169712. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nyers urogastron három komponensre történő frakcionálására

169712 11 12 visszük fel, az oszlopot 5,0 pH-értékű puff érrel 0,01—0,5 mól koncentrációgradiens szerint eluáljuk és a biológiai aktivitást mutató eluált anyagokat egyesítjük és liofilizáljuk; (2) az (1) lépés szerint nyert biológiailag aktív 5 anyagot porózus poliakrilamid-gél oszlopra visszük fel - mely gél az 5000-nél nagyobb molekulasúlyú molekulákat nem engedi át, azonban az 5000-nél kisebb molekulasúlyú molekulákat belsejébe beengedi - 0,05 mólos, 7,2 pH-jú, illékony komponensekből 10 álló vizes pufferoldatban, az oszlopot ugyanezzel az oldattal eluáljuk és a biológiai aktivitást mutató eluált anyagokat egyesítjük és liofilizáljuk; (3) a (2) lépés szerint nyert biológiailag aktív anyagot 0,01 mólos, pH = 5,5 értékű, illékony 15 komponensekből álló vizes pufferrel egyensúlyba hozott amino-etil-cellulóz-oszlopra felvisszük, az oszlopot előbb a fenti molaritású, majd 0,01-0,3 mól koncentrációgradiensű pufferrel eluáljuk, az oszlopról nyert egyes frakciók biológiai meghatározásával bioló- 20 giailag aktív eluált anyagra utaló három csúcs jelenlétét mutatjuk ki és az a-urogastront, /3-urogastront illetve 7-urogastront tartalmazó frakciókat külön egyesítjük és liofilizáljuk, majd — a (3) lépésnél kapott, 0-urogastron tartalmú 25 anyag esetében — az anyagot 0,01 mólos, 5,0 pH-értékű vizes pufferrel egyensúlyba hozott karboximetil-cellulóz-oszlopra visszük fel, az oszlopot 5,0 pH-értékű, 0,01-0,5 mól koncentrációgradiensű pufferrel eluáljuk, a biológiai aktivitást mutató eluált 30 anyagokat egyesítjük és liofilizáljuk, ezt az anyagot porózus poliakrilamid-gélből álló oszlopra — mely gél az 5000-nél nagyobb molekulasúlyú molekulákat nem engedi át, azonban az 5000-nél kisebb molekulasúlyú molekulákat belsejébe beengedi - visszük fel 0,05 35 mólos, 7,2 pH-értékű, illékony komponensekből álló vizes pufferben, az oszlopot a fenti oldattal eluáljuk és a biológiai aktivitást mutató eluált anyagokat egyesítjük és liofilizáljuk; vagy a (3) lépésnél kapott, a 7-urogastron tartalmú anyag esetében ezt az anyagot 0,01 mólos, 4,8 pH-értékű vizes pufferrel egyensúlyba hozott karboxi-metil-celrulóz-oszlopra visszük fel, az oszlopot 4,8 pH-értékű, 0,01—0,5 mól koncentrációgradiensű pufferrel eluáljuk, a biológiai aktivitást mutató eluált anyagot egyesítjük és liofilizáljuk, ezt az anyagot porózus poliakrilamid-gél-oszlopra - mely gél az 5000-nél nagyobb molekulasúlyú molekulákat nem engedi át, azonban az 5000-nél kisebb molekulasúlyú molekulákat belsejébe beengedi — visszük fel 0,05 mólos, 7,2 pH-értékű, illékony komponensekből álló vizes pufferben, az oszlopot a fenti oldattal eluáljuk és a biológiai aktivitást mutató anyagokat egyesítjük és liofilizáljuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a karboxi-metil-cellulózoszlopokon nátrium-acetát és ecetsav elegyéből álló pufferoldatot, az amino-etil-cellulóz-oszlopokon ammónium-acetát és ecetsav elegyből álló pufferoldatot és a porózus poliakrilamid-gélből álló oszlopokon - mely gél az 5000-nél nagyobb molekulasúlyú molekulákat nem engedi át, azonban az 5000-nél kisebb molekulasúlyú molekulákat belsejébe beengedi — ammónium-acetát pufferoldatokat alkalmazunk. 3. példa Az 1—2. igénypontok bármelyike szerinti eljárás továbbfejlesztése savas gyomornedv-kiválasztást gátló gyógyászati készítmény előállítására azzal jellemezve, hogy hatóanyagként a-, ß- vagy 7-urogastront iners, nem-toxikus, szilárd vagy folyékony, az ilyen készítményekben használatos gyógyászati hordozóanyagokkal összekeverünk és ismert módon gyógyszerkészítménnyé alakítunk. A kiadáséit felelős: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 77-1290 - Dabasi Nyomda, Budapest - Dabas Felelős vezető: Földes Gyöigy igazgató