168297. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dihidroaunomicin előállítására
9 168297 1. táblázat IC I Használt Inkubáló közeg Az inkubálás és redukció körülményei, hőmérséklet, keverés yészet kora norubicin hozzanak idején, óra Kapott 20798 RP antibiotikum, % hozzáadott mikroorganizmus (összetétel g/liter Az inkubálás és redukció körülményei, hőmérséklet, keverés •< ta ca daunorubicin 0,2 1, g/hter 0,5 B. cyclooxydans A közeg: ATCC 12673 élesztő-amin glukóz 5 5 30 C° 220 f/p 24 72 " káliumdihidrofoszfát 1 30 72 19 dikáliumhidrofoszfát 1 S. roseochromogenes B közeg: szójaliszt 20 ATCC 13400 glukóz szójaolaj dikáliumhidrofoszfát 4,1 5,0 1,0 26 C° 220 f/p 30 35 52 kalciumkarbonát 2,5 54 48 32 S. lavendulae C közeg: ATCC 8664 szójaliszt 30 glukóz 50 26 C° 30 29 31 szójaolaj 5 220 f/p káliumdihidrofo szfát 1 54 30 21 kalciumkarbonát 2,5 7. példa 35 A 2. példában leírt körülmények között 30 óra hosszat inkubált 50 ml Corynebacterium simplex ATCC 6946 tenyészetet sterilen átvisszük egy 300 ml-es Erlenmeyer-lombikba. 7 pH-ra való beállítása után hozzáadunk 0,25 g lizozimet, és a lombik 40 tartalmát percenként 220 fordulattal való keverés közben 37°-on egy óra hosszat inkubáljuk. Centrifugálás után a felülúszó folyadékhoz 10 g daunorubicin-hidrokloridot adunk. Az így kapott oldatot az 1. példában leírt körülmények között inku- 45 báljuk. A daunorubicin 16 óra alatt ' 24%-os kitermeléssel 20798 RP antibiotikummá redukálódik. 8. példa 50 A 2. példában leírt körülmények között 30 óra hosszat inkubált 50 ml Corynebacterium simplex ATCC 6946 tenyészetet sterilen átvisszük egy 300 ml-es Erlenmeyer-lombikba. 7 pH-ra való beál- 55 lítás után a tenyészetet 0° körüli hőmérsékleten 15 percre kitesszük 25 kHz-es ultrahang hatásának. Centrifugálás után a felülúszó folyadékhoz 10 mg daunorubicin-hidrokloridot adunk. Az így kapott oldatot az 1. példában leírt körülmények között 60 inkubáljuk. A daunorubicin 16 óra alatt 73% kitermeléssel 20798 RP antibiotikummá redukálódik. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az I képletü dihidrodaunomicin vagy 20798 RP antibiotikum és savaddíciós sói előállítására azzal jellemezve, hogy a II képletű daunorubicint vagy egy savaddíciós sóját egy Streptomyces lavendulae ATCC 8664, Streptomyces roseochromogenes ATCC 13400, Corynebacterium simplex ATCC 6946 vagy Bacterium cyclo-oxidans ATCC 12673 törzs által termelt enzimrendszer segítségével redukáljuk, majd a keletkezett antibiotikumot elkülönítjük és tisztítjuk. (Elsőbbsége: 1974. november 25.) 2. Az 1, igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a redukciót a mikroorganizmusnak a fermentlétől elkülönített vagy elkülönítetlen sejtjei jelenlétében végezzük. (Elsőbbsége: 1973. november 27.) 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a redukciót a mikroorganizmus sejtjeiből, előnyösen azok feltárása után extrahált enzimkivonattal végezzük. (Elsőbbsége: 1974. november 25.) 1 lap rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 764185 - Zrínyi Nyomda 5