169119. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nem-patogén bovin rhinotracheitis vírustörzs és élő legyengített bovin rhinotracheitis virus-vakcina előállítására
21 169119 22 A fenti kétkomponensű vakcinából minden egyes állatnak intranazálisan egy-egy dózisegységet adunk be. A vakcinás kezelés után 3 héttel az állatokból vérmintát veszünk, és a vérmintát szerológjás vizsgálatnak vetjük alá. Minden állat esetén mind IBR-vírusra, mind bovin PI3 vírusra vonatkozólag szérum-konverziót észleltünk. Az eredményeket a 15. táblázatban közöljük. 15. táblázat Szerológiai reakciók Állat IBR-vírusra vonatkozó szérumbovin PI3 vírusra vonatkozó száma semlegesítő antitest-faktor hemagglutinációt gátló faktor kezelés előtt kezelés után kezelés előtt kezelés után 1 2 3 4 0 0 0 0 1 2 2 2 <8 <8 <8 <8 64 32 16 A bovin PI3 vírus nem befolyásolja az IBR-vakcinás kezelés eredményét, az IBR-vírus viszont nem befolyásolja az állátok bovin PI3 vírusra vonatkozó 25 szérum-konverzióját. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás IBR RLB 106 jelű, NRRL 5671 letéti számú nem-patogén, fertőző, hőmérsékletre érzékeny bovin rhinotracheitis vírustörzs előállítására IBR 3760 jelű, NRRL 5670 letéti számú patogén, fertőző bovin rhinotracheitis vírustörzsből, salátromossawal végzett mutagen kezelés útján, azzal jellemezve, hogy az IBR 3760 (NRRL 5670) vírustörzset 1—15 percig, célszerűen 10 ±1 percig 4 és 5 közötti pH-értékre, célszerűen 4,6 ± 0,1 pH-értékre pufferolt, vizes salátromossav-oldattal kezeljük, az így kialakult, hőmérsékletre érzékeny vírustörzset heterológ sejttenyészetben a patogenicitás megszűnéséig sorozattenyésztésnek vetjük alá, majd a kapott nem-patogén, fertőző, hőmérsékletre érzékeny IBR RLB 106 (NRRL 5671) bovin rhinotracheitis vírustörzset elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítása módja, azzal jellemezve, hogy pufferolt vizes salétromossav-oldatként salétromossav acetát-pufferral készített, salétromossavra nézve 1 normál és acetát-ionra nézve 0,25 normál koncentrációjú oldatát használjuk. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az IBR 30 35 40 45 50 3760 (NRRL 5670) vírustörzset szobahőmérsékleten kezeljük a pufferolt, vizes salétromossav-oldattal. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy heterológ sejttenyészetként primer nyúl vese-sejttenyészetet használunk. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 30-37 ± 1 C° hőmérsékleten, célszerűen 37 ± 1 C° hőmérsékleten 5-15 lépésből, célszerűen 10 lépésből álló sorozattenyésztést végzünk. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a hőmérsékletre érzékeny IBR RLB 106 (NRRL 5671) vírustörzs elkülönítésére a sorozattenyésztés után primer embrionális bovin vese-sejttenyészeten további tenyésztést végzünk. 7. Eljárás az IBR RLB 106 jelű, NRRL 5671 letéti számú nem-patogén, fertőző, hőmérsékletre érzékeny bovin rhinotracheitis vírustörzset tartalmazó élő, nem-patogén, fertőzőb bovin rhinotracheitis vírus-vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy az IBR RLB 106 jelű, NRRL 5671 letéti számú hőmérsékletre érzékeny vírustörzset sejttenyészetben legföljebb 37 ± 1 C°-on legalább 3 napig tenyésztjük, mejd a kapott vírus-szuszpenziót elkülönítjük, és kívánt esetben fagyasztva szárítjuk. 8. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy sejttenyészetként primer embrionális bovin vese-sejttenyészetet használunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 774285 - Zrínyi Nyomda 11
