169326. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására aktivészteres módszerrel katalizátorok hozzáadása útján
21 169326 22 Analízis a C2 2H43C1N4 0 6 képlet (mólsúly 495,07) alapján: számított: C =53,37, H =8,76%, N =11,31%, 5 talált: C = 53,00%, H = 9,0%, N = 10,9%. e) Z-Leu-Ile-Asn-Thr-ÍBuVOBu* 10 16,4 g (60,8 mmol) Z-Leu-OH, 30,6 g (60,8 mmól) H-Ile-Asn-ThríBu^-OBu* • HCl, 8,34 g 1-hidroxi-benzo-triazol és 8,1 ml N-etilmorfolin 150 ml dimetilformamidban készült oldatába 0C°-on 13,6 g diciklohexilkarbodiimid 60 ml 15 dimetilformamidban készült hideg oldatát adjuk. A reakcióelegyet 1 óra hosszat 0 C -on, 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, majd az a) pont előírásai szerint feldolgozzuk. A terméket petroléterrel eldörzsöljük és leszívatjuk. Hozam 39,3 g, olvadás- 20 pont 173—176 C°. A terméket etilacetát-petroléter oldás-kicsapás útján tisztítjuk. Hozam 37,5 g (86%), olvadáspont 173-176 C°, [á\l° = -34,5 (c = l, metanolban). 25 Analízis a CssHsgNsO? képlet (mólsúly 705,9) alapján: számított: C =61,26%, H =8,42%, N = 9,92%, 30 talált: C =61,4%, H =8,7%, N = 9,9%. f) H-Leu-Ile-Asn-ThríBu^-OBu*- HCl 35 35,2 g (50 mmól) Z-Leu-Ile-Asn-ThríBu^-OBu^t b) pont szerint metanolban katalitikusan hidrogénezünk. Az anyag éteres eldörzsöléssel kikristályosodik. Hozam 28,5 g (94%), olvadáspont 192-193 C° (bomlik). [a]D=-17,9° 40 (c= 1, metanolban). Analízis a C2 8H 54 ClNs07 képlet (mólsúly 608,2) alapján: számított: C= 55,26%, H =8,96%, 45 N = 11,51%, talált: C = 55,3%, H = 9,0%, N =11,4%. g) Z-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBuVOBu* 50 26,2 g (43,1 mmól) H-Leu-Ile-Asn-ThríBuVOBu* • HCl, 14,6 g (43,1 mmól) Z-Trp—OH, 5,82 g 1-hidroxi-benzo-triazol és 5,6 ml N-etilmorfolin 150 ml dimetilformamidban 55 készült oldatához 9,5 g diciklohexilkarbodiimid 60 ml dimetilformamidban készült hideg oldatát adjuk. A reakcióelegyet 1 óra hosszat 0 C -on, 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A csapadékot leszívatjuk, a szűrletet bepároljuk. A mára- 60 dékot nátriumhidrogénkarbonát oldattal eldörzsöljük, leszívatjuk és szárítjuk. A szárított terméket izopropanolból átkristályosítjuk. Hozam 33,8 g (88%), olvadáspont 228-229 C°, [á\l° =-39,5° (c= 1, metanolban). 65 Analízis a C47H69 N 7 Oio képlet (mólsúly 892,1) alapján: számított: C = 63,28%, H =7,79%, N = 10,99%, talált: C = 63,0%, H = 7,8%, N = 10,7%. h) H-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBu^-OBu* • HCl 31,2 g (35 mmól) Z-Trp-Leu-Ile-Asn-ThríBu^-OBu'-t 200 ml 1:1 arányú dimetilformamid-metanol elegyben b) pont szerint katalitikusan hidrogénezzük. A maradékot éterrel eldörzsöljük. Hozam 27,2 g (98%), olvadáspont 215 C° (bomlik), [a]" =-28,0 (c = 1, metanolban). Egy mintát metanol-éter felhasználásával oldás-kicsapás útján tisztítunk. Olvadáspont 217 C (bomlik). [a]è° =-28,4° (c= 1, metanolban). Analízis a C3 9H6 4N 7 0 8 C1 képlet (mólsúly 794,45) alapján: számított: C =58,97%, H =8,12%, N =12,34%, talált: C = 57,2%, H = 8,2%, N =11,8%. i) Z-Phe-Val-OH 10,7 g Z-Phe-Val-OMe-t 200 ml 68 : 2 arányú dioxán-víz-elegyben oldunk. Az oldatot összesen 27 ml 1 n nátriumhidroxiddal timolftalein indikátor mellett lúgos kémhatásig titráljuk. Az oldatot 2 n sósavval semlegesítjük és bepároljuk. A maradékot etilacetát és 2 n sósav között megosztjuk. Az etilacetátos fázist vízzel mossuk, vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk és bepároljuk. A maradékot éteriéi eldörzsöljük és leszívatjuk. Hozam 9,45 g (92%), olvadáspont 148-149 C°. A nyers terméket etilacetát-petroléter segítségével oldás-kicsapás útján tisztítjuk. Hozam 9,2 g, olvadáspont 148-150 C°. [a]£>° =-8,8° (c= 1, metanolban). Analízis a C22 H 26 N 2 O s képlet (mólsúly 395,5) alapján: számított: C =66,32%, H =6,58%, N = 7,02%, talált: C = 66,6%, H = 6,7%, N=7,2%. k) Z-Phe-Val-Gln-OBu* 8,0 g (20 mmól) Z-Phe-Val-OH, 4,8 g H-Gln-OBu* • HCl, 2,7 g 1-hidroxi-benzo-triazol és 2,6 ml N-etilmorfolin 40 ml dimetilformamidban készült oldatába 0C -on 4,2 g hideg diciklohexilkarbodiimid oldatot adunk. Az oldatot 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, a csapadékot leszívatjuk és a szűrletet bepároljuk. A maradékot nátriumhidrogénkarbonát oldattal eldörzsöljük, leszívatjuk és vízzel mossuk. Hozam 11,65 g (100%), olvadáspont 219-221 C° (bomlik). [a]2D ° =-35,7° (c= 1, metanolban). 11
