168683. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fruktóz-, valamint fruktóz és glukóztartalmú szirup előállítására szál-struktúrákba beépített glukózizomerázok segítségével
5 168683 6 fát-puffert, 60% glukózt, 10~4 M CoCI 2 .6 H 2 0-t, 5 • 10~3 M MgCl 2 -ot tartalmazó oldatot szivattyúzunk át a csövön alulról felfelé 7 milliliter/óra folyási sebességgel. A kifolyó oldat izomerizációs foka 40%. 3. példa 10 gramm amiloglukozidázt, diazim port (Miles) 50 milliliter ion-mentes vízben szuszpendálunk és 20 10 percig rázzuk az aktív fehérje oldásának elősegítése céljából. Az oldatot átszűrjük az oldhatatlan hordozó és a szűrőlepény eltávolítása céljából. A szűrletet és mosófolyadékokat egyesítjük és vákuum alatt 25 C fokon 20 milliliter végső térfogat eléréséig bepároljuk. 15 A kapott oldathoz 20 milliliter glukóz-izomerázt (aktivitás 364 egység/milliliter, fehérje 22 milligramm/milliliter) adunk hozzá. A glukóz-izomeráz és amiloglukozidáz vegyes oldatát az 1. példában leírtak szerint beépítjük 40 gramm 20 cellulóztriacetátba. A képződött 20 gramm rostot párhuzamos szálak formájában 45 C fokon tartott üvegcsőbe (2,5 X 40 cm) helyezzük. Alfa-amilázzal előzetesen elfolyósított kukorica-keményítő 35%-os oldatát 5 • 10~3 M Mg ++ és 25 10-4 M Co ++ ion tartalommal) zárt körfolyamatban szivattyú segítségével a csövön átáramoltatjuk. Mialatt az oldatot az enzim-katalizátor felett áramoltatjuk, egy időben létrejön a dextrin és glukóz hidrolízise, valamint a glukóz és fruktóz izomerizációja; az oldatot bevezetjük egy lombikba, ahol a pH-t ellenőrizzük és 6,5 értéken tartjuk. Folytatjuk az oldat viszszavezetését a körfolyamatba (körülbelül 72 óráig), az optikai forgatóképesség stabilizálása céljából. Az így kapott oldat elemzése 191 milligramm/milliliter glukóz-és 129 milligramm/milliliter fruktóz-koncentrációt mutat, a maradékot di- és oligoszahharidok képezik. Ugyanezt a műveletet ugyanezen rost-mintával 15 napig ismételve az aktivitásban nem mutatkozik értékelhető csökkenés. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás alfa-glükóz enzimatikus izomerizálására fruktóz-, valamint glukóz- és fruktóztartalmú szirupok előállítására, azzal jellemezve, hogy az izomerizációt 10~2 —10 -5 mól koncentrációjú Mg ++ és Co ++ iont tartalmazó oldatban, cellulóz-triacetát szálba épített glukóz-izomeráz enzim vagy adott esetben cellulóz-triacetát szálba épített amil-glukózidáz és glukóz-izomeráz enzim — jelenlétében végezzük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a reakciót 30—70 C fok, előnyösen 40—45 C fok között hajtjuk végre. 3. Az 1. vagy 2. igénypontok szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakcióközeg pH-ját 5—9 között, előnyösen 7 körül tartjuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 77.3949.66-42 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató 3
