168902. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L-triptofán és származékai folyamatos fermentációs előállítására

MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1973. II. 02. (BO-I412) Svédországi elsőbbsége: 1972. II. 03. (1231/1972) Közzététel napja: 1976. III. 27. Megjelent: 1977. IV. 30. 168902 Nemzetközi osztályozás: C 07 D 209/20, C 07 B 29/02 Feltalálók: Paulsson Lars-Erik vegyész, Ohlsson Áke Willard vegyész, Wiberger Lars Ingvar vegyész, Karlskoga, Svédország Tulajdonos: Aktiebolaget Bofors, Bofors, Svédország Eljárás L-triptofán és származékai folyamatos fermentációs előállítására 1 A találmány tárgya eljárás L-triptofán és származékainak folyamatos fermentációs előállítására. A triptofán- és triptofán-származékok előállítására szolgáló szintetikus módszerek bonyolultak és költségesek, ezért a növényi fehérjék adalék- 5 anyagaként felhasználásra kerülő triptofán nagyüzemi termelésére a gazdaságosabb fermentációs módszereket alkalmazzák. A triptofán különböző élesztő- és baktériumféleségek felhasználásával végzett fermentációs elő- 10 állítására igen sok eljárás ismeretes. A 3 133 868 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint (Chem. Abstr. 61, 2442 d és 15316 a) az L-triptofánt DL-a-hidroxi-ß-indolo-propionsavból állítják elő Pseudomonas xantha 15 mikroorganizmus felhasználásával. 48 órán át; 30C°-on végzett szakaszos tenyésztés után az L-triptofánt kb. 70% hozammal kapják. Az 1995/65 sz. közzétett japán szabadalmi bejelentés (Chem. Abstr. 62, 15390 c) eljárást ismertet L-triptofán 20 előállítására a-amino-ß-karboximetil-ß-indolil-propionsavból, Escherichia coli mikroorganizmus jelenlétében végzett szakaszos fermentációval. Mindkét módszer közös hátránya, hogy bonyolult szerkezetű kiindulási anyagot igényel, és csak szakaszosan 25 valósítható meg. Az 1 222 904 sz. brit szabadalmi leírás szerint az L-triptofánt indolból állítják elő, Hansenula-, illetve Candida-nembeli mikroorganizmusok felhasználásával. A legcélszerűbb mikroorganizmus törzs- 30 nek a Hansenula anomala KY 5154 (ATCC 20170), illetve a Candida tropicalis ATCC 15114 bizonyult. Az eljárás hátránya, hogy csak szakaszosan valósítható meg, és a maximális hozam viszonylag hosszú ideig (kb. 3 napig) tartó tenyésztés után érhető el. A 3 036 958 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint a triptofánt indol-piruvátból állítják elő mikrobiológiai úton. Az eljárás a triptofánt 23-68%-os hozammal szolgáltatja, és nehezen hozzáférhető kiindulási anyagot igényel. Annak oka, hogy a triptofán fermentációs előállítására folyamatos módszert eddig még nem sikerült kidolgozni, feltehetően az, hogy a triptofán bomlása komoly problémát okoz. További hátrányt jelent, hogy a folyamatos tenyésztés során fokozottan előtérbe kerül a nem kívánt mutánsok képződésének veszélye. Mindezek miatt eddig még nem sikerült folyamatos fermentációs eljárást kidolgozni triptofán előállítására, bár ennek műszaki és gazdasági előnyei rendkívül jelentősek lennének. A^tálálmány szernti eljárással az L-triptofánt és "siffmazékait egyszerű és gazdaságos folyamatos fermentációs úton állíthatjuk elő. Az általunk kidolgozott eljárás gazdaságossága oly nagy mértékű, hogy az így előállított vegyületek akár élelmiszervagy takarmány-adalékként is alkalmazhatók. A találmány szerinti eljárásban mikroorganizmusként Candida humicola-izolátumot használunk fel. Ezt a mikroorganizmus-törzset különféle 168902