168890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
11 168890 12 D) Boc-D-Met-Glu(NH2 )-His-OH 1 g fenti tripeptid-észtert melegítés közben 20 ml 1:1 arányú dioxán-víz elegyben oldunk. Az oldatot 20C°-ra hűtjük, és l,9mflkmólekviva- 5 lens báriumhidroxidot adunk hozzá. Az elegyet 30 percig keverjük, majd pH = 5,4 értékre semlegesítjük, és óvatosan bepároljuk. A maradékot metanolban oldjuk, az oldatot szűrjük, és a szűrletet etilacetáttal hígítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük *° és metanol és etilacetát elegyéböl átkristályosítjuk. A termék Rf-értéke 0,59 (szilikagél-rétegen, 10 :4 :5 arányú amilalkohol-izopropanol-víz elegyben). Hozam: 70%. 15 E) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-NH2 lg, a 2.példa A)lépésében előállított Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-OMe-t 25 ml ammóniával 20 telített hideg metanolban oldunk. Az oldatot 25 órán át keverjük, majd az ammóniát elpárologtatjuk. A maradékot metanolban felvesszük, és az oldatot éterrel hígítjuk. A kivált csapadékot leszűrjük. 25 A 72-75 C°-on olvadó termék Rf -értéke 0,43 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). Hozam: 85%. Peptid Kiind. anyag Rf dezamino-Met—Glu—His— -OH • HAc 2.F) 0,21 H-D-Met-Gln-His-OH • HAc 2.D) 0,17 H-D-Met-Glu-His-NHj-HAc 2.E) 0,16 F) Dezamino-Met-Glu(OtBu)-His-OH 30 A 2. példa B) lépésében kapott észtert a 2. példa C) lépésében leírt módon hidrolizáljuk. A termék Rf-értéke 0,16 (szilikagél-rétegen, 5:3:2 arányú imilalkohol-piridin-víz elegyben). 35 G) Az A)-F) lépésekben kapott peptidek védőcsoportjainak lehasítása 100 mg peptidet 5 ml 90%-os trifluorecetsavban 40 oldunk. Az oldatot 1 órán át állni hagyjuk, majd az oldószert lepároljuk, a maradékot éterrel kétszer eldörzsöljük, és szilárd káliumhidroxid fölött szárítjuk. A trifluoracetát-sót 20 ml 1 :1 arányú terc-butanol-víz elegyben oldjuk, az oldathoz acetát-formájú Dowex X-8 ioncserélő gyantát adunk pH = 5,4 értéke eléréséig, és az elegyet keverjük. A gyantát kiszűrjük, és a szűrletet liofilizáljuk. A fehér maradékot szilárd foszforpentoxid fölött tároljuk. Hozam: 70 és 85% között. A következő peptidek acetátjait kapjuk: 45 50 Kiind. 55 Peptid anyag Rf H-D-Met-Glu-His-OMe • HAc 2.A) 0,18 60 H-D-Met-Glu-His-OH- HAc 2.C) 0,14 dezamino-Met-Glu-His-OMe • HAc 2.B) 0,25 65 H) H-D-Met(->- 0)-Glu-His-OH 25 mg, a 2. példa G) lépésében előállított H-D-MétHGlU-His-OH 2,5 ml ecetsavval készített oldatához 15/d 30%-os hidrogénperoxid-oldatot adunk. Az elegyet az 1. példában leírt módon kezeljük. A maradékot 10 ml 1:1 arányú terc-butanol-víz elegyben felvesszük, és az oldatot liofilizáljuk. A termék Rf-értéke 0,12 (szilikagél-rétegen, 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin-ecetsav—víz elegyben). Hozam: 98%. K) Dezamino-Met(-> 0)-Glu-His-OH A 2. példa G) lépésében előállított dezamino-Met-Glu-His-OH-t a 2. példa H) lépésében leírt módon oxidáljuk. A tennék Rf-értéke 0,18 (szilikagél-rétegen, 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin—ecetsav—víz elegyben). 3. példa A-Glu-His-általános képletű peptidek előállítása [A = H-Val, H-Gly, H-Ala, Hn3-Ala vagy H-(a—Me)Ala] A) Boc-Val-Glu(OtBu)-OMe 3,26 g (15 mmól) Boc-Val-OH 20 ml metilénkloriddal készített oldatához 1,73 g N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Az oldatot —20 C°-ra hűtjük, 3,09 g diciklohexil-karbodiimid 20 ml metilénkloriddal készített hideg oldatát adjuk hozzá, és a kapott oldatot 1 órán át -20 C°-on, majd 20 órán át +20 C°-on keverjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot 30 ml dimetilformamidban oldjuk, és az oldathoz 7,33 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe-t [Kappel: Helv. 44, 1991 (1961) módszerével előállított termék] és 1,4 g 10%-os palládium-csontszén katalizátort adunk. Az elegybe 5 órán át hidrogént vezetünk, majd az elegyet éjszakán át keverjük. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A maradékot vizes etilacetátban oldjuk, a szerves fázist vizes citromsav-oldattal, vízzel, vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldattal és ismét vízzel mossuk, szárítjuk, és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot etilacetát és petroléter elegyéböl átkristályosítjuk. 3,59 g 117-119 C° olvadó terméket ka-6
