169977. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmányélesztő előállítására
3 169977 4 A feladatot a Candida guilliermondii DZIMETH-128 élesztőtörzs tenyésztésével oldottuk meg. A találmány szerinti törzs nitrogén-, foszfor-, kálium- és mangánvegyületeket, valamint nyom- 5 elemeket, vasat, cinket, mangánt és rezet tartalmazó ásványi táptalajon és az egyedül szénforrásul szolgáló nyersolajdesztillátum jelenlétében intenzív növekedésnek indul. 10 A találmány szerinti törzsnél nem szükséges a táptalajhoz növekedési stimulátorokat adagolni. Nem steril körülmények között a törzs nyersolajpárlat bázison történő folyamatos tenyésztésénél 57%-ig nyersproteint és 15%-ig lipidet tartalmazó 15 biomasszát kapunk, mimellett az olajfrakció egyidejűleg paraffinmentessé válik. A törzs 0,33 h" 1 növekedési sebesség mellett is stabilan fejlődik. A vizsgálati berendezésben meghatározott optimális növekedési sebesség 0,25 h "'. 20 Laboratóriumi körülmények között 10-20%-os nyersolaj párlatkoncentráció és 0,2-0,25 h" növekedési sebesség mellett a hozam 6 kg/t.h. Baktériumos kísérőflóra a folyamat stabilitását és aktivi- 25 tását nem befolyásolja. A tartózkodási időnek az optimumon túl történő csökkentésével az alkalmazott nyersolaj-desztillátum messzemenő paraffinmentesítését érjük el. 30 Ez történhet tetszés szerint egy fermentorban (egylépcsős eljárás) vagy több egymás után kapcsolt fermentorban. Kétlépcsős tenyésztési eljárás esetén a két fermentort egymás után kapcsoljuk. Az első fermentor- 35 ban a táptalaj 10% nyersolaj-desztillátumot tartalmaz, a második fermentorban a folyamat nyersolajdesztillátum pótlólagos beadagolása nélkül játszódik le, a reakcióidő külön-külön 5 óra. Két lépcsős tenyésztéssel a desztillátum dermedéspontja 36 C -al 40 csökken. A találmány szerinti törzs idegen mikroorganizmusokkal szemben ellenálló és lehetővé teszi a táptalaj maximális visszavezetése mellett (80-90%) a hosszabb ideig tartó tenyésztést. 45 A találmány szerinti törzs az alábbi tulajdonságokkal jellemezhető: Sejtmorfológia 50 Sörlé szubmerz tenyészetében a tenyészet 24 óra elmúltával főként kerek alakútól az oválisig, ritkábban hosszúkás alakú sejtekből áll. A normál sejtek mérete 2-5 mp x 3-6 mju, a hosszúkás sej- 55 tek mérete 3-4 m/i x 7-13 m/x. 24 órás tenyésztési idő elteltével pszeudo-micéliumképződés nem figyelhető meg, 48 órás tenyésztési idő elteltével mint a pszeudo-micéliumképződés előde gyakran hosszúkás sejtek jelennek meg. A sörlé tenyészet- 60 ben az edény falán többé-kevésbé zárt gyűrű keletkezik, azonkívül világos, sűrű üledék képződik. Burgonya-agar esetén a pszeudomicélium sztalagmit alakú sejtek láncaiból áll, amelyek blasztofórok és rövid láncokká és gyűrűkké rendeződnek. 65 Kolónia morfológia A C. g. D. ZIMET H-128 törzs kukorica-agaror konvex, kör alakú lapos, fényes, fehér színűtől krémszínű csoportokat képez. A kolónia széle sírna, és finom szálacskákból álló tartomány veszi körül. Fiziológiai-biokémiai jellemzők: A glükózokat és szaccharozókat erjesztik, a galaktózokat és maltózokat egyáltalán nem vagy csak kevéssé a laktózokat szintén nem erjesztik. A glükózok, galaktózok, szaccharózok és maitózok asszimilálható cukrok, míg a laktóz nem asszimilálható. A törzs nitrátot nem asszimilál, a zselatint nem folyósítja el. A C.g.D ZIMET H-128 törzs az egyedül szénforrásul szolgáló szénhidrogéneket tartalmazó ásványi táptalajon növekedésstimuláló anyagok beadagolása nélkül is szaporodik. Szubsztrátumként szénhidrogének széles spektrumát alkalmazhatjuk, előnyösen C9 -C 25 lánchossztartományhoz tartozó n-alkánokat. Az optimális tenyésztési hőmérséklet 32-34 C°, a pH-érték optimuma 4,0-5,5 között van. A C.g.D. ZIMET H-128 törzs nem patogén. A törzs a folyamat technológiai paramétereinek változtatásával szemben ellenálló, így a hőmérséklettel (38 C -ig), a táptalaj pH-tartományával (rövid ideig pH 2-pH 8-ig) a sókoncentrációval (hosszú ideig 5%-ig) szemben. A Candida guilliermondii D ZIMET H-128 törzset a Diesel-olajon aktívan növő Candida guilliermondii faj törzskeverékeiből szelektáltuk és a Lodder és Kreger van Rij-féle módszer segítségével azonosítottuk Az alábbiakban felsorolt példák a Candida guilliermondii D ZIMET H-128 törzs tenyésztésénél alkalmazható technológiai körülmények lehetséges eljárásváltozatait nem korlátozzák. Az eljárást folyamatosan vagy szakaszosan, egyvagy kétlépcsőben, különböző n-alkántartalmú olajnyersanyagon is kivitelezhetjük. A találmány szerint tehát úgy járunk el takarmányélesztő és paraffinmentes Diesel-olaj előállítására, hogy a Candida gulliermondii D ZIMET H—128 élesztőtörzset aerob körülmények között szénforrásként 10—20% nyersolajdesztillátumot tartalmazó vizes táptalajon 32-34 C -on és 4,0-5,5 közötti pH-értéken tenyésztjük. 1. példa 30 liter űrtartalmú szokásos fermentorban a Candida guilliermondii D ZIMET H-128 élesztőtörzset 32-34 C -on, pH 4,2 értéken 3 liter/min. levegőadagolási sebesség mellett tenyésztjük. Szubsztrátumként stavropoli nyersolaj-desztillátumot alkalmazunk. A frakció forrponttártománya 240 C° és 360 C° között van, 38%-ban karbamiddal addukttermékeket képző szénhidrogéneket tartalmaz, és dermedéspontja +6 C . 2
