169170. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[alfa-(2-amino-metil-1-ciklohexenil és 1,4-ciklohexadienil)-acetamido] -3-heterociklusos -tiometil-3-cefem-4-karbonsav-származékok előállítására
61 169170 62 A fenti minták a táptalaj húslevesben történt hígítás után a fenti táblázatban feltüntetett és iug/ml-ben kifejezett legkisebb gátló koncentrációkat mutatják a táblázatban felsorolt mikroorganizmusok ellenében. A meghatározást 37 C° hőmérsékleten egy éjszakán át történő inkubálás után a cső-hígításos módszerrel végezzük. A találmány szerinti eljárással előállított, előny- JO ben részesített új vegyületek, így például a 20. példa szerinti módszerrel előállított 7c-jelű (BB-S311) és a 3. példa szerinti módszerrel előállított -6c-jelű (BB-S336) vegyület kiváló in vivo hatékonyságát oly módon igazoltuk, hogy az alább feltüntetett mikroorganizmusokkal fertőzött egérnek szubkután adva a vizsgált vegyületet, az azonosan fertőzött más állatoknak pedig az MR-S94 vegyületet, meghatároztuk az 50%-os gyógyulást biztosító (CD50) mg/kg testsúly értékben, amelynek a letalis dózishoz viszonyított arányát az alábbiakban ismertetjük: Fertőző mikroorganizmus BB-S311 1. sorozat CDS0 , mg/kg-ban BB-S336 1,8 2,4 1,0 -6,25 5,4 5,6 -9,4 -8,5 -1,8 MR-S94 Staphylococcus aureus BX—1633 Streptococcus pyogenes A9604 Escherichia coli Juhi Escherichia coli Juhi Proteus mirabilis A9900 Klebsiella pneumoniae D-l 1 Staphylococcus aureus Smith 3,4 0,8 4,4 4,2 8 4,6 3,1 A patkány vizelet vizsgálatok során a cefalosporinokat 200 mg/kg adagban szubkután adtuk, mégpedig a zwitterion alakú vegyületeket vizes szuszpenzióban (40 mg/ml, dimetil-szulfoxid 40 - 0,5%-os nátrium-hidrogén-karbonát - víz 1:1:8), a mólbázison azonos hatású szalicilaldehid-származékokat pedig vizes oldatban. 45 A patkányon végzett krisztalluria vizsgálatok során a BB-S311 esetében kielégítően nagy szérum és vizelet koncentrációkat kaptunk, a krisztalluria, azaz a vizeletben fellépő kristály-képződés nyoma nélkül. A kutyákon végzett vizsgálatok során a 50 BB—S311 esetében kristálymentes nagy vizeletfelszívódás vizsgálatok azt mutatják, hogy a BB-S311 csúcsszintje magasabb a cefalotinénál és, hogy ez az antibiotikum a vérben a cefalotinnál hosszabb ideig maradhat meg.' Az izomba (i. m.) adott és a 55 patkányok vizeletéből visszanyert BB-S311 dózis mennyiség 31% volt, amely érték igen hasonló az MR-S94 esetében kapotthoz (35,5%). A cefaloridin esetében a visszanyert mennyiség 43,1%, míg a cefalotinnál 18,1% volt. A BB-S311 a vizeletben 60 biológiailag aktív egységes anyag alakjában jelenik meg és Rf-értéke megegyezik azzal az Rpértékkel, amelyet a vegyület vizes oldatában mérhetünk. A BB—S311 baktériumellenes hatékonyságát, aktivitását agar hígításos teszt rendszerben is 65 egybevetettük az MR-S94-ével. Mueller-Hinton agáron 18 Gram-pozitív és 58 Gram-negatív mikroorganizmussal kapcsolatban elvégzett tesztek során azt találtuk, hogy a BB-S311 aktivitása az MR-S94-ével azonos nagyságrendű. Egy másik kísérlet sorozatban az MR-S94 és BB-S311 viszonylagos aktivitását a Serratia marcescens, Enterobacter sp., Providencia stuartii és Proteus sp. 32 törzse ellenében határoztuk meg. E kísérletek igazolták, hogy e vegyületek az Enterobacter sp., a Proteus stuartii és a Proteus morganii kivételével valamennyi Proteus sp. legtöbb képviselőjével szemben kiváló aktivitással rendelkeznek. A találmány szerinti eljárással előállított új vegyületeket például dimetil-szulfoxidban vagy vízben oldva és 2 mg/ml koncentrációjú oldatokat előállítva, majd az oldatokat táp húslevessel hígítva, az egy éjszakán át 37 C° hőmérsékleten inkubált alábbi mikroorganizmusokkal szemben a cső-hígításos módszerrel végzett meghatározás tanúsága szerint a következő táblázatban feltüntetett jug/ml-ben kifejezett legkisebb gátló koncentrációkat, mutatják. A táblázatban a különböző régi, ismert cefalosporinnal kapott eredményeket is bemutatjuk. Ezekben és más kísérletekben is, a szalicilaldehid-származékok a megfelelő zwitterionokkal egyező hatásúak és ugyancsak igen jól oldódnak vízben. 31
