168883. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-szubsztituált- 4-hidroxi-ciklopentán-1,3-dionok előállítására
9 168883 10 Példa neve száma az ATCC katalógusban 43 P. sclerotiorum 10494 44 P. granulátum 8272 45 P. terlikowskii 9438 46 P. italicum 10129 47 Aspergillus ustus 16801 48 A. restrictus 16912 49 A. unguis 10073 50 A. terreus 1012 51 A. ornatus 16921 52 A. citrisporus 16920 53 A.janus 14042 54 Thielavia sepedonium 11814 55. példa 30 A 2-(6'-etoxikarbonil-hexil)-4R-hidroxi-ciklopentán-1,3-diont (VIII képletű vegyület) a VI képletű vegyületből állítjuk elő 35 A) Fermentáció: Agarlemezen tenyésztett Schizosaccharomyces pombe (CBS 353 ATCC .2476) egyhetes tenyészetét 40 5 ml 0,85%-os só-oldatban szuszpendáljuk. A szuszpenzió 2 ml-es részleteivel oldjuk le a 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban levő 50-50 ml szójabab-dextróz táptalajt. (Fi lépés). Az edényeket 25 C°-on 24 óra hosszat rázzuk (250 fordulat/perc, 45 2" szög). Ezt követően a térfogat 10%-át egy 2 literes Erlenmeyer-lombikban levő 500 ml szójabab-dextróz táptalajhoz adjuk. (F2 lépés). Az elegyet 24 óra hosszat rotációs rázógépen inkubáljuk, majd 250 mg 2-(6'-etoxikarbonil-hexil)-ciklo- 50 • pentán-1,3,4-trion (III képletű vegyület) 2 ml dimetilformamiddal készült oldatát adjuk az elegyhez. [Katsube és Matsui, J. Agr. Biol. Chem. 33, 1078. (1069)]. Az F2 lépéshez tartozó edényeket további 24 óra hosszat az Ft lépésnél leírt körül- 55 menyek között inkubáljuk. B) Elkülönítés 24 órával a trión vegyület hozzáadása után az 60 élesztő-sejteket centrifugálással eltávolítjuk. A felülúszó pH-ját 6n sósav-ooldat segítségével 2-re állítjuk, majd 500-500 ml etilacetáttal háromszor extraháljuk. Az etilacetátos fázist nátriumszulfáttal vízmentesítjük, majd szárazra pároljuk. Az olajos 6S maradékot 2 ml benzol-etilacetát 1 :1 arányú elegyében oldjuk fel, majd kovasav és Celite 85:15 arányú elegyével töltött oszlopon 2,5 x 25 cm) kromatografáljuk. Az oszlopot 300 ml etilacetát-benzol 1 :1 arányú elegyével és 300 ml etilacetáttal eluáljuk. 7 ml-es frakciókat fogunk fel. A 19-31. frakciókat egyesítjük és szárazra pároljuk. 39 g VIII képletű vegyületet kapunk. Op.: 83-85 C* [aß3:14° (C, =0,47, CHC13). X#í x 272 m/i (e = 20 000). A találmány szerinti eljárással optikailag aktív 2-szubsztituált 4-hidroxi-ciklopentán-l,3-dion-t kapunk, az átalakítás 70-80%-os hozammal megy végbe. A reakcióban résztvevő anyagok arányának megváltoztatása nem befolyásolja lényegesen a hozamot. A példákban felsorolt arányok a célvegyület szempontjából nem döntő jelentőségűek. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás optikailag aktív (X) általános képletű 2-szubsztituált-4-(R>hidroxi-ciklopentán-l ,3-dion vegyületek előállítására, ahol R jelentése (l-4szénatomszámú)-alkoxikarbonil-(4-8 szénatomszámú)-alkil-csoport, azzal jellemezve, hogy egy Saccharomyces cerevisiae ATCC 560, Hansenula anomala ATCC 580, Geotrichum candidum ATCC 755, Aspergillus terreus ATCC 1012, Paecilomyces varioti ATCC 1114, Penicillium expansum ATCC 1117, Endomycopsis fibuligera ATCC 2080, Candida krusei ATCC 2159, Schizosaccharomyces pombe ATCC 2476, Saccharomyces cerevisiae ATCC 2601, Rhodotorula paliida ATCC 2776, Phycomyces blakesleeanus ATCC 6200, Alternaria tenuis ATCC 6663, Zygorhynchus heterogamus ATCC 6743, Penicillium caseicolum ATCC 6986, Penicillium roqueforti ATCC 6987, Dipodascus uninucleatus ATCC 7445, Penicillium granulátum ATCC 8272, Gliocladium roseum ATCC 8684, Trichoderma viride ATCC 8751, Penicillium duclauxi ATCC 9121, Penicillium claviforme ATCC 9257, Penicillium terlikowskii ATCC 9438, Mucor ramannianus ATCC 9515, Penicillium purpurogenum ATCC 9777, Kluyveromyces fragilis ATCC 10022, Aspergillus unguis ATCC 10073, Gliocladium fimbriatum ATCC 10098, Byssochlamys fúlva ATCC 10099, Penicillium italicum ATCC 10129, Absidia blakesleeaana ATCC 10148b, Penicillium multicolor ATCC 10471, Penicillium sclerotiorum ATCC 10494, Gliocladium vermoeseni ATCC 10522, Gliocladium catenulatum ATCC 10523, Endomycopsis javanénsis ATCC 10628, Thielavia sepedonium ATCC 11814, Memnoniella echinata ATCC 11973, Kluyveromyces lactis ATCC 12425, Kluyveromyces marxianus ATCC 12708, Dipodascus albidus f. minor ATCC 12934, Aspergillus janus ATCC 14042, Dipodascus aggregatus ATCC 14625, Penicillium frequentans ATCC 14973, Fusarium decemcellulare ATCC 16556, Aspergillus ustus ATCC 16801, Aspergillus restrictus ATCC 16912, Aspergillus citrisporus ATCC 16920, Aspergillus ornatus ATCC 16921, Stachybotrys chartarum ATCC 18846, Penicillium pseudostromaticum ATCC 18918, Penicillium striatisporum ATCC 5
