169882. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására
15 169882 16 c) Gardimicin-kalciumsó: 0,3 g gardimkin-mononátriumsót 250 ml vízben oldunk és a kapott oldathoz lassan, kevertetés közben több részletben telített kalciumklorid-oldatot adagolunk, amíg a teljes kicsapást elérjük.- A kapott sót szűrjük, 5 vákuumban szárítjuk és 10 ml acetonban oldjuk. 200 ml dietiléterbe való öntés után csapadék képződik, amelyet szűrünk és vákuumban. 40-45 C°-on szárítunk. 0,2 g terméket kapunk, amely 330-340 C°-on bomlik. 10 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás antibiotikus aktivitású, három egymástól elkülöníthető, A metabolitnak, gardimicinnek és is C metabolitnak nevezett frakcióból álló anyag, az egyes frakciók, illetve azok bázisokkal alkotott sóinak előállítására, azzal jellemezve, hogy az Actinoplanes A/10889 (ATCC 31049) vagy Actinoplanes A/6353 (ATCC 31048) törzset aerob körül- 20 menyek között vizes táptalajban tenyésztünk, -amely egy asszimilálható szénforrást, asszimilálható nitrogénfonást és szervetlen sókat tartalmaz-, majd a keletkezett antibiotikus aktivitású anyagot abból kinyerjük, és kívánt esetben a 25 három frakcióra szétválasztjuk, és kívánt esetben bázissal alkotott sójává alakítjuk, illetve egy keletkezett sóból a savat felszabadítjuk. (Elsőbbsége: 1975. július 25.) 2. Eljárás antibiotikus aktivitású, három egymás- 30 tói elkülöníthető, A metabolitnak, gardimicinnek és C metabolitnak nevezett frakcióból álló anyag, az egyes frakciók és a gardimicin mononátriumsó előállítására, azzal jellemezve, hogy az Actinoplanes A/10889 (ATCC 31049) vagy Actinoplanes A/6353 35 (ATCC 31048) törzset aerob körülmények között vizes táptalajban tenyésztünk —amely egy asszimilálható szénfonást, asszimilálható nitrogénfonást és szervetlen sókat tartalmaz -, majd a keletkezett antibiotikus aktivitású anyagot abból kinyerjük, és 40 kívánt esetben a három frakcióra szétválasztjuk, mimellett a gardimicint mononátriumsó alakjában nyerjük ki. (Elsőbbsége: 1974. július 27.) 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatoátási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentációt 25 és 45 35 C° közötti hőmérsékleten hatjuk végre. (Elsőbbsége: 1974. július 27.) 4. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatoátási módja, azzal jellemezve, hogy a fermentációt 96-170 óra időtartamon át .folytatjuk. (Elsőbbsége: 50 1974. július 27.) 5. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatoátási módja, azzal jellemezve, - hogy az antibiotikus aktivitású anyagot egy 3-6 szénatomos alkanollal végzett extrakcióval nyerjük ki a fermentléből. 55 (Elsőbbsége: 1974. július 27.) 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatoátási módja, azzal jellemezve, hogy 3-6 szénatomos alkanoDcént butanolt alkalmazunk. (Elsőbbsége: 1974. július 27.) 60 7. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatoátási módja, azzal jellemezve, hogy az antibiotikus aktivitású anyagot ellenáramú extrakcióval és kristályosítással választjuk szét a három frakcióra. (Elsőbbsége: 1974. július 27.) 65 8. Az 1. igénypont szerinti e^árás foganatoátási módja, a gardimicin antibiotikum mononátríumaójának — amelynek 1. olvadáspontja: 260 C° (bomlás közben), 2. molekulasúlya: 2005-2168, 3. elemösszetétele: C 48,7-48,6%, H 6,7-6,6%, N 11,8-12,2%, S 5,3-5,5%, Na 1,1%, Ha 0 3,6-3,3%. 4. amely az egyes alábbi oldórendszerekben az l.ábra szerint a következő UV-abszorpciós sávokat mutatja: oldószer Xm.x < m * x > Ei% E i cm metanol 273 (váll) 280 299 26 24 0,1 N NaOH 273 (váll) 279 288 26 22 0,1 N HCl 273 (váll) 279 288 26 22 pH 7,38 foszfátpuffer 273 (váll) 279 288 24 20 5. amelynek IV spektrumában a 2. ábra szerint a következő frekvenciákon (cm"!) figyelhetők meg jellegzetes abszorpciós sávok: 3280, 2920-2840 (nujol), 1650, 1520, 1455 (nujol), 1375 (nujol), 1260, 1045, 990, 720, 6. amelynek fajlagos forgatóképessége: [a]= -44° (c = 0,5%, dimetilformamidban), 7. amely vízben, vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban, híg vizes alkálihidroxid-oldatokban, fonó metanolban, dimetilformamidban, dimetilszulfoxidban, jégecetben oldható, lúg ásványi savakban, benzolban, acetonban, kbroformban, CCU-ban, 2-6 szénatomos alifás aDcanolokban, tetrahidrofuránban oldhatatlan, 8. amely pozitív Fehling-, Tollens-, káliumpermanganát- és tömény kénsav-reakciót, negatív ninhidrin-, vas(III)-klorid-, Miliőn-, Schiff- és maltol-reakciót mutat, 9. amelyben potenciometrikusan egy pK8 = 7,l (víz) és egy pKa = 8,5 értékű ionizálható csoport (metilcelloszolv : víz = 16 :4) mutatható ki, 10. amelynek izoelektromos pontja 4,2, elektrofókuszálással mérve, 11. amely Whatman No. 1 papíron, mikrobiológiai előhívással, Staphylococcus aureu-szal végzett kromatográfiás vizsgálat során 1. M/15 pH 6,0 foszfátpufenel telített butanol rendszerben 0,15, 2. 2% p-toluolszulfonsavat tartalmazó vízzel telített butanol rendszerben 0,80, 3. 2% NHtQH-t tartalmazó vízzel telített butanol rendszerben. 0,10, 8
