168425. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az M 102 jelű metánt oxidáló baktériumtörzs nagy aktivitású tiszta tenyészetének előállítására

7 168425 8 zása érdekében az 1. táblázatban felsorolt vegyületekből a fenti típusú ásványi anyag-tápoldattal 1%-os oldatokat készítünk. A kapott oldatokat beoltjuk a vizsgálandó M 102 metánt oxidáló baktériumtörzs tiszta tenyészetével, majd a mikroorganizmus növekedését Skermann: „A Guide to the Identification of the Genera of Bacteria" (Williams end Wilkins, Baltimore, 1959) c. szakkönyv 217. és következő oldalain leírt módszerrel vizsgáljuk. A kapott eredményeket az 1. táblázatban közöljük. A táblázat jelölései: - Nem hasznosítja a tápanyagot ± kismértékben hasznosítja a tápanyagot + nagymértékben hasznosítja a tápanyagot. 10 Szubsztrátum Szénhidrátok Glükóz Fruktóz Galaktóz Mannóz Ribóz Arabinóz Laktóz Maltóz Szacharóz Keményítő Inulin Cellulóz Alkoholok Metanol Etanol Propanol Butanol Izoamilalkohol Benzol Aldehidek Formaldehid Acetaldehid Benzaldehid Zsírsavak Hangyasav Ecetsav Propionsav Aminosavak Glicin Cisztin Alanin Fenilalanin Általános reakciók Indolképzés Metilvörös-viszgálat Kataláz Oxidáz McCónkey táptalaj Lakmusztej Zselatin-elfolyósítás 3. nap 7. nap 21. nap 15 20 ± + ± 25 + • ± 30 ± 35 40 + + + ± + + 45 + + + 50 55 A táblázat adataiból látható, hogy a vizsgált anyagok, azaz szénhidrátok, alkoholok, aldehidek, zsírsavak és aminosavak közül csak a zsírsavak bomlanak le viszonylag értékelhető mértékben, ezzel szemben a többi anyagot a baktérium egyáltalán nem vagy csak kismértékben hasonlítja. Ennek megfelelően az M 102 baktériumtörzs nagymértékben szubsztrátumspecifikus, azaz metánon kívül alig értékesít más szénforrást. 3. példa Az M 102 baktériumtörzs növekedési jellemzőinek további vizsgálata érdekében meghatározott szerves vegyületekből az 1. példában említett ásványi anyagtápoldattal 1%-os oldatokat állítunk elő. A kapott oldatokat beoltjuk a vizsgálandó M 102 törzs tiszta tenyészetével, és az elegyet fermentorban önmagában ismert módon tenyésztjük (optimális pH = 7, optimális hőmérséklet = 27 C; a tenyésztést rázás közben végezzük). összehasonlítás céljából olyan növekedési vizsgálatokat végzünk, amelyekben az ásványi anyag-tápoldathoz nem adunk szerves vegyületet, és ehelyett a beoltott táptalajt 1 rész metánból és 1 rész levegőből álló gázeleggyel kezeljük. A baktériumnövekedést zavarosságméréssel vizsgáljuk. A mérést 420 nm hullámhosszon végezzük, vizsgálandó anyagként a 3,5, ill. 7. nap után kivett mintákat használjuk. A kapott eredményeket grafikusan értékeljük. Az így kapott növekedési görbéket az 5. ábrán tüntettük fel. Az alábbiakban a növekedési kísérletekhez felhasznált szerves vegyületeket, valamint az 5. ábrán feltüntetett megfelelő növekedési görbék jelzéseit ismertetjük. Görbe jelzése az Szubsztrátum 5. ábrán Metán 1 Húskivonat 2 Élesztőkivonat 3 Metanol 4 Pepton 5 Glicerin 6 Az 5. ábrán grafikusan feltüntetett eredmények azt igazolják, hogy az M 102 törzs gyakorlatilag metánspecifikus. 4. példa Az M 102 metánt oxidáló baktériumtörzs további jellemzőinek meghatározása érdekében a 2. táblázatban felsorolt, önmagában ismert festési kísérleteket hajtjuk végre. A bakteriológiában szokásos festési módszereket pl. Jankó és Dickscheit; „Handbuch der mikrobiologischen Laboratoriumstechnik" c. szakkönyvének (Verl Th. Steinkopff, Dresden, 1957) 128. és következő oldalai ismertetik. Az eredményeket a 2. táblázatban ismertetjük. 60 + + + + + + 65 2. táblázat Festési módszer Eredmény Gram-festés negatív Savstabilitás vizsgálata negatív Spórafestés negatív Csillófestés negatív Tok-festés negatív 4