169501. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Nalfa-amino-védőcsoportok szelektív hasítására peptidek szintézisénél

5 169501 6 csoport esetén 0 és 2 közötti) olyan peptidszintéziseknél is előnyösen alkalmazhatjuk, ha ennek a kétféle amino-védőcsoportnak csak egyikéről van szó, mivel ez a lehasítás nagyon egyszerű és mindenekelőtt nagyon kíméletes, és a szokásos amino-, hidroxil-, karboxil-, merkapto és imino-védőcsoportokat nem támadja meg. így az N-tritil- vagy N-aralkiloxi-karbonilcsoportot 2,2,2-trifiuor-etanolban a nevezett pH-nál szelektíven lehasíthatjuk a következő csoportok mellől: terc-butil típusú csoportok, mint például a Boc, a terc-butiléter, tere-butilészter és a hasonló savasán hasítható csoportok, például a terc-amiloxi-karbonil-, adamantiloxi-karbonil-, ciklopentiloxi- karbonücsoport és megfelelő éterek és észterek, vagy a reduktív és bázikusan hasítható csoportok, mint a nitro-, halogén-, rövidszénláncú alkoxi- vagy fenil-azocsoporttal szubsztituált benziloxikarbonilcsoport, és a megfelelő éterek és észterek, mint a benziléterek- vagy észterek, vagy a 2,2,2-triklór-etiloxi-karbonil- vagy N-acilcsoportok, mint a formil-, trifluor-acetil-, ftaloil-, benzol-szulfonil-, p-toluol-szulfonilcsoport, vagy észtercsoportok, mint a metil-, etil-, benzoil-metilészter, fenil- és szubsztituált fenilészterek, mint a triklór-fenü-, p-nitrofenil-, pentaklór-fenil-, N-hidroxil-szukcinimid-, N-hidroxil-ftálimid- vagy N-hidroxil-piperidin-észter, vagy az ismert merkapto-védőcsoportok mellől, mint a tritil-, benzil:, p-nitrobenzü-, benzhidril-, dimetoxi-benzhidril-, fenil-ciklohexilészterek és hasonlóak [Ber. 101. 681, (1968)], acil-aminometil-, például acetil-amino-metil-csoport és hasonlók (2060 969 számú NSzK-beli nyilvánosságrahozatali irat), alkoxi-karbonil-szulfenil-, például metoxi-karbonil-szulfenil-csoport és hasonlók (2231 775 számú NSzK-beli nyilvánosságrahozatali irat), rövidszénláncú alkiltio-, például terc-butiltiocsoport, tiometil-, mint például terc-butil-tiometil-, benzil-tiometil-csoport, vagy imino-védőcsoportok, mint benzil-, tritil-, karbobenzoxi-, adamantiloxi-karbonil-, 2,2,2-trifluor-l-terc-butiloxi-karbonil-aminoetil-, vagy 2,2,2-trifluor-1-benziloxi-karbonil-aminoetilcsoport. A fenti eljárás kiindulási anyagai - peptidek, peptid-származékok, amelyekben egy aminocsoport tritilcsoporttal és egy vagy több más aminocsoport Bpoc-csoporttal védett — ismertek vagy önmagában ismert módszerekkel előállíthatók. Á szintetizálandó peptidek vagy peptid-származékok fajtái a találmány szerinti eljárásban nem játszanak szerepet. Peptidek alatt elsősorban olyan természetben előforduló peptideket értünk, mint amelyeket például Schröder és Lübke „The Peptides" című munkájukban írtak le, (Academic Press, New York, and London I. és II. kötet, 1965—66. oldal), és ilyen peptidek szintetikus analógjait is értjük, amelyek ezektől abban különböznek, hogy bennük egy vagy több aminosav más aminosavra van kicserélve. Továbbá peptidek alatt az említett természetes, vagy szintetikus peptidek parciális szekvenciáját is értjük. Az aminosavak, amelyek a nevezett peptideket felépítik, elsősorban a 20 alap-aminosav, v.o. például Sei. American, I960, október, 55 oldal, és homológjaik, ezek strukturális és optikai izomerjei lehetnek, például a legalább 7 szénatomos amino•(rövidszénláncú)-aíkánsavak, amelyek az alap aminosavaktól különböznek, mint például az a-amino-vajsav, a norvalin, (3-alanin 7-amino-vajsav, aj3-diamino-propionsav, továbbá például a hidroxi-prolin, normetionin, fenil-glicin, ornitin, citrullin-, o-metil-5 -tirozin, N-metií-tirozin és más N-(rövidszénláncú)-alkil-aminosavak, továbbá á racém és D-amino-savak. A peptidek származékai, amelyek az eljárás kiindulási anyagaként vagy végtermékeként tekintetbe 10 jönnek, mindenekelőtt funkcionális származékok, mint például az észterek és amidok, továbbá a védőcsoporttal ellátott peptidek lehetnek. Észterekként elsősorban azokat említjük meg, amelyek a peptid-szintézis alkalmas köztitermékei, például a 15 rövidszénláncú alkilészterek, halogénatommal szubsztituált rövidszénláncú alkilészterek, például metilészter, etilészter, terc-butilészter, terc-amilészter, 2,2,2-triklór-etilészter, 2-jód-etilészter, 2-klór-etilészter, továbbá az aril- és aril-(rövidszénláncú)-20 -alkilészterek, mint adott esetben a rövidszénláncú alkil-, rövidszénláncú alkoxi-, halogén-, trifluormetil-, vagy nitrocsoporttal szubsztituált fenil-, vagy fenü-(rövidszénláncú)-alkilészterek, például a p-nitro-fenilészter, 2,4-dinitro-fenilészter, 2,4,6-tri-25 nitro-fenilészter, 2,4,5- vagy 2,4',6-triklór-fenilészter, pentaklór-fenilészter, benzüészter, p-nitro-benzilészter, p-metoxi-benzilészter, továbbá az N-hidroxilszukcinimidészter, N-hidroxil-, ftálimidészter. Az amidok mindenekelőtt N-szubsztituált és N-mono-30 -(rövidszénláncú)-alkil- és di-(rövidszénláncú)-alkilcsoporttal szubsztituált amidok lehetnek. A következő példák a találmány szerinti eljárást mutatják be. A hőmérsékletet Celsius fokokban adjuk meg. 35 A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatokat mindig szüikagélen végeztük, a következő rendszereket alkalmazva: 43-as rendszer: terc-amilalkohol-izopropanol-víz 40 (51 :21 :28) 45-ös rendszer: szek-butanol-3%-os vizes ammónia oldat (70—30) 52-es rendszer: n-butanol-jégecet-víz (75 :7,5 : 21) 45 87-es rendszer: izopropanol-hangyasav-víz (77:4:19) 100-as rendszer: etilacetát-piridin-jégecet-víz (62:21:6:11) 50 A következő rövidítéseket alkalmazzuk: Boc = terc-butiloxi-karbonil-csoport Z = benziloxikarbonil-csoport Trt = tritil-csoport But = terc-butil-csoport Bpoc = 2-(p-bifenilil)-2-izopropüoxi-karbonil-csoport DCC1 = diciklo-hexil-karbodiimid-csoport HoBt = N-hidroxi-benzotriazol-csoport DMF = dimetil-formamid-csoport OSu = N-hidroxü-szukcinimid-csoport ONp = p-nitro-fenilészter-csoport OPcp = pentaklór-fenilészter-csoport OMe = metilészter-csopott Et3

N = trietilamin. 3