169326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására aktivészteres módszerrel katalizátorok hozzáadása útján
31 169326 32 IV. 4. táblázat Az I, II és III módszerrel előállított H-Gly-Ile-Val-Glu-Glyn-OH aminosav-analízis és fizikai adatainak összehasonlítása 1 I. szerint (szilárdtest módszer 3-hidroxi--4-0X0-3,4-hidrokinazolin katalizátorral) II. szerint (szilárdtest módszer, mint I. katalizátor nélkül) III. szerint szokásos módszer MD2 (C = 0,25, vízben) -71,5 C° -39,4 C° -75,0 C° Bomláspont 240 C°-tól 165C°-tól 255 C°-tól vékonyréteg-kromatogram egységes és azonos Ill-mal 3 folt, ebből egyik Ill-mal azonos egységes Aminosav-analízis (72 óra 110C°-on) Glu- 2,6 Gly 1,0 Val 0,9 Ile 0,87 Glu 2,74 Gly 1,0 Val 0,445 Ile 0,33 Glu 2,2 Gly 1,0 Val 0,9 He 0,9 A 4. táblázatban kimutatott eredmények egyértelműen bizonyítják a találmány szerinti eljárás haladottabb jellegét a szilárdtest módszerhez képest. A szokásos módszerekkel ugyanis a találmány szerinti katalizátorok felhasználása nélkül triklórfenilészterek alkalmazásával nem volt lehetséges még csak megközelítően egységes terméket sem előállítani. Néhány katalizátor előállítási módszer: 3-hidroxi-4-metil-2,3-dihidro-tiazol-2-tion a) 5-tioxo-6-oxa-4-tia-2-oktanon 185 g (2 mól) klóraceton 300 ml metilénkloridban készült oldatát 300 ml vízzel felülrétegezzük. 10-20 C° közötti hőmérsékleten keverés közben 320,5 g (2 mól) etoxi-ditiohangyasav-káliumsót adunk hozzá adagokban. Az anyagot szobahőmérsékleten még 2 óra hosszat keverjük, a réteget elválasztjuk, a szerves fázist még egyszer 100 ml vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfáttal megszárítjuk és desztilláljuk. Forráspont 92-99 C (0,05 Ton), hozam 305 g. 30 35 40 45 50 b) 5-tioxo-6-oxa-4-tia-2-oktanon-oxim 56,0 g hidroxilamin-hidroklorid 400 ml metanolban készült oldatához 65,6 g nátriumacetátot és 55 137 g a) pont szerint előállított 5-tioxo-6-oxa-tia-2--oktanont adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 18.óra hosszat keverjük, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a maradékhoz vizet adunk, metilénkloriddal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk és az oldószertől mentesítjük. A maradékot diizopropiléterben felvesszük. Lehűtés után több frakcióban összesen 101 g oximot kapunk, amelynek olvadáspontja 64C . c) 3-hidroxi-4-metil-2,3-dihidro-tiazol-2-tion 104,4 g nátriumhidroxid 200 ml vízben készült oldatához hűtés és élénk keverés közben 15 perc leforgása alatt 125,3 g b) szerint előállított oximot csepegtetünk 300 ml metilénkloridban feloldva, majd a reakcióelegyet még 5 percig keverésben tartjuk. Ezután még 500 ml vizet adunk hozzá, a fázisokat elválasztjuk, a ' vizes fázist kétszer 100-100 ml hexánnal kirázzuk, végül koncentrált sósavval 2 pH-értékre megsavanyítjuk. A reakcióelegyet 1 óra hosszat jégfürdőben keverjük, a kivált csapadékot alaposan leszívatjuk és még kétszer alaposan 300-300 ml vízzel kimossuk*Hozam 61,5 g, olvadáspont 90 C°. További 12 gramm terméket kapunk, ha a vizes oldatot metilénkloriddal extraháljuk. 18. példa l-hidroxi-4,5-dimetil-3,5-diklór-2-piridon 20 g l-hidroxi-4,6-dimetil-2-piridont 75 ml koncentrált sósav és 60 ml víz elegyében feloldunk és az oldatba 10-15 C° közötti hőmérsékleten 21,6 g klór-gázt vezetünk be, még 1 óra hosszat keverjük, leszívatjuk, vízzel mossuk és vákuumban szárítjuk. Hozam 22,9 g, olvadáspont 213 C°. Acetonitriles átkristályosítás után az olvadáspont 216 C -ra emelhető. 60 65 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás kívánt esetben védett peptidek előállítására aktívészteres módszerrel, valamely kívánt esetben N-védett aminosav- vagy peptid-aktívész-16
