169032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás O-szubsztituált 7béta-amino-3-cefem-3-ol-4-karbonsav- származékok előállítására
53 169032 54 nyú toluol és etil-acetát eleggyel eluáljuk és mint amorf terméket kapjuk. Kitermelés: 0,6503 g. Vékonyréteg-kromatogram (szüikagél): Rf = 0,45 (rendszer: toluol és etil-acetát 1:1), ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xváu = 258 m/i (e = 7450), 264 mß (e = 7050) és 268 m/z (e = 6700), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 5,65 ß, 5,78 ß, 6,03 ß és 6;64ju. A kiindulási anyagot a következő módon állítjuk elő: 50 g cefalosporin C nátriumsót 1500 ml 10%-os vizes dikálium-hidrogén-foszfátban oldunk, 1200 ml acetonnal hígítjuk és 0 C°-on 21 g benzoil-kloriddal reagáltatjuk. A reakcióelegyet 30 percig 0 C°-on és 45 percig 20 C°-on keverjük, miközben a pH-t 50%-os vizes trikálium-foszfát oldat hozzáadásával állandóan 8,5 értéken tartjuk. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson mintegy fele térfogatra betöményítjük, etil-acetáttal mossuk, 20%-os vizes foszforsawal 2,0pH-ra megsavanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot acetonból átkristályosítva N-benzoil-cefalosporin C-t kapunk. Olvadáspont: 117-119 C°, vékonyréteg-kromatogram (szüikagél): Rf = 0,37 (rendszer: n-butanol, ecetsav, víz 75 : 7,5 : 21), és Rf = 0,08 (rendszer: etil-acetát, piridin, ecetsav, víz 62:21 : 6 : 11). 4,7 g N-benzoil-cefalosporin C, 85 ml 0,5 mólos vizes dikálium-hidrogén-foszfát és 9 ml dimetil-formamid oldatát 4,7 g alumínium-amalgámmal 45 percig, 6,0 pH-n és 45 C°-on keverjük, miközben a pH-t 20%-os vizes foszforsav hozzáadásával állandó értéken tartjuk. Az elegyhez 100 ml jeget adunk, hideg etil-acetátot rétegzünk fölé és tömény foszforsawal 2,0pH-ra beállítjuk. Az elegyet nátrium-kloriddal telítjük, a szerves réteget elválasztjuk és a vizes fázist kétszer etil-acetáttal mossuk. A telített, vizes nátrium-klorid oldattal mosott és nátrium-szulfáton szárított, egyesített szerves extraktumokat csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot kristályosítás céljából etil-acetátban felvesszük, lassan 15 ml 2 :3 arányú etil-acetát és hexán eleggyel hígítjuk, -5C°-on 2 órai állás után szűrjük, és 1:4 arányú etil-acetát és dietil-éter elegyből való kristályosítással 70-(5-benzoil-amino- 5 -k arboxi-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4a-karbonsavat kapunk. Olvadáspont: 82-89 C° (bomlik), vékonyréteg-kromatogram (szüikagél): Rf = 0,53 (rendszer: n-butanol, ecetsav, víz 75:7,5:21) és Rf = 0,08 (rendszer: etil-acetát, piridin, ecetsav, víz 62:21 :6:11). Az előbbiekben alkalmazott alumíniumamalgámot a következő módon állítjuk elő: 3,3 g alumíniumpor és 100 ml 50%-os vizes nátrium-hidroxid oldat elegyét 30 másodpercig rázzuk, a felső folyadéktól dekantáljuk és háromszor 300 ml vízzel mossuk. A maradékot 3 percig 5 130 ml 0,3%-os vizes higany(II)4clorid oldattal kezeljük és háromszor 300 ml vízzel mossuk. Az egész kezelést mégegyszer megismételjük és az alumíniumamalgámot végül háromszor tetrahidrofuránnal mossuk. A termék reakcióedénybe való átvite-10 léhez 15 ml etil-acetátot használunk. 2,3 g 7/3-(5-benzoü-amino-5-karboxi-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4a-karbonsav és 25 ml dioxán oldatához 10 perc alatt 10 ml n-pentánban oldott 15 2,5 g difenil-diazo-metánt csepegtetünk. A reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, a felesleges difenil-diazo-metánt jégecet becsepegtetésével elbontjuk és az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 80 g szilikagélen kro-20 matografáljuk, a 7/3-(5-benzoil-amino-5-difenil-metoxi-karbonil-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4a-karbonsav-difenil-metil-észtert 3: 1 arányú toluol és etil-acetát eleggyel eluáljuk, majd etil-acetát és ciklohexán elegyből átkristályosítjuk. 25 Olvadáspont: 180-181 C°, vékonyréteg-kromatogram (szüikagél): Rf = 024 (rendszer: toluol és etil-acetát 2:1), ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes 30 etanolban): jellemző sávok nincsenek, infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): 35 jellemző sávok 5,66 in, 5,76 ß, 5,95 ß, 6,03 ß, 6,64 ß és 6,70 ß. 19. példa 40 0,263 g 7(?-(5-benzoü-amino-5-difenU-metoxi-karbonü-valeril-amino)-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenü-metü-észter és 13 ml metilén-klorid oldatát -10C°-ra hűtjük, 0,132 ml piridint és 3,52 ml 45 8%-os foszfor-pentaklorid metüén-kloridos oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet 1 óra hosszat -10C°-on keverjük, majd -30C°-ra hűtjük, 2,2 ml —30 C°-ra hűtött metanolt gyorsan hozzáadunk, és 30 percig -10 C° és -5 C° közötti hőmérsékleten 50 tovább keverjük. A reakcióelegyhez ezntán 6,5 ml 0,5 mólos vizes kálium-dihidrogén-foszfát oldatot adunk, 5 percig szobahőmérsékleten keverjük és a fázisokat elválasztjuk. A vizes fázist metüén-kloriddal mossuk, az egyesített metilénkloridos fázisokat 55 tömény, vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot metanolban oldjuk és az oldathoz gyenge zavarosodásig, dietil-étert adunk, Ilyen módon a 7/3-amino-3-metoxi-3-cefem-4-kar-60 bonsav-difenil-metil-észtert, mint amorf csapadékot kapjuk. • Vékonyréteg-kromatogram (szüikagél): Rf = 0,17 (rendszer: etil-acetát, előhívás jódgőz-65 zel), 27
