168890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
17 168890 18 etilacetát és víz elegyében felvesszük. A szerves fázist hidrogénkarbonát-oldattal és vízzel mossuk, szárítjuk, és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot metanol és éter elegyéből kristályosítjuk. A következő peptideket kapjuk: 1. Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-OMe 2. Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-OH 3. Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-NH2 4. Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-(N-feniletil)-amid Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol—etanol elegyben határoztuk meg. Hozam: 85 és 95% között. G) Az E) lépésben kapott peptidek kondenzációja dezamino—Met-tel 3. H-D-Met-Glu-His-(N-fenüetü)-amid Rf = 0,36 4. H-D-Met-Glu-His-Phe-NH2 Rf = 0,33 5 5. H-D-Met-Glu-His-Phe-OCi i H2 3 Rf = 0,39 6. dezamino-Met-Glu-His-Rf = 0,42 -Phe-OMe Rf = 0,40 7. dezamino-Met-Glu-His-Rf = 0,14 10 -Phe-OH Rf = 0,31 8. dezamino-Met—Glu—His— Rf = 0,20 -Phe-NH2 Rf = 0,38 9. Dezamino-Met-Glu-His-Rf = 0,40 -(N-feniletil)-amid Rf = 0,42 15 Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben határoztuk meg. 20 L) Szulfoxidok előállítása 30 mg H-Met-Glu-His-Phe-OH 2,5 ml ecetsavval készített oldatához 15/Ltl 30%-os hidrogénperoxidot adunk. Az elegyet az 1. példában leírt aziddá alakítunk, majd a kapott azidot az E) lépés- 25 módon dolgozzuk fel. A maradékot 5 ml terc-butaben előállított peptidekkel kapcsoljuk. A következő nol-víz elegyben (1 :1) vesszük fel, és az oldatot 5 mmól dezamino-metionil-hidrazidot az F) lépésben leírt módon izoamilnitrites reakcióval peptideket kapjuk: 1. dezarnino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-OMe 2. dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-OH 3. dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-NH2 4. dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-(N-feniletil)-amid liofilizáljuk Hasonlóan alakítjuk át a K)l., K)2. és K)7. lépésben kapott peptideket a megfelelő szulfoxi-Rf = 0,36 30 dokká. A következő vegyületeket kapjuk: Rf = 0,ll 1. H-Met(-» 0)-Glu-His-Rf = 0,17 -Phe-OH 35 2. H-D-Met(-> 0)-Glu-His-Rf = 0,34 -Phe-OH 3. H-D-Met(-K))-Glu-His-Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú -Phe-OMe benzol-etanol elegyben határoztuk meg. 4. dezamino-Met(-* O)—Glu-His-40 -Phe-OH Rf = 0,26 Rf = 0,26 Rf = 0,33 Rf = 0,29 H) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-OCi ,^3 0,25 g, az F)2. lépésben előállított Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-OH-t 1,4 ml undekanol és 45 0,3 g Dowex X-8 • HCl (bázikus gyanta) elegyéhez adunk, és az elegyet 7 napig szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet szűrjük, és a szűrletet vákuumban bepároljuk. Az undecilésztert szilikagéles kromatografálással különítjük el, eluálószerként 50 9 :1 arányú benzol-etanol elegyet használunk. A termék Rf-értéke 0,68 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol—etanol elegyben). Hozam: 65%. K) Az F), G) és H) lépésben kapott peptidek védőcsoportjainak eltávolítása 55 A védőcsoportok eltávolítását a 2. példa G) lépésében leírt módon végezzük. A következő peptideket kapjuk: *° l.H-D-Met-Glu-His-Phe-OH 2. H-D-Met-Glu-His-Phe-OMe Rf = 0,27 Rf = 0,35 65 Az Rr értékeket 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin-ecetsav-víz elegyben, szilikagél-rétegen határoztuk meg. 6. példa Val-Glu-His-Phe peptid előállítása A) Boc-Val-Glu(OtBu)-His-Phe-NH2 0,33 g Boc-Val-OH 20 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0,81 g, az 5. példa E)3. lépésében előállított H-Glu(OtBu)-His-Phe-NH2 -t adunk, és az elegy pH-ját 7,2-re állítjuk. Az elegyhez 0,31 g diciklohexil-karbodiimidet adunk, majd 5 órán át 0 C°-on és 20 órán át 20 C°-on keverjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szűrletet 100 ml 0,1 n nátriumhidroxid-oldatba öntjük, és az elegyet 1 órán át 0 C°-on keverjük. A csapadékot kiszűrjük, szárítjuk, és etilacetát—éter elegyből kétszer átkristályosítjuk. 0,51 g terméket kapunk, op.: 137 C° (bomlás), Rf = 0,27 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). 9
