169449. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-(D-2-amino-2-fenil- acetamido)- 3-metil-3-cefem-4-karbonsav előállítására
3 169449 4 számú belga szabadalmi leírás (Farmdoc 48,556T), és a 2 096 117 számú francia szabadalmi leírás. A „transzacilálás" alkalmazását cefalosporinok esetében később fedezték fel, ezt a funkciós csoportok nehezítik, csak egy (a mai napig) fermentációval előállított vegyületen, azaz a cefalosporin C-n végzik. A Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. közölte a 748 587 számú belga szabadalmi leírásban (Farmdoc 34 689S) a „transzacilálás" alkalmazását néhány 3-tiolált cefalosporin C-származék esetében, a 3 575 970, 3 697 515, 3 573 295 és 3.573 296 számú Amerikai Egyesült Államok-béli szabadalmi leírásokban leírt általános típusú klórimideket és iminoétereket használva. A 7-fenox-i-acetamido-3-metilcef-3-ém-4-karbonsav néhány különleges észteréből a fenti reakcióval cefalexin előállításának találmányát a 2 096 117 számú francia szabadalmi leírás (Farmdoc 80 093S, és 768 306 számú belga szabadalmi leírás) írja le. « Jelen találmány tárgya eljárás az antibakteriális hatású cefalexin előállítására, amely a következő lépésekből áll: 1. a metoximetil-3-metil-7-|3-fenoxiacetamido-cef-3-ém-4-karboxilátot vízmentes, inert, vízzel nem elegyedő oldószerben (előnyösen metilénkloridban, diklóretánban, kloroformban, tetraklóretánban, nitrometánban vagy dietiléterben) savmegkötőszer jelenlétében (pl. dezaktivált tercier amin, előnyösen trietilamin, trimetilamin, dimetilanilin, kinolin, lutidin vagy piridin) -10 és -60 C közötti hőmérsékleten valamely ekvimoláris mennyiségű halogénezőszerrel (előnyösen foszforpentakloriddal, foszforpentabromiddal, foszfortrikloriddal, foszfortribromiddal, oxalilkloriddal, p-toluolszulfonsav-haloiddal vagy foszgénnel) reagáltatunk. 2. A reakcióelegyet valamely, legfeljebb 7 szénatomszámú alifás alkohollal (előnyösen metanollal) keverjük össze, miközben a hőmérsékletet -20 és -70 C° között (előnyösen.-30 C° alatt) tartjuk. 3. Végül a reakcióelegyet (előnyösen részletekben) ekvimoláris mennyiségű D-(-)-2-fenilglicil-klorid-hidrokloriddal keverjük össze, -30 C alatti hőmérsékleten és 4. a reakcióelegyet vízzel és ásványi savval (előnyösen kénsawal vagy sósavval, és előnyösen 10 C alatti hőmérsékleten) keverve a fent nevezett cefalexint állítjuk elő savas, vizes fázisban. A találmány tárgya eljárás cefalexin előállítására megfelelő szintetikus úton 3-dezacetoxicefalosporin V-ből, amelyet a penicillin V-metoximetilészter-szulfoxidból, gyűrű nyitással (a lentiek szerint) vagy közvetlenül 3-dezacetoxicefalosporin V-savból és klórmetil-metil-éterből (a lentiek szerint) állítunk elő. Ezt az észtert ismert módszer szerint az oldallánc nyitása útján 7-amino-3-dezacetoxicefalosporánsawá (7-ADCA) is átalakíthatjuk. Az új eljárásunk szerint a 7-ADCA előállítása nem szükséges, és lehetővé teszi feltétlenül vízmentes körülmények között jó termeléssel az oldallánc acil-csoportjának közvetlen kicserélését. Továbbá az eljárást előnyösen egy és ugyanazon reakcióedényben lehet kivitelezni. Megjegyezzük, hogy a továbbiakban a leírás „PVSOMME", a Pen-V-sulfoxidmetilésztert, azaz a me t o x i m etil-6-fenoxiacetamido-penicillinát-szulfoxidot jelenti. A „DACVMME" rövidítés a dezacetoxicef-V-metoximetilésztert, azaz metoximetil-7-ß-fenoxiacetamido-3-metil-cef-3-em-4-karboxilátot jelent. ,,R"-fenil-csoportot jelent. Az infravörös színkép adatokat Beckmann IR9 fotométeren mértük. Az NMR spektrumokat Perkin Elmer R12-B készüléken vettük fel, 60 MHz-en 40 C hőmérsékleten. Az NMR adatokat tetrametilszilánra vonatkoztatott egységekben adjuk meg. Az U.V. adatokat Beckmann Acta 3 készüléken mértük. A megadott forgatási értékeket 25 C°-on Perkin Elmer PE141 automata polariméteren mértük. Az SH jelölés az UV görbén levő váll-nak felel meg. A biológiai értékmérés turbiditás-méréssel, Staphylococcus aureus 209P segítségével történt. A metoximetil észtert (1) foszforpentakloriddal metilénklorid oldatban -20C°-on N,N-dimetilanilin jelenlétében reagáltatva imidoil-klorid (2) keletkezik. Ez az intermedier kellően stabil, így a reakció végbemenetelét könnyen követhetjük vékonyrétegkromatográfiával. A fenti reakciósorral azonos módon, D5 -piridin jelenlétében foszforpentakloridot használva deuterokloroformos oldatban 25 C -on, ez az intermedier teljes mértékben jellemezhető NMR (mag mágneses rezonancia) technikával. A klórozási reakciókeverék NMR spektruma deuterokloroformban 1 óra múlva azt mutatja, hogy 5 5 és 5 6,3 ppm. közötti hatos multiplett (j3-laktám, C6 C 7 hidrogénatomok, amelyek az amid NH-hoz kapcsolódnak), amely kezdetben jelen volt az észterben, jól feloldott AB dublett párrá alakul (J = 4,5 Hz), amely a klórimidre jellemző. Továbbá a PhOCH2 jelének 8 4,70 ppm-ről 5 4,80 ppm-re való eltolódása az amid karbonil-csoport oxigénjének klórra történő szubsztitúcióját indikálja. Ezek az adatok világosan mutatják az amid NFf jel hiányát, amelyet általában elfed a 5 7,0 ppm-nél levő aromás tartomány centruma. Végül, az aromás tartomány integrálása azt mutatja, hogy a C6 H 5 0 csoporthoz csak négy. proton tartozik, ebből világosan látható az amid NH jel hiánya. A 6 3,45 ppm-nél (CH3 0) és 6 5,70 ppm-nél (CH3OCH2) levő csúcsok mutatják, hogy-az észter kötés változatlan, és a 0 2,10 ppm-nél (CH2 -<) •0 és 3,25 ppm-nél (S-CH 2 ) levő csúcsok a dihidrotiazincsoportnak felelnek meg. A klórozási reakciókeveréket metilénkloridos oldatban metanol feleslegével elegyítjük -20 és -30 C° közötti hőmérsékleten. Két óra múlva a klórimid teljes eltűnését vékonyrétegkromatográfiával mutatjuk ki. Az előállított iminoétert (3^ D-(-)-0-fenilglicilkloriddal acilálva -20 és -30 C közötti hőmérsékleten a feltételezett 4 intermedier keletkezik. Az acilálási keveréket ezután savas víz.fl ben kb. 2 órán keresztül hidrolizáljuk. Kitűnő minőségű szilárd cefalexint állítunk elő bázis hozzáadásával, a pH-t 4,5-re állítva 1-butanol/víz elegyben Az így előállított cefalexin (5) szerkezetét elemi , analízissel, infravörös, mag mágneses rezonancia, és ultraibolya spektrum analízissel, valamint TLC (vé-
