168264. lajstromszámú szabadalom • Mikrokamra elektronoptikai berendezésekkel történő vizsgálatokhoz, célszerűen biológiai objektumok "in vitro" elektronmikroszkópos vizsgálatához

5 168264 6 mérés előtt a felső részen elhelyezkedő 2 bemeneti és az alsó részen elhelyezkedő 3 kimeneti nyílást egytengelyűvé centráljuk. A preparátumtartó az elektronsugár áthaladását biztosító eszköz, például szitalemez, rostély vagy nyílással ellátott lemez lehet, amely utóbbinál a nyílásra a vizsgálandó anyagból kialakított filmet feszítünk fel. Az 1. ábrán feltüntetett mikrokamra elsősorban folyékony biológiai objektumok „in vitro" vizsgálatára alkalmas kiviteli alakját a 2. ábrán mutatjuk be. A 2. ábrán feltüntetett mikrokamra egytengelyűén kialakított vagy centrálással egytengelyűvé tehető 2 bemeneti és 3 kimeneti nyílással ellátott 1 burkolatból, az 1 burkolatban elhelyezett 4 preparátumtartóból, a vizsgálandó objektumot bevezető 5 csővezetékből, adott esetben törlővel ellátott 6 kenőszerkezetből, és a mikrokamrához a 7 csövön keresztül csatlakozó 8 nyomásellensúlyozó puffer-rendszerből áll. A 4 preparátumtartót előnyösen all záróelemmel rögzítjük. A vizsgálat során a vizsgálandó objektumot az 5 csővezetéken a 4 preparátumtartóra vezetjük, adott esetben a törlővel ellátott 6 kenőszerkezet segítségével film formájában szétterítjük a preparátumtartón, és ugyanakkor a 8 nyomásellensúlyozó puffer-rendszer segítségével folyadékgőzt, folyadékot, illetve gázt juttatunk a rendszerbe. A puffer-rendszer egyrészt a nyomáscsökkenés kompenzálására, másrészt — folyadékok alkalmazása esetén - a fiziológiás nedves atmoszféra biztosítására szolgál. Egy előnyös kialakítás szerint a törlővel ellátott 6 kenőszerkezetet reagensbevezető cső alakjában képezzük ki, és a minta szétterítésével együtt a csövön keresztül reagenst (kémiai vagy biológiai reagenst, beleértve a kontraszt-anyagokat is) juttatunk a mintára. így a kémiai, fizikokémiai, illetve biológiai reakciók vizsgálata lehetővé válik. Minthogy a találmány szerinti mikrokamrában a biológiai reakciók fiziológiás körülmények között vizsgálhatók, lehetővé válik a biológiailag aktív anyagok hatásmechanizmusának vizsgálata is. A mikrokamrához előnyösen 13 hőmérsékletszabályozót illeszthetünk, amellyel a vizsgálat közben szabályozhatjuk a rendszer hőmérsékletét. A minta hőmérséklete a 12 hőérzékélő segítségével mérhető. A 13 hőmérsékletszabályozó megfelelő hűtőközeg, például cseppfolyós nitrogén vagy hasonló alkalmazása esetén a preparátumtartón levő minta (például folyadékfilm) hirtelen lefagyasztására is felhasználható. Ebben az esetben a biológiai objektum egyes elemeit, például a vizsgálandó sejteket károsodás nélkül rögzíthetjük egy adott helyzetben. A 13 hőmérsékletszabályozót célszerűen a vizsgálandó anyag bevezetésével ellentétes oldalon alakítjuk ki. A mikrokamrát kívánt esetben részben vagy teljes egészében körülvehetjük egy cseppfolyós nitrogénnel vagy más alkalmas, mélyhűtést biztosító anyaggal hűtött 9 védőburkolattal. Ez a védőburkolat lefagyasztás útján megakadályozza, hogy a vizsgált objektum az elektronmikroszkópba vagy környezetébe kerüljön. A 9 védőburkolat a biztosított szennyezésvédelmen kívül lehetővé teszi, hogy a mikrokamra körül a nyomást a lehető legkisebb értéken tartsuk. A nagy vákuum fenntartása érdekében, a szokásos kialakítású elektron-5 mikroszkópokba pótszivattyút is be kell iktatnunk. Az 1. ábrán feltüntetett mikrokamra elsősorban lefagyasztott szövetminták vizsgálatára alkalmas kiviteli alakját a 3. ábrán mutatjuk be. A 3. ábrán feltüntetett mikrokamra egyten-10 gelyűen kialakított vagy centrálással egytengelyűvé tehető 2 bemeneti és 3 kimeneti nyílással ellátott 1 burkolatból, az 1 burkolatban elhelyezett 4 preparátumtartóból, valamint a 8 nyomásellensúlyozó puffer-rendszerből áll, amely célszerűen a 15 7 csövön keresztül csatlakozik a mikrokamrához. A 4 preparátumtartóhoz lefagyasztott szövetminták vizsgálata esetén a 14 hűtőtartály csatlakozik. Egyes esetekben, például kevéssé illékony anyagok vizsgálatakor, a 3. ábrán bemutatott mikrokamrába 20 helyezett 4 preparátumtartóhoz nem szükséges hűtőtartályt csatlakoztatni. A 4 preparátumtartó önmagában ismert eszköz is lehet, ilyen például a Philips cég preparátum-25 tartó rúdja. Egy előnyös kialakítás szerint a mikrokamrába helyezett preparátumra a 10 csövön keresztül reagenst, célszerűen kontraszt-anyagot párologtathatunk. 30 A mikrokamrát kívánt esetben részben vagy teljes egészében körülvehetjük egy cseppfolyós nitrogénnel vagy más alkalmas, mélyhűtést biztosító anyaggal hűtött 9 védőburkolattal. A 9 védőburkolat szerepe azonos a 2. ábrán bemutatott 35 mikrokamra val kapcsolatban közöltekkel. A nagy vákuum fenntartása érdekében ebben az esetben is pótszivattyút kell beiktatnunk a szokásos kialakítású elektronmikroszkópokba. 40 Az 1. ábrán bemutatott mikrokamra a minta felületszerkezetének elektronoptikai berendezésekkel történő vizsgálatához adaptált kiviteli alakját a 4. ábrán mutatjuk be. A 4. ábrán bemutatott mikrokamra az 1. ábra szerintitől lényegében csak 45 a nyílások elrendezési módjában tér el. A 4. ábrán bemutatott mikrokamra 1 burkolatán az elektronsugár útjába eső legalább egy 2 bementi nyílás van kialakítva. A 2 bemeneti nyíláson belépő elektronsugár a 4 preparátumtartón elhelyezett mintáról 50 visszaverődve a 2 bemeneti nyíláson lép ki, és ott detektálható. Kívánt esetben, ha a detektálást más ponton kívánjuk végezni, az 1 burkolat tetszés szerinti helyén tetszés szerinti számú 3 kimeneti nyílást alakíthatunk ki, ahol a visszavert elektron-55 sugarat detektálhatjuk. A mikrokamrához ebben az esetben is 8 nyomásszabályozó puffer-rendszer csatlakozik a 7 csőcsonkon keresztül, amelynek kialakítása azonos 60 a korábban ismertetettekkel. Az 1 burkolaton kialakított nyílás vagy nyílások adott esetben a 15 záróelemmel lezárhatók, záróelem beiktatására azonban nincs minden esetben szükség. A mikrokamrát kívánt esetben részben vagy teljes egé-65 szében körülvehetjük egy, a korábban ismertetettel 3