169292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neurohormonok elkülönítésére szarvasmarhahipotalanuszból
MAGTAB NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 169292 Bejelentés napja: 1972. XI. 24. (11-126) Közzététel napja: 1976. V. 28. Megjelent: 1977. VII. 30. Nemzetközi osztályozás: A61K 35/46 Bejelentés napja: 1972. XI. 24. (11-126) Közzététel napja: 1976. V. 28. Megjelent: 1977. VII. 30. C 07 G 17/00 ORSZÁGOS TALALMAIT mVATAL rí Bejelentés napja: 1972. XI. 24. (11-126) Közzététel napja: 1976. V. 28. Megjelent: 1977. VII. 30. Feltaláló: Tulajdonos: Golojan Armen Anusavaaovics biokémikus, Jereván, Szovjetunió Insztitut Biohimii Akademii Nauk Armjanskoj SzSzR, Jereván, Szovjetunió Eljárás neurohormonok elkülönítésére szarvasmarha-hipotalamuszból A találmány tárgya eljárás két új neurohormon, éspedig a későbbiekben pontosan jellemzett „K" és „S" neurohormon elkülönítésére szarvasmarha-hipotalamuszból. Ismeretes, hogy patkányok hipotalamuszában háromféle olyan anyag mutatható ki, amelyek koszorúértágító hatásúak [Vopr. Biochim. Mozga. Akad. Nauk. Arm. SSR, Inst. Biochim., 2, 55-62 (1966)]. Ezeket a patkány hipotalamuszában megtalálható neurohormonokat azonban nem használták fel gyógyszerkészítmények formájában gyógyászati célokra, tekintettel arra, hogy nem sikerült őket preparative izolálni (a vizsgálatokat papírkromatográfiával végezték). Sőt, vizsgálataink szerint a patkányok hipotalamuszát nem célszerű koszorúértágító hatású neurohormonok elkülönítésére, illetve ilyen neurohormonokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására hasznosítani, éppen a neurohormonok izolálásának és tisztításának nehézsége miatt. Megvizsgáltuk többek között sertések és juhok hipotalamuszát abból a célból, hogy vajon elkülöníthető-e belőle egy vagy több koszorúértágító hatású neurohormon, azonban nem kaptunk kedvező eredményeket. A szarvasmarha hipotalamuszából végül sikerült olyan új neurohormont, éspedig a „K" és az „S" neurohormont tisztán elkülöníteni, amlyek közül az „S" neurohormon kiválóan hasznosítható koszorúértágító hatású gyógyászati készítmények hatóanyagaként. A két neurohormon újnak 10 15 20 25 30 tekinthető -bár erre egyértelmű bizonyítékunk nincs, tekintettel arra, hogy a neurohormonok pontos kémiai szerkezetét eddig nem sikerült felderíteni. Ismeretes ugyanakkor, hogy a szarvasmarha-hipotalamusz többféle hormonális jellegű biológiai hatóanyagot, így például oxitocint, vazorpresszint és úgynevezett hipofizotróp hormonokat, így neurohormonokat tartalmaz. A neurohormonok közé tartozik az alacsony molekulasúlyú és hőstabil „K" és „S" neurohormon is. Ezeket a neurohormonokat a neuroszekréciós hipotalarnusz-sejtek választják ki, és a hipotalamuszból a keringési rendszerbe az adenohipofizis érintése nélkül parahipofizises úton jutnak. A „K" és az „S" neurohormonok a találmány értelmében úgy különíthetők el, hogy szarvasmarha-hipotalamuszt 20—30 percen át 0,25 - 0,5%-os ecetsavval extrahálunk, a kapott extraktumot centrifugáljuk, a felülúszó fázisból a nagy molekulasúlyú vegyületeket szerves oldószerrel végzett kezelés útján kicsapjuk, az alacsony molekulasúlyú vegyületek visszamaradt elegyét liofilizáljuk, majd desztillált vízben feloldjuk, a vizes oldatot cellulózbázisú, 200-400 mesh szemcseméretű molekulaszűrőből készült oszlopra felvisszük, az oszlopot desztillált vízzel vagy 0,25 - 0,5%-os ecetsavval frakcionáltan eluáljuk, végül az utolsó előtti alacsony molekulasúlyú anyagként az oszlopot elhagyó „K" neurohormont 169292