169158. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására - antidepresszáns
169158 11 12 B) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 1. Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-OMe 10,52 g Boc-D-Met-N2 H 3 75 ml dimetil-formamiddal készített oldatát 0 C° hőmérsékletre hűtjük, 23,6 ml tetrahidrofuránnal készített 3,4 n sósavoldatot adunk hozzá, azután -20 C°-ra hűtjük és ezen a hőmérsékleten 5,85 ml izoamil-nitritet adunk az elegyhez. A reakcióelegyet —20 C° hőmérsékleten 7 percig keverjük, majd 17,05 g H-Glu(OtBu)-His-OMe • 2 HCl 50 ml dimetil-formamiddal készített oldatát adjuk hozzá és az elegy pH-értékét trietil-aminnal 6,9-re állítjuk. Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 3 napig keverjük, majd leszűrjük és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 150 ml etilacetát-víz elegyben oldjuk, a szerves oldószeres fázist elkülönítjük, vízzel mossuk, szárítjuk, majd 100 ml térfogatra bepároljuk és 0 C° hőmérsékleten állni hagyjuk. A kivált kristályos terméket elkülönítjük és megszárítjuk, op.: 69-71 C°. Rf 0,63 (4:1:1 butanol-ecetsav-víz oldószer-rendszerben, szilikagélen) Hozam: 72%. 2. Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 3,2 g (5,45 millimól) fenti módon kapott metilésztert 60 ml metanolban oldunk és 3,7 ml hidrazin-hidrátot adunk az oldathoz. Az elegyet szobahőmérsékleten 5 óra hosszat keverjük, majd a metanolt vákuumban ledesztilláljuk és a maradékot vízzel keverjük, azután a terméket elkülönítjük, megszárítjuk és az így kapott hidrazidpt azonnal tovább feldolgozzuk. Rf 0,37 (10:4:5 amilalkohol-izopropanol-víz oldószer-rendszerben, szilikagélen) Hozam: 90%. C) BocVal-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 1. Boc-Val-Glu(OtBu)-His-OMe 3,26 g (15 millimól) Boc-Val-OH 20 ml diklór-metánnal készített oldatához 1,73 g N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Az elegyet -20 C° hőmérsékletre hűtjük, majd hozzáadjuk 3,09 g diciklohexil-karbodiimid 20 ml lehűtött diklór-metánnal készített oldatát. Az így kapott oldatot -20 C° hőmérsékleten 1 óra hosszat, majd +20 C° hőmérsékleten 20 óra hosszat keverjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk és a maradékot 30 ml dimetil-formamidban oldjuk. Az oldathoz 7,33 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe észtert [előállítva Kappler, Helv. 44, 1991 (1961) szerint] és l,4g 10%-os palládiumos aktívszén-katalizátort. Ezen az elegyen keresztül hidrogéngázt buborékoltatunk 5 óra hosszat, majd a reakcióelegyet éjjelen át keverjük, azután a katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot etilacetát és víz elegyében oldjuk, a szerves oldószeres fázist vízzel, majd nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, végül ismét vízzel mossuk, szárítjuk és az etilacetátos vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot etilacetát és petroléter elegyéből átkristályosítjuk. 3,95 g metilésztert kapunk, amely 117-119 C°-on olvad. Rf 0,55 (8 : 2 benzol-etanol oldószer-rendszerben, szilikagélen). 5 2. Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 3,73 g fenti módon kapott metilésztert 85 ml metanolban oldunk és 3,72 ml hidrazin-hidrátot adunk !0 az oldathoz. Az elegyet szobahőmérsékleten 7 óra hosszat keverjük, majd szárazra pároljuk és a maradékot éterrel eldörzsöljük. A kapott terméket elkülönítjük és megszárítjuk. Hozam: 90%. Rf 0,33 (10:4:5 arányú amilalkohol-izopropa-15 nol-víz oldószer-rendszerben, szilikagélen). D) Boc-|3-Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 1. Boc-j3-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe 20 3,78 g Boc-ß-Ala-OH diklór-metánnal készített oldatát 0 C° hőmérsékletre hűtjük és 2,3 g N-hidroxi-szukcinimidet adunk hozzá. Az elegyet tovább hűtjük -22C°-ra, majd 4,12 g diciklohexil-karbodiimi-25 det adunk hozzá. A reakcióelegyet —22 C° hőmérsékleten 30 percig, azután 0 C°on 3 óra hosszat, végül szobahőmérsékleten 12 óra hosszat keverjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk és a maradékot dimetil-formamid-30 ban oldjuk. 9,77 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe észtert és 1,5 g palládiumos aktívszén-katalizátort adunk az oldathoz és 6 óra hosszat hidrogéngázt buborékoltatunk az elegyen keresztül. Ezután a reakcióelegyet 12 óra hosszat keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük 35 és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk, az oldatot vizes 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd vízzel mossuk, az elkülönített szerves oldószeres fázist szárítjuk, majd szárazra pároljuk és a maradékot etilacetát és petroléter 40 1 : l arányú elegyéből átkristályosítjuk. Az így kapott kristályos termék 93—95 C°-on olvad. Hozam: 4,7 g. Rf 0,25 (8 : 2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben, szilikagélen). 45 2. Boc-ß-Ala-Glu(OtBu)-His-N 2H 3 3,0 g fenti módon kapott metilésztert 60 ml méta- " nolban oldunk, az oldathoz 3 ml hidrazin-hidrátot adunk és az elegyet szobahőmérsékleten 6,5 óra 50 hosszat keverjük. A kapott oldatot szárazra pároljuk és a maradékot vízmentes éterrel eldörzsöljük. Az elkülönített terméket azonnal felhasználjuk a további reakciókhoz. Rf 0,42 (10:4:5 arányú amilalkohol-izopro-55 panol-víz oldószer-rendszerben, szilikagélen). Hozam: 88%. E) Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 60 l.Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-OMe Ezt az észtert ugyanolyan módon állítjuk elő, mint a C) példa 1. bekezdésében leírtuk, Boc-Gly-OH és H-Glu(OtBu)-His-OMe reagáltatása útján. A kapott 65 termék 103-108 C°-on olvad. 6
