169959. lajstromszámú szabadalom • Tesztlap szervek normális vagy kóros működésének meghatározására

15 169959 16 összehasonlító kontrollok számára kellő helyet hagyunk. A teszt-lapra megfelelő ragasztó-anyaggal felerősítjük a színösszehasonlító kontroli-lemezeket. A kontroli-lemezek körülbelül 6,2 mm átmérőjűek, színük a normális, magas és alacsony funkciónak 5 megfelelő színeket mutatja. A használat során minden lemezre felviszünk egy csepp vizsgálandó szérumot. Egy csepp szérum adagolására az (1) teszt-lemez vörös színt, a (2) teszt-lemez lilás-vörös színt, a (3) teszt-lemez vörös 1° színt és a (4) teszt-lemez vörös-barna színt mutat. A keletkezett szín intenzitása az (1) és (2) folton az LDH mennyiségével, a (3) teszten a CPK-val, a (4) teszten az SGOT mennyiségével arányos. Ezután minden egyes teszt-folt színinten- I5 zitását a színösszehasonlító kontroli-lemezek színé­vel hasonlítjuk össze. Ily módon megállapítjuk, hogy a vizsgálandó szérum LDH, CPK és SGOT koncentrációja normális, alacsony vagy magas ér­téket mutat-e. Az eredményből a szív működésére 20 és állapotára következtethetünk. Amennyiben a tesztek eredménye igen magas vagy nagyon ala­csony, úgy célszerű a vizsgálatot megismételni. ,f< Az (1) és (2) tesztek esetében a szérum hozzá- 25 cseppentésekor a szérumban levő laktát-dehidro­genáz redukálja a teszten levő tetrazólium-sót, ily módon vörös elszíneződés lép fel. A (3) teszt esetében a szérumban levő kreatin-foszfokináz a teszt-indikátorral reagál, és vörös színű folt kelet- 30 kezik. A (4) tesztnél a szérumban levő glutamin­sav-oxálecetsav-transzamináz reakcióba lép a szín­indikátorral és a diazóniumsóval reagálva elszíne­ződés lép fel. A (4) tesztnél a szín vöröses-barnától barnássárgáig változik. A vöröses-barna szín a 35 vizsált szérum magas glutaminsav-oxálecetsav-transz­amináz tartalomra utal. A barnás-sárga szín. nor­mális szérum glutaminsav-oxálecetsav-transzamináz tartalomra utal. 2. példa Májműködés vizsgálatára szolgáló teszt-lap A máj működés ellenőrzésére három folt-tesztet tartalmazó teszt-lapot készítünk. A tesztek a szé­rum glutaminsav-oxálecetsav-transzamináz, bilirubin és alkáli-foszfatáz tartalmát mutatják ki. (1) A szérum glutaminsav-oxálecetsav­-transzamináz tartalmának kimutatására szolgáló teszt, és a hozzá való nedvszívó hordozó A reagens rendszer és az impregnált nedvszívó hordozó anyagok előállítása az 1. példa 4. pont­jában kerül ismertetésre. (2) Alkáli-foszfatáz teszt és a hozzá szükséges nedvszívó hordozó A reagens rendszer és az impregnált nedvszívó hordozó anyagok előállítása röviden a követ­kezőkben kerül ismertetésre. Az alkáli-foszfatáz-teszt két nedvszívó anyagot tartalmaz, az egyik naftil-foszfáttal vagy monofenil­-foszfáttal impregnált maradékból, a másik diazó­nium-sóval impregnált maradékból áll. a) Foszfát nedvszívó réteg előállítása Whatman 3. számú papírt 0,01 n sósav-oldattal néhány percen keresztül előkezelünk, majd mossuk és szárítjuk. A keletkezett papírcsíkot ezután olyan nátrium-karbonát puffer 1,0 mólos oldatával telít­jük, amely 1,0% naftil-foszfátot, 0,1% kereskede­lemben kapható nedvesítőszert (polioxietilén-lauril­éter) és 0,3 mikronról magnéziumklorid aktivátort tartalmaz. Az oldat végső pH-ját 0,5 n nátrium­hidroxiddal 12,0-re állítjuk be. A papírokat ebben az oldatban 5 percig áztatjuk. A keletkezett csíkot leszívatjuk és a felesleges folyadék eltávolítása után áramló meleg levegő segítségével megszárítjuk (30 C°). B) A diazónium nedvszívó réteg előállítása A fentiek szerint előmosott Whatman 3. számú papírcsíkot olyan oldattal telítjük, amely 1,0% dia­zónium-sót, 3-metoxi-4-benzamido-6-.metiloxidiazó­nium-trifluorborátot, 0,1% a fentivel megegyező nedvesítőszert, 3,0% karbamidot és 3,0%- oldható keményítőt tartalmaz. Ezen oldat végső pH értékét sósavval 4,5-re állítjuk. A keményítő szuszpenzióját forraljuk, majd lehűtjük, mielőtt a többi kompo­nenst az oldathoz adjuk. A papír-csíkot ebben az oldatban 5 percig áztatjuk, majd sötétben vákuum­ban megszárítjuk. C) A csík-komponensek ragasztása A fentiek szerint elkészített foszfát-csíkokat elő­ször 5 mm vastag .cellulóz-acetát réteggel bevonjuk. A cellulóz-acetátot 10%,-os etilacetát-oldat formá­jában visszük fel. Az oldat 0,1% fent említett nedvesítőszert tartalmaz. A kapott csíkot száradni hagyjuk, majd még egy réteget viszünk fel rá. A még nem száraz, ragadós papírt a fentiek szerint előállított diazónium-csíkra préseljük, és a két csí­kot két sima fémlemez közé tesszük. A papírcsí­kokat 15 percig kis nyomással összepréseljük. A keletkezett összeragasztott csíkot kivesszük a fém­lemezek közül és sötétben áramló levegő hatásának tesszük ki. Ily módon az oldószer utolsó nyomait is eltávolítjuk. (3) Bilirubin-teszt és a hozzá szükséges hordozó anyag 3%-os keményítő-oldatot készítünk úgy, hogy folytonos keverés közben lassan 3g keményítőt adunk 100 ml forró vízhez. Ezt az oldatot szoba­hőmérsékletre hűtjük és a következő komponen­seket adjuk hozzá a megadott sorrendben: ll,0g maleinsav, 0,2 ml 10%-os poli-oxietilén (23)-lauril­éter oldat és 0,5 g p-nitrobenzol-diazónium-fluor­borát (NBF). A teszt-papírokat úgy készítjük, hogy Whatman 3. vagy Whatman 42. számú papírcsíko-8

Next

/
Thumbnails
Contents