169157. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiai hatású peptidek előállítására
9 169157 10 C) példa Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2H 3 előállítása 1. Boc-Val-Glu(OtBu)-His-OMe 3,26 g (15 mmól) Boc-Val-OH 20 ml metilénkloriddal készített oldatához 1,73 g N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Az elegyet —20 C°-ra hűtjük, 3,09 g diciklohexilkarbodiimid 20 ml hideg metilénkloriddal készített oldatát adjuk hozzá, és a kapott oldatot 1 órán át -20 C°-on, majd 20 órán át +20 C°-on keverjük. A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk, és a maradékot 30 ml dimetilformamidban oldjuk. Az oldathoz 7.33 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe-t [Kappler: Helv. 44, 1991 (1961)] és 1,4 g 10%-os palládium/csontszén katalizátort adunk, és az oldatba 5 órán át hidrogéngázt vezetünk. Az oldatot ezután éjszakán át keverjük, szűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot vizes etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos fázist vízzel, nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és ismét vízzel mossuk, szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot etilacetát és petroléter elegyéből kristályosítjuk. 3,95 g Boc-Val-Glu(OtBu)-His-OMe-t kapunk, op.: 117-119 C°, Rf = 0,52 (szilikagél-lemezen, 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). 2. Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 3,73 g fenti metilészter 85 ml metanollal készített oldatához 3,72 g hidrazinhidrátot adunk. Az elegyet 7 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd szárazra pároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. A kapott Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 Rf-értéke 0,33 (szilikagél-lemezen, 10:4:5 arányú amilalkohol-izopropanol-víz elegyben). Hozam: 90%. D) példa Boc-/3-Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 előállítása 1. Boc-(3-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe 3,78 g Boc-j3-Ala-OH 0 C°-os metilénkloridos oldatához 2,3 g N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Az elegyet -22 C°-ra hűtjük, és 4,12 g diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá. Az elegyet 30 percig -22 C°-on, 3 órán át 0 C°-on, végül 12 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált diciklohexilkarbamidot kiszűrjük, a szűrletet szárazra pároljuk, és a maradékot dimetilformamidban felvesszük. A kapott oldathoz 9,77 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe-t és 1,5 g 10%-ös palládium/csontszén katalizátort adunk, és az elegybe 6 órán át hidrogéngázt vezetünk. Az elegyet 12 órán át keverjük, majd a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban felvesszük, az oldatot 5%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, majd vízzel mossuk, szárítjuk, és szárazra pároljuk. A maradékot 1 :1 arányú etilacetát : petroléter elegyből átkristályosítjuk 4,7 g 93-95 C°-on olvadó Boc-ß-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe-t kapunk. Rf = 0,25 (szilikagél-lemezen, 8 : 2 arányú benzol-etilacetát elegyben). 5 2. Boc-/3-Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 3 g fenti metilészter 60 ml metanollal készített oldatához 3 ml hidrazinhidrátot adunk, és az elegyet 6,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az 10 oldatot szárazra pároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. A kapott terméket közvetlenül felhasználjuk a további reakciókhoz. A kapott Boc-jS-Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 R f -értéke 0,42 (szilikagél-lemezen, 10:4:5 arányú amilalkohol-izopro-15 panol-víz elegyben). Hozam: 88%. E) példa Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 előállítása 20 1. Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-OMe A fenti terméket a C) példa 1. lépésében leírt módon állítjuk elő Boc-Gly-OH és H-Glu(OtBu)-25 His-OMe reakciójával. A termék 103-108 C°-on olvad. Rf = 0,43 (szilikagél-lemezen, 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). 2. Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 30 A fenti terméket az A) példa 2. lépésében leírt módon állítjuk elő úgy, hogy a megfelelő metilésztert hidrazinhidráttal reagáltatjuk. A termék Rf-értéke 0,32 (szilikagél-lemezen, 10:4:5 arányú 35 amilalkohol-izopropanol-víz elegyben). F) példa A C) és D) példában leírt eljárással állítjuk elő 40 az alábbi vegyületeket: 1. Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 , Rf = 0,33 (10 :4 :5 arányú amilalkohol-izopropanol-víz elegyben). 45 2. Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 , Rf = 0,31 (10 :4 :5 arányú amilalkohol-izopropanol-víz elegyben). 3. Dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 , Rf = 0,32 (10:4:5 arányú 50 amilalkohol-izopropanol-víz elegyben). A kromatográfiás vizsgálatokat szilikagél lemezen végezzük. 55 G) példa Boc-Met-Gln-His-N2 H 3 előállítása A C) példa 1. lépésében leírt módon Boc-Met-60 -OH-t H-Gln-His-OMe-vaí kapcsolunk [a reagenst a megfelelő Z-védett peptid (Helv. 44, 476, 1961) 10%-os palládium/csontszén katalizátor jelenlétében végzett hidrogénezésével állítjuk elő], majd a kapott Boc-Met-Gln-His-QMe-t a C) példa 2. lépésében 65 leírt módon a megfelelő hidraziddá alakítjuk. A 5
