169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
11 - 169159 12 A kiindulási anyagok előállítása 4. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N2H 3 A) Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N 2 H 3 szintézise 5' 1. Z-D,Glu(OtBu)-His-ÖMe 6,62 g Z-D-Glu(OtBu)-OH 30 ml acetonitrillél készített oldatát 0 C° hőmérsékletre hűtjük, majd hozzáadjuk 5,32 g H-His-OMe • 2HC1 30 ml lehű- io tött acetonitrillél készített oldatát, majd 2 ekvivalens TAA-t adunk az elegyhez, azután 0 C° hőmérsékleten 4,62 g DCCI 15 ml acetonitrillél készített oldatát adjuk hozzá. Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 2 óra hosszat keverjük, majd ugyan- 15 ezen a hőmérsékleten 20 óra hosszat állni hagyjuk, azután a képződött csapadékot kiszűrjük és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot etilacetátban oldjuk, az oldatot vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, 20 majd vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk és szárítjuk. Az oldószert ezután vákuumban bepárologtatjuk és a kapott olajszerű maradékot szilikagélen kromatografáljuk, benzol és etanol 8:2 arányú elegyében. 25 3,5 g habos olajszerű terméket kapunk, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, benzol és etanol 8:2 arányú elegyében): 0,57. 2. H-D-Glu(OtBu)-His-OMe • 2HC1 30 2,9 g fenti módon kapott olajszerű terméket 50 ml metanolban oldunk. Az oldathoz 3,25 ml 4n sósavoldatot és 600 mg 10%-os palládiumos aktivszén-katalizátort adunk, majd hidrogéngázt bu- 35 borékoltatunk az elegyen keresztül. 2,5 óra múlva a reakcióelegyet leszűrjük és a szűrletet bepároljuk. Maradékként 2,35 g terméket kapunk, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, 8:2:1 arányú Am-Fo-víz elegyben): 0,34. 40 3. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-OMe 1,59 g Boc-Met-N2 H 3 15 ml dimetilformamiddal készített oldatát 0 C° hőmérsékletre hűtjük, majd 45 2,6 ml 4,85 n tetrahidrofurános hidrogénklorid-oldatot adunk hozzá, az elegyet -20 C°-ra hűtjük és ezen a hőmérsékleten 0,82 ml izoamil-nitritet adunk hozzá. Az elegyet -20 C° hőmérsékleten 5 percig keverjük, majd a képződött azidot hozzá- 50 adjuk 2,35 g H-D-Glu(OtBu)-His-OMe • 3HC1 (vö.: A.2) 20 ml dimetilformamiddal készített oldatához. Az elegyhez ezután trietil-amint adunk 7,2 pH-érték eléréséig. A reakcióelegyet 20 dra hosszat keverjük, majd 55 leszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot vizes etilacetátban oldjuk és vízzel ' mossuk az elegyet. A szerves oldószeres fázist elkülönítjük, szárítjuk és bepároljuk 15 ml térfogatra. Az így kapott oldatot 60 ml petroléterrel 60 hígítjuk. Egy napi állás után tiszta oldatot kapunk, ezt szárazra pároljuk. 2,63 g habos olajszerű terméket kapunk, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, 4:1:1 Bu-Ac-víz elegyben): 0,76. 65 2,6 g A.3 szerint kapott észtert 50 ml metanolban oldunk és 2,6 ml hidrazin-hidrátot adunk az oldathoz. A reakcióelegyet 5 óra hosszat keverjük, majd bepároljuk, a maradékhoz étert adunk és 0 C° hőmérsékleten állni hagyjuk. 24 órai állás után a képződött csapadékot szűréssel elkülönítjük. Ily módon 2,1 g terméket kapunk, amelynek Rf-értéke (szilikagélen, 10:4:5 arányú Am-iPro-víz elegyben): 0,36. B) A fent leírthoz hasonló módon állítjuk élő az alább felsorolt analóg vegyületeket is: Boc-Ala-D-Glu(OtBu)His-N2 H 3 Rf = = 0,31 Boc-f3-Ala-D-Glu(OtBu> -His-N2 H 3 Rf = = 0,36 Dezamino-Met-Glu(OtBu)His-N2 H 3 Rf = = 0,47 BocVal-D-Glu(OtBU> -His-N2 H 3 Rf = = 0,33 Boc-(a-Me-Ala-D-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 Rf = = 0,32 Boc-Gly-D-Glu(OtBu> -His-N2 H 3 Rf = = 0,30 (Valamennyi fenti Rf -érték szilikagélen, 10:4:5 Am-iPro-víz oldószer-rendszerrel lett meghatározva.) C) Boc-Met-Glu(OtBu)-D-His-N2 H 3 szintézise .1. Z-Glu(OtBu)-D-His-OMe 66,2 g Z-Glu(OtBu)-OH 115 ml acetonitrillél készített oldatához hozzáadjuk 50 g H-D-His-OMe • 2HC1 115 ml acetonitrillél készített oldatát, majd az elegyet 0 C° hőmérsékletre hűtjük, 58 ml .trietil-amint adunk hozzá és ugyancsak 0 C° hőmérsékleten 38,8 g diciklohexil-karbodiimidet adunk az elegyhez. Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 22 óra hosszat keverjük, majd leszűrjük és a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot etilacetáttal felvesszük, a szerves oldószeres oldatot 5%-ós vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, azután pedig vízzel mossuk. Az elkülönített szerves oldószeres oldathoz 575 ml étert és 115 ml petrolétert adunk, majd 100—100 ml n sósavoldattal négyszer extraháljuk. Az egyesített savas vizes kivonatot n nátrium-hidroxid-oldattal 8,5 pH-értékre állítjuk és ismét extraháljuk etilacetáttal. Az elkülönített szerves oldószeres kivonatot 4%-os vizes nátrium-klorid-oldattal négyszer mossuk, majd 400 ml térfogatra bepároljuk. A maradékhoz 575 ml étert és 116 ml petrolétert adunk, aminek hatására a kívánt dipeptid kikristályosodik. Hozam = 58%. 6
