168431. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1973. VII. 27. (RI-519) Közzététel napja: 1975. X. 28. Megjelent: 1977. III. 31. 168431 Nemzetközi osztályozás: C 07 C 103/52 Feltalálók: DR. KISFALUDY Lajos vegyészmérnök 30% SCHÖN István vegyész 20% SZIRTES Tamás vegyész 20% NYÉKI Olga vegyész 20% LÖW Miklós vegyész 10% Budapest Tulajdonos: Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt., Budapest Eljárás peptidek előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás peptidek előállítására. A klasszikusnak nevezett peptid szintetikus módszerek töretlen fejlődését bizonyítja, hogy ma már oly nagy mólsúlyú vegyületek, mint a 39 aminosavból felépülő adrenokortikotrop hormon 5 aktív fragmensei, ipari termékek. E területen, úgy tűnik, döntő kérdés a szintézis során a rész-peptidek oldékonysága, mely nagymértékben függ az oldalfunkciós csoportok teljes vagy részleges védésétől. [Medzihradszky K.: A kémia újabb eredményei. Aka- 10 démia Kiadó 1970; E. Wünsch: Angew. Chemie 83, 773 (1971)]. Az elmúlt évtizedben - mint új módszer — különösen az úgynevezett „szilárd fázisú" peptid szintézis módszer [R. B. Merrifield: J. Am. Che. Soc. 85, 2149 (1963)] és ennek továbbfejlesztése állt a 15 kutatás középpontjában. Az első időben forradalminak tűnő módszer fejlesztésével és javításával szinte valamennyi jelentősebb peptidkémiai kutatócsoport foglalkozott és ennek eredményeképpen ma már a fenti elven működő automatizált peptidszintetizáto- 20 rok kereskedelmi termékek. E hatalmas fejlesztő munka során a kutatók számos részproblémát oldottak meg, azonban a módszer „a priori" hibája — nevezetesen a közti termékek tisztítása és ezzel a hibás és csonka szekvenciák kiküszöbölése — ma sem 25 megoldott. A jelenlegi általános vélemény szerint, a módszer 10—15 tagú peptidek szintézisére alkalmas oly módon, hogy naponta gyakorlatilag csak*egy kapcsolás végezhető el. [H. C. Beyerman és mtsai.: Recueü 92,481 (1973); E. Wünsch loc. cit.] . 30 Az oldalfunkciós csoportok védésének és az ezzel kapcsolatos oldékonysági problémáknak megoldására lett volna hivatott az a módszer, amely az egyébként régen ismert Leuchs-anhidridek alkalmazását írja le peptidek lépésenkénti szintézisére [R. G. Denkewalter és mtsai: J. Am. Chem. Soc. 88, 3163 (1966)]. Úgy tűnik azonban, hogy a Leuchs-anhidridek vagy másnéven NCA-aminosavak, az aminosavak túlaktivált képviselői, ami megnyilvánul instabilitásukban, valamint számos mellékreakcióban, mint például az autoacileződés, túlaktiváltság (over reaction) stb. Ezért változatlan az igény egy gyors és egyszerű peptid-szintézismódszer iránt, mely alkalmas egyrészt a szerkezet és hatás összefüggéseinek vizsgálatához nélkülözhetetlen analógok gyors előállítására, másrészt megfelelő továbbfejlesztéssel nagyobb molekulasúlyú peptidek előállítására [H. C. Beyerman és mtsai, loc. cit.]. A találmány olyan új szintézismódszer peptidek előállítására C-terminálisán védett aminosav- vagy peptidészterek N-terminálisán védett aminosav- vagy peptid-pentafluorfenilészterrel történő acilezése, a feleslegben alkalmazott acilezőszer N,N-dimetilaminoetilaminnal történő eltávolítása, a védett közti termék adott esetben izolálás nélküli tisztítása és az N-terminális védőcsoportot szerves oldószerben oldott hidrogén-halogeniddel történő eltávolítása útján, amelynek lényege, hogy a C-terminálisán nem savérzékeny csoporttal védett aminosav- vagy peptidészter acilezését N-terminálisán savérzékeny csoporttal védett i
