169114. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fehérjék extrakcióira szerves anyagokból

3 169114 4 myces plateinsis proteiolytica mikroorganizmus segítségével. A 3 390 999 számú USA szabadalmi leírásban vágóhidakról, halfeldolgozásból, keményítőfinomításból és tejfeldolgozó üzemekből származó nagy víz- és fehérjetartalmú szennyezésekből a fehérje elkülönítésére lignoszulfonsawal történő kicsapást írnak le. A jelen találmány szeririti eljárás tiszta fehérjék kinyerésére vonatkozik olyan szerves anyagokból, amelyek főkomponensként a fehérjéken kívül legalább egy további komponenst tartalmaznak. A találmány szerinti eljárás azzal jellemezhető, hogy az elválasztást a szárított anyagból szelektív szerves oldószerekkel végezzük. A felhasznált oldószer a két főkomponens egyikére fejt ki hatást, vagyis a fehérjékre vagy a másik komponens(ek)-re, míg a többi komponens változatlanul marad. A fehérjék szempontjából oldóhatású és a többi komponens szempontjából inert oldószer ilyen szerves anyagoknál célszerűen a propilénglikol, m-krezol és a 2-metoxietanol. A szerves anyagban jelen levő és a további komponensek szempontjából oldóhatású, azonban a fehérjék szempontjából inert oldószer közé tartozik a glicerin és az etüénglikol. A szerves anyagok egy vagy több következő komponenst tartalmaznak: makromolekulás anyagok, vízoldhatatlan anyagok, mint a cellulóz vagy kollagén, víz, zsírok, fehérjék, sók, vízoldható szénhidrátok. A találmány szempontjából a főkomponensek közé a fehérjék tartoznak, a szerves alapanyag többi komponenseit a következőkben „maradéknak" nevezzük. A találmány célkitűzése a fehérjék változatlan minőségben nem denaturált állapotban történő kinyerése. A feldolgozandó szerves anyagot szükséges esetben, pl. őrlés vagy eldörzsölés útján diszpergáljuk és a vízoldhatatlan komponenseket lehetőleg elkülönítjük. Ezután a feldolgozandó anyagot különböző módszerekkel szárítjuk, figyelembe véve mindenkor azonban a fehérjék hőérzékenységét. Ez a hőérzékenység a fehérjetípustól, az időtől és a szárítási módszertől függ, rendszerint azonban a feldolgozandó szerves anyag szempontjából a megengedhető felső hőmérséklethatár 60-70 C°. A következőkben közelebbről ismertetjük, hogy az előbb megnevezett por alakú termékből a fehérjék milyen módon különíthetők el. A fehérjéknek a por alakú termékből történő elválasztása akként történhet, hogy a fehérjéket propilénglikolban, m-krezolban vagy 2-metoxi-etanolban vagy a felsorolt oldószerek keverékében feloldjuk, a maradék így oldhatatlan állapotban visszamarad, majd feloldás után a fehérjéket kicsapjuk. A másik módszer pedig a zsírokból, szénhidrátokból és sókból, de nem a fehérjékből álló maradék feloldása glicerinben vagy etilénglikolban, illetve ilyen oldószerek elegyében. Ha a fehérjéket propilénglikolban, m-krezolban vagy 2-metoxietanolban, illetve a felsorolt oldószerek keverékében feloldjuk, akkor a fehérjedús oldatot centrifugálással vagy szűréssel választhatjuk el a maradéktól. A fehérjéket könnyen kicsaphatjuk az oldatból oly módon, hogy hidegen etanolt adagolunk és a kicsapott fehérjét centrifugá-5 lássál vagy szűréssel elválasztjuk, majd vízben ismét feloldjuk. Ha pedig ellenkező módon a fehérjék kizárásával az ún. maradék komponenseket oldjuk fel glicerinben vagy etilénglikolban, akkor ezt az oldatot 10 választjuk el a visszamaradt fehérjétől, amelyet ezt követően vízben feloldunk. Az elválasztási műveletet folyamatosan vagy szakaszosan végezhetjük. 15 1. példa A fehérjék elválasztása a savóból korábban tel-20 jesen megoldhatatlan problémát jelentett az egyes komponensek kitűnő vízoldhatósága miatt. Emiatt csupán a fehérjék koncentrálását végezték el. A fehérjék elválasztása a savótól a találmány szerinti eljárással a következő példa szerint végezhető: 25 A savó főként a következő komponensekből áll: tejzsír 0,8% fehérjék 0,8% laktóz 4,5% 30 sók, főként nátriumklorid 0,5% víz 93,4% Az egyes komponensek aránya a gyártott sajt-típustól függ és a fenti adatok megközelítő érté-35 kek. 10 kg savót 50%-os szárazanyag-tartalomig bepárolunk. Lehűtés után kb. a laktóz 80%-a kikristályosodik. A kikristályosodott laktózt centrifugálással elválasztjuk. A maradék, az ún, laktózban sze-40 gény savó, összetétele a következő: tejzsír 80 g fehérjék 80 g laktóz 90 g 45 sók 50 g víz 660 g Az előbbi összetételű terméket 300 g vízmentes por alakú termékké megszárítjuk. Ezt a port 3 per-50 cig 700 g glicerinnel rázogatjuk, majd centrifugáljuk. A glicerinfelesleget kétszeri 400-400 g 1 :1 arányú etanol-aceton eleggyel mossuk, majd a szilárd fázist szárítjuk. Ily módon 75 g nem denaturált vízoldható por alakú fehérjét különíthetünk 55 el. A fenti eljárás oldószerként etilénglikollal megismételhető, amikor is azonos értékű extrakciót érünk el. 60 2. példa Táplálkozási szempontból nagy értékű vágóhídi eredetű vérplazmát dolgozunk fel ebben a példában, a vérplazma felhasználása nagy sótartalma 65 miatt azonban korlátozott. 2