /o,75.lo'Siól/ 4 *-/2-tetrahidropl-40 raniloxi/-5 ^-benziloxlmetil-ciklopent-2-en-lo(-ll-ecetsav-metil-észtert feloldunk 38 ml vízmentes toluolban. Az oldatot nitrogén atmoszférában, -6o C° hőmérsékletre hűtve, lo percig kezeljük DIBA 3o ml toluolban készített o,5 mólos oldatával. A reakciókeveréket -6o C°on további 3o percig keverjük, ezután a vegy-45 szer feleslegét 7,5 ml toluolban készített 2 mólos izopropil-alkohol-oldat hozzáadásával elbontjuk. A reakciókeveréket lo perc multán o-2 C°-ra melegítjük, 3 ml vizzel, 8 g nátrium-szulfáttal és 5 g celittel kezeljük, majd szűrjük. 50 A szürletet vákuumban bepárolva, olaj alakjában 2,56 g 4<-/2-tetrahidropiraniloxi/-5/S-benziloxlmetil-ciklopent-2-en-l«C-il-etanolt kapunk, /«t / =+ i8° /kloroform/. A 2. példa szerint előállított acetál-éez— térből kiindulva fent leirt eljárással állítjuk elő az alábbi vegyületet: 55 4«C--/dioxa-l,4-niloxi/-5/J-benziloxi-metil-ciklopent-2-en-l«t-il-etanal. /«C/p =+32 . Aloroform/. h Hasonlóképpen kapjuk meg a vegyület dl-származékát is. 4. példa fín A 4«c-/2-tetrahidropiraniloxi/-5£-benziloximetil-ciklopent-2-en-loC-il-etanalból 3,18 g-ot és 8,87 g 4-karboxibutil-trifenil-foszfónium-bromidot feloldunk 47 ml dimetil-szulfoxidban /HpO - o,o2 #/. Ezt az oldatot nitrogénatmoszférában és keverés közben kezeljük 4,48 g kálium-terc-butilát 4o ml DMSO-ban ké-65 szült oldatával, miközben a reakciókeverék hőmérsékletét külső hűtés alkalmazásával kb. 15 C°-on tartjuk. A rendszert ezen a hőmérsék-5
