168378. lajstromszámú szabadalom • Eljárás orgotein kromotográfiás elkülönítésére egy lépésben
21 168378 22 5. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy ioncserélő gyantaként tercier amino-cellulózból vagy tercier amino-dextránból álló gyantát használunk. 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 5 módja, azzal jellemezve, hogy ioncserélő gyantaként dietil-amino-etil-cellulózt, trietil-amino-etil-cellulózt vagy dietil-amino-etil-csoportokat tartalmazó térhálósított dextrán gyantát használunk. 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 10 módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási elegyként szarvasmarha, nyúl, patkány, tyúk, vagy ember vörös vérsejtjeiből elkülönített oldható fehérjék elegyét használjuk. 8. A 8. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 15 módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási elegyként szarvasmarha vörös vérsejtjeiből elkülönített oldható fehérjék elegyét használjuk. 9. A 8. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az ioncserélő gyantából 20 készült oszlopon adszorbeálódott fehérjéket olyan vizes eluálószerrel eluáljuk, amelynek ionerőssége folyamatosan nő 0,02 móltól 0,03 mólig. 10. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy ioncserélő gyantaként 25 tercier amino-cellulózt vagy tercier amino-dextránt használunk. 11. A 10. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy ioncserélő gyantaként dietü-amino-etil-cellulózt, trietil-amino-cellulózt vagy 30 dietil-amino-csoportokat tartalmazó dextrán gyantát használunk. 12. A 11. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a hemoglobintól és szénsav-anhidráztól való szabadra mosása után az 35 oszlopon adszorbeálódva maradt fehérjéket olyan vizes eluálószerrel eluáljuk, amelynek ionerőssége folyamatosan nő 0,02 móltól 0,03 mólig. vizes oldatnál nagyobb ionerősségű vizes eluálószerrel eluáljuk, és az eluátumból az orgoteint elkülönítjük, azzal jellemezve, hogy a kromatográfiás elkülönítést 5,5 és 6,5 közötti pH-értéken végezzük, az oszlopból az adszorbeálódott fehérjék egy részét, éspedig a fehérjék kiindulási elegyében jelenlevő hemoglobint és szénsav-anhidrázt 0,02 mól alatti ionerősségű vizes eluálószerrel eluáljuk, és ezután az oszlopból az adszorbeálódott fehérjék másik részét 0,02 mól és 0,03 mól közé eső ionerősségű vizes eluálószerrel eluáljuk, miközben mérjük az eluátum A26S és A 2(j() abszorpciója közül legalább az egyiket, valamint az eluátum réz- és cinktartalma közül legalább az egyiket, és ha állati vagy emberi szövetekből elkülönített fehérjék elegyét használunk kiindulási elegyként, akkor a 0,02 mól és 0,03 mól közé eső ionerősségű eluátumból elkülönítjük azt az orgoteint tartalmazó frakciót, amelynek maximális az egyik nemionos kétvegyértékű fémtartalma, valamint minimális az A26S vagy A2 8o abszorpciója, és ha kiindulási elegyként állati, vagy emberi vörös vérsejtekből elkülönített fehérjék elegyét használjuk, akkor azt az orgoteint tartalmazó frakciót különítjük el, amely az A26S /A280 arány maximum irányába történő emelkedésénél kezdődik és az A2 6s /A28 o arány, valamint a réz- vagy a cinktartalom csökkenésével fejeződik be. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási elegyként májból elkülönített, pufferekben oldható fehérjék elegyét használjuk. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy kiindulási elegyként szarvasmarha májából elkülönített, pufferekben oldható fehérjék elegyét használjuk. 4. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az orgoteint olyan vizes eluálószerrel eluáljuk, amelynek ionerőssége folyamatosan nő 0,02 mólról 0,03 mólra. 2 db rajz A kiadásért felelős: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 76-2223 - Dabasi Nyomda, Budapest - Dabas Felelős vezető: Földes György igazgató 11
