170058. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az új 31 559 RP antibiotikum előállítására
. „ 170058 5 » 6 2. táblázat folytatása Legkisebb bakterio-Baktériumok sztatikus koncentráció Mg/ml Salmonella schottmuelleri (paratyphi B), Fougenc-törzsx >150 Proteus vulgaris >150 Pseudomonas aeruginosa " >150 xInstitut Pasteur Toxicitás: Csirkéknél a 31 559 RP nátriumsójának 50% letalitást okozó adagja (DL50 ) egyetlen perorálisan beadott 150 mg/kg volt. Kokcidiózis elleni hatásosság: A 31 559 RP nátriumsójának kokcidiózis elleni hatékonyságát Eimeria tenella és Eimeria acervulina mikroorganizmusokkal fertőzött csirkéken határoztuk meg. A csirkék eleségébe bekevert 31 559 RP nátriumsó kokcidiózis elleni hatékonysága nem-toxikus koncentrációban alkalmazva akkor nyilvánul meg, ha az eleség ebből az antibiotikumból 0,005 - 0,04 súly%-ot tartalmaz. Malária elleni hatékonyság: A 31 559 RP nátriumsója a kísérletileg Plasmodiummal fertőzött egerekben és csirkékben malária ellen hatásos. A 31 559 RP antibiotikumot termelő mikroorganizmust Indiában vett talajmintából izoláltuk, és a DS 24 367 számmal jelöltük. A mikroorganizmus-törzs egy mintáját az Egyesült Államok Földművelésügyi Minisztériuma Northern Regional Research Laboratory törzsgyűjteményében (Peoria, Illinois) letétbe helyeztük, és ott NRRL 5787 számon sorolták be. A törzset a szokott módon különítettük el. A módszer abból áll, hogy a talajminta kis mennyiségét steril desztillált vízben szuszpendáljuk, a kapott szuszpenziót különféle koncentrációkig hígítjuk, minden hígításból kis mintát veszünk, és Petri-csészében levő agar táptalaj felületén szélesztjük, majd néhány napig 25 C°-on inkubáljuk. A mikroorganizmus telepek kifejlődése után a tanulmányozni kívánt telepeket leemeljük, és agaros táptalajra átoltjuk, hogy bőségesebb tenyészetet kapjunk. A Streptomyces DS 24 367 törzs a Streptomyces hygroscopicus fajhoz tartozik, amelynek jellemző tulajdonságait H. D. Tresner és E. J. Backus [Applied Microbiology 4, 243-250 (1956)] és S. A. Waksman [The Actinomycetes, II., The Williams and Wilkins Company, Baltimore (1961) 230-231] határozták meg, elnevezése tehát Streptomyces hygroscopicus DS 24 367 törzs. A Streptomyces hygroscopicus DS 24 367 törzsnek három olyan jellemző tulajdonsága van, amelyek megegyeznek a H. D. Tresner és E. J. Backus, valamint a S. A. Waksman által meghatáro-5 zott Streptomyces hygroscopicus faj tulajdonságaival, ezek a következők: a) A spóratartók néhány csavarmenetből álló szoros spirálisokat alkotnak, ezek a spirális spóra-10 tartók rendszerint egy szál mentén csoportosulnak, és többé-kevésbé hosszú fürtöket alkotnak. b) Spórás légmicéliumuk jól fejlett állapotban sötétszürke, akárcsak a Streptomyces hygroscopicus légmicéliuma. 15 c) A légmicélium jó fejlődését biztosító egyes táptalajokon az öregedés folyamán a spórás felületeken a Streptomyces hygroscopicusra jellemző, nedves kinézésű, fekete, fényes helyek jelennek meg. 20 A Streptomyces hygroscopicus DS 24 367 esetében a légmicélium gyakran csak szűkösen keletkezik, és ez a fogyatékosság számos táptalajon mutatkozik. Amikor spórás szürke légmicélium 25 jelenik meg, az öregedésre mutató fekete helyek keletkezése, ha be is következik, csak egyes helyeken válik általánossá, a légmicélium kis pontokra vagy elszórt kis területekre korlátozódik, és nem az egész felületen terjed szét. Mégis 30 szemmelláthatóan jelen van, és különösen a Pridham-féle élesztőkivonatos agáron, zabliszt agáron és Pridham-féle paradicsomkivonatos agáron és glukóz-aszparagin-agaron figyelhető meg. 35 A Streptomyces hygroscopicusnak az S. A. Waksman idézett „The Actinomycetes" című művében leírt morfológiai jellegzetességei néhány táptalajon kisebb eltéréseket mutatnak a DS 24 367 törzstől. Ezek közül a legfeltűnőbb, hogy az a 40 szacharózos nitrátagaron és tápagaron légmicéliumot alkot, viszont a DS 24 367 törzs ezen a két táptalajon nem fejleszt ki légmicéliumot. Azonkívül szénforrásként szacharózt tartalmazó táptalajon a Streptomyces hygroscopicus a nitrátokat nem 45 redukálja, míg a DS 24 367 törzs ugyanolyan körülmények között a nitrátokat gyorsan nitritekké redukálja. Mindamellett ez a két különbség túlságosan csekély jelentőségű ahhoz, hogy a DS 24 367 törzset elkülönítsük a Streptomyces hygroscopicus 50 fajtól, amelynek legfontosabb meghatározó jellemzői azonosak a DS 24 367 törzs jellemzőivel. A Streptomyces hygroscopicus DS 24 367 spóraláncokat alkot, ezek általában kevés, 3-nál vagy 55 4-nél ritkán több tekerületből álló szoros spirálisban végződnek, bár egyes esetekben több tekerületű spirálisok is megfigyelhetők, vagy néhány spóralánc vége teljes fordulat nélkül egyszerűen visszahajlik, vagy a spirálisok többé-kevésbé lazák 60 és szétterülök. A spóratartó szerv fürtös szerkezetű, a spirális spóratartók maguk is elágazhatnak, ezek egy fő szál mentén helyezkednek el, és elég nagy hosszúságot is elérhetnek. A spórák tojásdad alakúak vagy hengeresek, méretük 55 0,8 - 1,0 JLÍ/0,6-0,8 ju. A spóratartó szerv szerke-3
