168721. lajstromszámú szabadalom • Vizuális módszer a szifilisz és egyéb, treponémák által okozott betegségek kimutatására
168721 3 ' 4 rendszereket vagy látexeket alkalmazó módszerek. Minthogy a találmány szerinti készítményben nincsenek szilárd részecskék, amelyek a fény szóródását okoznák, ezért könnyebben látható a próba; ha ugyanis pozitív szérumot használunk sötét színű a próba eredménye. Ez a próba tehát pontosabb és megbízhatóbb. Ha a találmány szerinti módszer szerint az új antigén reagenst antitestet tartalmazó szérummal reagáltatjuk, komplex képződik, amely az antigén reagens komponenseivel koacervátumot képez. Pozitív próbát sötét színű pelyhek jeleznek világos háttéren, azaz fehér lemezen. Amint a fentiekben már említettük, a találmány olyan új antigén készítményt nyújt, amely szifiliszes és egyéb, treponémák által okozott megbetegedések agglutinációs próbával történő kimutatására szolgál. Az antigén készítmény két fő alkotórészből áll, az első az ismert V. D. R. L. vagy U. S. R. - 0,03 súlyszázalék kardiolopinből, 0,9 súlyszázalék koleszterinből és 0,21 ±0,01 súlyszázalék lecitinből álló -antigén reagens, amely a 3 564 089 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból ismert. Az új antigén készítmény második komponense valamely I, II vagy III képletű színezék vagy I és II vagy I és III képletű színezék keveréke. A színezékek és azok keverékei a találmány szerinti új antigén készítményben az irodalomból ismert oldószerekkel, pufferokkal stb. együtt vannak jelen (lásd az említett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást). Ezek az oldószerek, pufferek stb. önmagukban nem képezik a találmány egy részét, az ismert antigén készítményekben, például már említett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban ismertetett készítményekben leírt módon alkalmazzuk őket. A találmány szerinti új antigén készítmény komponenseinek koncentrációja körülbelül 0,5 súlyszázalék - körülbelül 25 súlyszázalék standard V. D. R. L. vagy U. S. R. antigén és körülbelül 0,0001-0,2 súlyszázalék színezék, ahol a súlyszázalékok az oldószereket, például vizet, alkoholt stb. és puffert tartalmazó elegy összsúlyára vonatkoznak. Ha az I, II és III képletű színezékek keverékeit alkalmazzuk, a keverék össz-mennyiségének százaléka az összmennyiséghez képest a megadott. Azonban a két színezék egymás közötti aránya körülbelül 9 :1 és körülbelül 1 : 9 közötti. A „standard V. D. R. L és U. S. R. antigén" kifejezés olyan készítményeket jelöl, amelyeket a Manual of Teste for Syphilis (1969. United States Department of Health, Education and Welfare, Public Health Service, National Communicable Disease Center) című szakkönyvben írtak le. A találmány szerinti új antigén készítményekben egy harmadik komponens is jelen lehet. Ennek a komponensnek, amely egy flokkulálószer, nem kell feltétlenül jelen lennie. A flokkulálószert körülbelül 0,0001-0,05 súlyszázalék mennyiségben alkalmazhatjuk az új antigén készítmény, azaz a standard antigén és a színezék összsúlyára vonatkoztatva; flokkulálószerként ismert flokkuláló hatású anyagogat, így viniiimidazolint, akrilamidot, akrilsavat, akrilnitrilt, sztirolt, maleinsavanhidridet stb., azok polimer jeit és egymással vagy egyéb kopolimerizálható monomerekkel alkotott kopolimerjeit alkalmazhatjuk. A gyakorlatban a flokkulálószer az antigén-antitest komplex lecsapását és koacerválását, és ezáltal 5 a pozitív próba vizuális kimutatását segíti. A találmány szerinti antigén készítmények elkészítéséhez standard V. D. R. L. antigént használhatunk. A színezéket vagy színezékeket hozzáadhatjuk a V. D. R. L. antigén alkoholos oldatához vagy a 10 pufferolt antigén reagenshez. Ha az alap-készítményhez flokkulálószert is kell adni, azt szintén enyhe keverés közben adagoljuk ugyanakkor. Az U. S. R. antigén-színezék készítményt úgy állítjuk elő, hogy először pufferban V. D. R. L. anti-15 gén szuszpenziót készítünk. Ezt a rendszert ezután rozsdamentes csőben 15 percen át centrifugáljuk körülbelül 2000 g gyorsuláson. A folyadékot dekantáljuk és a cső oldalait szárazra töröljük. A leülepedett részt U. S. R. szuszpendáló közegben szusz-20 pendáljuk, amely közeg monokáliumfoszfát, nátrium-etil-merkuri-tioszalicilát ^Hs-HgSCe^COONa) (mertiolát), kolinklorid és etiléndinitrilotetraecetsav ismert és megfelelő keveréke. A színezéket vagy színezékeket hozzáadhatjuk a V. D. R. 25 L. antigén alkoholos oldatához vagy az U. S. R. antigénhez annak U. S. R. szuszpendáló közegben való szuszpendálása után (lásd az említett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást.) A találmány magában foglalja a vizsgáló lemezt 30 is, amelyre egy flokkulálószert helyeztünk. A vizsgáló lemeznek simának kell lennie, hogy a vizsgálati, eredmények könnyen leolvashatók legyenek. Bár az irodalomban az olvasható, hogy a felületnek ncdvesíthetőnek kell lennie, azt találtuk, hogy ez 35 nem feltétlenül szükséges, csak előnyös, ha a felület nedvesíthető. A lemez készülhet jól kalanderezett papírból vagy kartonból, lehet szívóképes, előnyös azonban, ha az adszorbeáló képesség csak kismértékű. A találmány szerinti módszer egy jellemzője 40 azonban az, hogy a próba attól függetlenül kiértékelhető, hogy a folt nedves vagy száraz, így az eredményt gyorsabban megkapjuk, mint az egyéb módszerek esetén. A lemez lehet laminált papír vagy karton alapú is, amelyet vizet áteresztő vagy vizet 45 át nem eresztő anyaggal vontunk be, például polietilénnel. A papír vagy a bevonat színének azonban olyannak kell lennie, hogy elüssön a próbához felhasznált színezék vagy színezékek színétől. A lemez szerkezete és összetétele alapjaiban azonos a 50 3 074 853 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett lemezzel. A flokkulálószert úgy vihetjük fel a lemezre, hogy a szer oldatát ráhelyezzük a lemezre, majd az oldószert elpárologtatjuk. Az oldószer lehet víz vagy valamely 55 szerves anyag, így metilénklorid stb. Bár a flokkulálószer hajlamos arra, hogy megfelelően rátapadjon a lemezre és így kitűnő eredményeket nyújtson, megfelelő adhézió biztosítása céljából valamely adhézív anyagot szintén felvihetünk előzőleg a lemez-60 re. Alkalmas adhézív anyag erre a célra a métilcellulóz. Ugyanazokat a flokkulálószereket alkalmazhatjuk, amelyeket a közvetlen adagolás esetére a fentiekben már felsoroltunk; és a flokkulálószert általában a vizsgáló lemez felületének egy köralakú 65 felületre visszük fel, ez a felület az, amelyen a vizs-2