169882. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására
3 169882 4 például többszöri ellenáramú extrakcióval egy meghatározott oldószerrendszerben, amelyben a két antibiotikum megoszlási együtthatója különböző. E lépés során a B metabolitot mononátriumsó alakjában nyerjük ki, amely szokásos műveletekkel 5 a megfelelő szabad savvá vagy alkáli- vagy alkáliföldfémekkel más sókká alakitható. A butanolos extrakcióból származó anyalúgokat egy közömbös nem-poláris szerves oldószerbe, pél- 10 dáül könnyű benzinbe öntjük: így további csapadék képződik. A fenti módon végzett kromatográfiás vizsgálatok és a mikrobiológiai előhívás arra mutat, hogy a kapott szilárd anyag lényegében egyetlen termékből 15 áll, amely az A és B metabolittól különbözik, ugyanis R, értéke ugyanabban az eluáló rendszerben eltérő. Azonosítási célokra ezt C metabolitnak neveztük el. Az A, B és C metabolit kromatográfiás jellemzőit a következőkben mutatjuk be. 20 Az A metabolit, a B metabolit (ez utóbbit a következőkben gardimicinnek fogjuk nevezni), valamint ennek alkáli- és alkáliföldfémsói és a C metabolit in vitro és in vivo jó antibakteriális 25 aktivitást mutat. Közelebbről a gardimicin kiváló in vitro antimíkrobiális hatást mutat különösen Gram-pozitív baktériumokkal szemben l-50jug/ml közötti koncentrációban, amint ez a következő táblázatból 30 kitűnik. Ebben a különböző patogén mikroorganizmusok növekedését gátló minimális antibiotikum-koncentrációkat adjuk meg. 2. táblázat 35 1. táblázat Törzs Minimális gátló koncentráció Oug/ml) 40 Staphylococcus aureus ATCC 538 Micrococcus flavus ATCC 10240 Streptococcus faecalis ATCC 10541 Streptococcus haemolyticus C 203 Diplococcus pneumoniae UC 41 Clostridium perfringens ISS 30543 Neisseria gonorrheae ATCC 9826 50 50 50 45 50 55 60 20 A gardimicin antibiotikum egy másik előnyös tulajdonsága hogy aktiv, klinikailag izolált Streptococcus törzsekkel szemben. 65 Törzs Minimális gátló koncentráció (jug/ml) Streptococcus haemolyticus 2078 1 Streptococcus haemolyticus 2087 1 Streptococcus viridans 2057 5 Streptococcus viridans 2085 2 Továbbá mint fentebb erre rámutattunk, a gardimicin nagyon érdekes in vivo aktivitást mutat kísérleti fertőzések ellen egérben, amelyeket a Diplecoccus és a Streptococcus genusba tartozó patogén baktériumok váltanak ki. Az alábbi táblázat a gardimicin ED50 értékeit mutatja be Streptococcus haemolyticus C 203 és Diplococcus pneumoniae UC 41 által előidézett kísérleti fertőzésekkel szemben. 3. táblázat Törzs EDso, mg/kg Streptococcus haemolyticus C 203 0,75 Diplococcus pneumoniae UC 41 30 Ezek az előnyös antibiotikus tulajdonságok nagyon alacsony toxicitással párosulnak, ugyanis a gardimicin antibiotikum LD50 értéke nagyobb, mint 1000 mg/kg i.p. és körülbelül 2000 mg/kg i.v. A termelő törzsek leírása. Az 1/6353 törzs leírása. A törzs többféle agar-táptalajon jó növekedést mutat. Zabliszt-agáron a körülbelül 5 mm átmérőjű telepek rovátkolt szélűek,. sugárirányban enyhén barázdáltak és közepük besüppedt. Légmicélium egyik esetben sincs jelen. Zabliszt-agáron, glicerin-aszparagin-agaron és Czapek-glukóz-agáron bőséges spóraképződés tapasztalható, a spórák alakja és nagysága különböző a táptalaj függvényében. Zabliszt-agáron kerületük szabályos és alakjuk gömb-ovális között váltakozik. A sporangiumok nagysága 15—25 /u. A spórák mozgékonyak, gömb alakúak, átmérőjük 1,5—2 (i. Több táptalajban sárgás-borostyánszínű oldható pigment képződik. Az Actinoplanes A/10889 leírása. A törzs különböző táp-agarokon jól nő. A felület opak és rendszerint érdes-redős. A légmicélium rendszerint hiányzik, azonban ugyanabban a közegben légmicélium-kezdemények is megfigyelhetők. A mikroszkópos vizsgálat során a légmicélium enyhén elágazó, körülbelül 1 n átmérőjű. 2
