168188. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-cefém-3-on- 4-karbonsav-származékok előállítására
37 168188 38 állandósulásáig dietiléteres diazometán-oldatot adunk. A reakcióelegyet 10 percig jégfürdőn keverjük, majd bepároljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk. 2 : 1 arányú toluol-etilacetát eleggyel az olajos 7/3-amino-3-metoxi-3-cefem4-karbonsav-difenilmetilésztert eluáljuk. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen, előhívás jóddal): Rf=0,39, etilacetáttal futtatva. UV-abszorpciós spektrum (etanolban): Xmax = 265 m/x (e = 6100), IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban), jellemző sávok 3,33, 5,63, 5,81 és 6,23 ju-nál. További, etilacetáttal végzett elució olajos 70-dimetil amino-3 -metoxi-3-cefem4-karb onsav-difenilmetilésztert eredményez, vékonyrétegkromatogram (szilikagélen, előhívás jódgőzzel): Rf=0,20, etilacetáttal futtatva. UV-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok, 2,89, 3,33, 5,62, 5,81 és 6,24//-nál. 0,253 g D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-(l,4-ciklohexadienil)-ecetsav 75 ml metilénkloridos, 0°-ra hűtött oldatát 30 percen át 0,097 ml N-metil-morfolinnal és 0,129 ml klórecetsavizobutilészterrel keverjük nitrogénatmoszférában, majd —10°-ra hűtjük egymás után 0,30 g 70-amino-3-metoxi-3-cefem4--karbonsav-difenilmetilésztert és 0,085 ml N-metil-morfolint adunk hozzá. A reakcióelegyet 30 percen át —10°-on, majd további 30 percen át 0° hőmérsékleten keverjük, ezután 30 ml vizet adunk hozzá, és a pH-értéket 40%-os vizes dikáliumhidrogénfoszfát-oldat hozzáadásával 7,9-re állítjuk. A fázisokat elválasztjuk, a vizes oldatot metilénkloriddal mossuk, a szerves fázisokat egyesítjük és telített vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, majd nátriumszulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot preparatív vékony rétegkromatográfiá val (szilikagélen, rendszer dietiléter, kimutatás UV-fénnyel, Rf = 0,39) tisztítjuk. Ily módon vékonyrétegkromatográfiásan egységes 7|3-[D-a-terc-butiloxikarbonilä m i n o-a-( 1,4-ciklohexadienil)-acetilamino ]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilésztert kapunk, amorf termékként. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf=0,39, dietiléterrel futtatva. [aß0=+l°±l o (c = 0,745, kloroformban), UV-abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): \max = 263 m/a(e = 6700) és Xva n = 280nvi (e = 6300), IR-spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 2,96, 5,64, 5,86, 5,90 (váll), 6,27 és 6,73ju-nál. 0,200 g 70-[D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-(l ,4-ciklohexadienil)-acetilamino ]-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészter, 0,5 ml anizol és 10 ml előre lehűtött trifluorecetsav elegyét 15 percig 0°-on keverjük, majd 50 ml hideg toluolt adunk hozzá, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietiléterrel keverjük, és a por alakú csapadékot szűrjük és szárítjuk. Az így keletkezett 7/3-[D-a-amino-a-(l ,4-ciklohexadienil)-acetilamino]-3-metoxi-3-cefem4-karbonsav-trifIuoracetátot körülbelül 6 ml vízben oldjuk, az oldat pH-értékét 2n sósav hozzáadásával 1,5 értékre állítjuk, a vizes oldatot 20 ml etilacetáttal mossuk, és a pH értéket 20%-os metanolos trietilamin-oldat hozzácsepegtetésével 5,0 értékre állítjuk. Az oldatot 20 ml acetonnal és 10 ml dietiléterrel hígítjuk és az elegyet 16 órán át 0°-on állni hagyjuk. A 5 keletkezett csapadékot leszűrjük, acetonnal és dietiléterrel mossuk és szárítjuk. így a 7|3-[D-a-amino-a-( 1,4-ciklohexadienil)-acetilamino]-3-metoxi-3-cefem4-karbonsavat kapjuk belső sójaként. Op.: 170° (bomlás közben). Vékonyrétegkromatogram: (szi-10 likagélen, előhívás jóddal) Rf=0,26, n-butanol-ecetsav-víz 67:10:23 rendszerben és Rf=0,58, izopropanol-hangyasav-víz 77 : 4 :19 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum: Xmax = 267 mß (e = 6100) 0,1 n sósavban és Xmax = 268 mß (e = 6600) 0,1 n 15 vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban. 21. példa 20 256,3 g 3-metoxi-7|3-(D-a-terc-butiloxikarbonilami n o -a - f enilacetilamino)-3-cefem-4-karbonsav-difenilmetilészterhez 250 ml anizol és 1200 ml metilénklorid elegyét adjuk, és az elegyet 1200 ml 0°-ra hűtött trifluorecetsawal kezeljük. 30 percig 0°-on 25 állni hagyjuk, majd a reakcióelegyet 15 perc alatt 12000 ml 0°-ra hűtött, 1:1 arányú dietiléter-petroléter eleggyel hígítjuk. A kivált 3-metoxi-7j3--(D-a-fenilglicilamino)-3-cefem4-karbonsav-trifluoracetátot leszűrjük, dietiléterrel mossuk, csökkentett 30 nyomáson szárítjuk, majd 1900 ml vízben oldjuk. A sárgás színű szennyezések eltávolítására az oldatot 900 ml etilacetáttal mossuk, a szerves mosófolyadékot elöntjük és a vizes oldat eredeti kb. l,5pH-ját 20%-os metanolos trietilamin-oldattal 35 4,5-re állítjuk. A 3-metoxi-7j3-(D-a-fenilglicilamino)-3-cefem-4-karbonsav belső sója dihidrátként színtelen prizmás alakban kristályosodik ki, melyet 1800 ml aceton hozzáadása és 2 órás, 0°-on történő keverés után leszűrünk. Op.: 175—177° 40 (bomlás közben) [a]?,0 =+138° + 1° (c=l, 0,1 n sósavban). UV-abszorpciós spektrum (0,1 n vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatban): Xmax = 265 m^) (e = 6500). IR-abszorpciós spektrum (ásványi olajban): jellemző sávok 2,72, 2,87, 3,14, 3,65, 45 5,68, 5,90, 6,18, 6,37, 6,56, 6,92, 7,16, 7,58, 7,74, 7,80, 8,12, 8,30, 8,43, 8,52, 8,65, 8,95, 9,36, 9,55, 9,70, 10,02, 10,38, 10,77, 11,70, 12,01, 12,15, 12,48, 12,60, 12,87, 13,45 és 14,30/i-nál. 50 Mikroanalízis: C16 H 17 0 5 N 3 S-2H 2 0 képletből (Ms = 399,42) számított: C =48,11%, H =5,30%, 55 N =10,52%, S =8,03%, mért: , . C = 47,86%, H = 5,27%, N = 10,47%, S = 8,00%. 60 22. példa 0,06 g 3-metoxi-7ß-fenilacetilamino-3-cefem4-kar-bonsav-difenilmetilészter és 0,05 ml anizol elegyét és 1 ml trifluorecetsavat 5 percig szobahőmérsék-65 léten állni hagyunk, majd az elegyet csökkentett 19
