168994. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszeudo-di- és triszacharidok előállítására
15 168994 16 dunk 10 ml vízmentes tetrahidrofuránban, és az oldatot 0°-ra hűtjük. 6,67 ml 1 mólos tetrahidrofurános diboránoldatot csepegtetünk hozzá keverés közben, és a keveréket 18 óra hosszat 7°-on tartjuk. A reagens feleslegét elbontjuk víznek a pezsgés megszűntéig való hozzácsepegtetésével. Az oldatot bepároljuk, és benzollal együtt elűzzük az oldószert. Száraz amorf terméket kapunk. Ezt hozzáadjuk 0,66 g nátriumhoz 40 ml cseppfolyós ammóniában —70°-on, és a keveréket 2 óra hosszat keverjük. A reakciót víz hozzácsepegtetésével megállítjuk, és az ammóniát éjjelen át 25°-on elpárologni hagyjuk. A barnás színű maradékot feloldjuk 70 ml jeges vízben, és közömbösítjük előmosott Amberlite IRC 50 gyantával. 2 óra múlva a gyantát egy oszlopra visszük és 1,5 liter vízzel mossuk, majd a gentamicin X2-t 1,5 n ammóniumhidroxiddal kimossuk. A bázisos eluátumot bepároljuk, és a kapott üvegszerű anyagot 110 cm magas és 2,5 cm átmérőjű kovasavgéloszlopon kromatografáljuk, eluensként kloroform-metanol-amóniumhidroxid-oldat alsó fázisát használva. A gentamicin X2 -t és a 2'-N-etilgentamicin X2 -t szűrőn elválasztjuk, az elsőt átbocsátjuk Amberlite IR 401S gyantán, és liofilizálva 34 mg színtelen amorf anyagot kapunk. A 2'-N-etilgentamicin X2 -t kovasavgéloszlopon ugyanazzal az eluenssel kromatografáljuk, majd átbocsátjuk Amberlite IR 401S gyantán, és liofilizáljuk. Mindkét vegyületnek az első példában már közölt fizikai tulajdonságai vannak. b) 450 mg 0-[2,3,4,6-tetra-0-acetil-2-dezoxi-2--oximino-a-D-glukopiranozil-(l-»4)]-5,2',4'-tri-N-karbobenzoxi-garamint feloldunk 12 ml vízmentes tetrahidrofuránban, és az oldatot 0°-ra hűtjük. Hozzácsepegtetünk 7,75 ml 1 mólos tetrahidrofurános diboránoldatot, és a keveréket 18 óra hosszat 7°-on tartjuk. A reagens feleslegét víznek a pezsgés megszűntéig való hozzácsepegtetésével elbontjuk. Az oldatot bepároljuk, és benzol hozzáadása közben elűzzük az oldószert. A kapott száraz amorf termeltet 70 ml jégecetben oldjuk, és 30%-os palládium-szén jelenlétében 25°-on 3,8 att nyomáson 17 óra hosszat hidrogénezzük. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, vízzel mossuk, és a szüredéket szárazra pároljuk, majd benzolt hozzáadva ismét bepároljuk. A maradékot és 5g báriumhidroxidot 50 ml vízben oldjuk, és az oldatot 130°-on visszafolyatás közben 16 óra hosszat melegítjük. Ezután az oldatot lehűtjük, széndioxiddal telítjük, a kicsapódott báriumkarbonátot szűrőre visszük, és vízzel' mossuk. A szüredéket átbocsátjuk Amberlite IR 401S gyantán, az eluátumot bepároljuk, és 110 cm magas és 2,5 cm átmérőjű kovasavgéloszlopon kromatografáljuk, eluensként 1:1:1 arányú kloroform-metanol-ammóniumhidroxid-oldat alsó fázisát használva. így 24 mg gentamicin X2-t és 2'-N-etilgentamicin X2 -t kapunk liofilizálás után színtelen szilárd anyagként. Mindkét vegyületnek azonosak a tulajdonságai az 1. példában kapott vegyületekével. c) 500 mg O-[2,3,4,6-tetra-0-acetil-2-dezoxi-2--oximino-a-D-glukopiranoziKl^j-S^'^'-tri-O-acetü-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-gararnint 20 ml vízmentés tetrahidrofuránban oldunk, és 4,18 ml 1 mólos tetrahidrofurános diboránoldattal redukáljuk. A redukált termékhez 40 ml 1 :1 arányú vizes dioxánt adunk, amely 2g báriumhidroxidot tartalmaz, és az oldatot visszafolyatás közben 17 óra hosszat 130° -on melegítjük. Ezt az oldatot Amberlite IRC 50 gyantával semlegesítjük, és a gyantát egy osz-S lopba töltjük. Az oszlopot vízzel mossuk, majd a gentamicin X2-t 1,5 n vizes ammóniumhidroxiddal eluáljuk. A bázisos eluátumot bepároljuk, és a fent leírt módon kovasavgéloszlopon kromatografáljuk. így 50 mg gentamicin X2 -t és 2'-N-etilgentamicin 10 X2 -t kapunk. A termékek azonosak az 1. példában előállítottakkal. d) 500 mg 0-[2,3,4,6-tetra-0-acetil-2-dezoxi-2--oximino-a-D-glukopiranozil-(l-»4)]-5,2',4, -tri-0-acetil-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamint 20 ml vízmen-15 tes tetrahidrofuránban a fent leírt módon 4,18 ml 1 mólos tetrahidrofurános diboránoldatban redukálunk. A redukált terméket 2g nátriumhidroxidot tartalmazó 40 ml 1 :1 arányú dioxánban oldjuk, és az oldatot 17 óra hosszat 130°-on visszafolyatás 20 közben melegítjük. A reakcióterméket a c) szakaszban leírt módon feldolgozva 90 mg gentamicin X2 -t és 2'-N-etilgentamicin X 2 -t kapunk. A termékek azonosak az 1. példában készültekkel. 4. példa 1,5 g 2'-0*cetil-l ,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamint 100 ml vízmentes toluolban oldunk, és hozzá-30 adunk 8,6 g Drieritet (frissen őrölt és fonó lemezen kihevített vízmentes kalciumszulfát), 0,83 g higanycianidot és 1,25 g 3,4,6-tri-0-acetil-2-amino-2-dezoxi-2-N-(2,4-dinitro-fenil)-a-E>-glukopiranozilbromidot, és a keveréket 24 óra hosszat 110°-on 35 melegítjük. Az oldatot lehűtjük, kovaföldön átszűrjük, és a szűrőlepényt etilacetáttal mossuk. Az egyesített szüredéket bepároljuk, 300 ml etilacetátban oldjuk, háromszor 100 ml 20%-os káliumbromid-oldattal, majd háromszor 100 ml vízzel mos-40 suk, magnéziumszulfáton szárítjuk, szűrjük, és bepároljuk. A maradékot 100 g kovasavgéloszlopon kromatografáljuk eluensként 1% metanolt tartalmazó 1 :1 tértbgatarányú benzol-éter-elegyét használva, így 838 mg 0-[3,4,6-tri-0-acetil-2-amino-2-45 -dezoxi-2-N-(2,4-dinitro-fenfl)-a-D-gliikopiranozil<l->4)]-2, -0-acetÜ-l,3,3 , -tri-N-karbobenzoxi-garamint kapunk. Ezt a terméket 95%-os vizes etanolból átkristályosítjuk. Olvadáspontja 128-130°. Elemi összetétel (%): C57 H 66 N 6 0 2 4 képlet 50 alapján számított: C =56,16, H =5,46, N = 6,89, talált: C =56,48, H =5,17, 55 N = 6,88. [a]fj6 +98,0° (kloroformban) "max (nujol): 3448, 3333, 1754-1709, 1618, 1592,1527 cm-1, 60 5 (CDCI3-CD3OD, 3:1) t: 1,18 (3H, széles szingulett, 4"-CH3), 1,85, 2,02, 2,08, (12H, széles szingulett, -OAc), 2,95 (3H, széles szingulett, 3"-CH3 ), 7,33, 7,38 (16H, széles szingulett, -CH2 -C 6 H S és DNP) és 8,25, 9,03 ppm (2H, 65 széles DNP). 8
